馬玉和+李永仁+郭永軍+邢克智

摘 要：利用自然海水和天然餌料，采用無泥砂采苗方法，在天津沿海成功開展了青蛤工廠化育苗。幼蟲初始?xì)らL（120±1.28）μm，殼長平均日增長5.05 μm，成活率23.0%；第19～31 d為變態(tài)期，殼長平均日增長14.1 μm，變態(tài)率32.9%；變態(tài)后至第53 d，殼長平均日增長32.5 μm，成活率82.3%。本次育苗試驗充分利用天津沿海水質(zhì)條件與環(huán)境特點，改進育苗方法，建立了適于天津海區(qū)的青蛤人工育苗工藝，共得到雙水管稚貝約1.25億枚。

關(guān)鍵詞：青蛤；人工育苗；生長；成活

中圖分類號：S917 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

青蛤?qū)匐p殼鋼，簾蛤目，簾蛤科，為我國南北沿海重要的灘涂養(yǎng)殖貝類之一[1]。青蛤是天津沿海主要經(jīng)濟貝類[2]，因其對鹽度難受范圍廣泛[3]，是一種適于在天津灘涂及池塘中大面積推廣增養(yǎng)殖的經(jīng)濟貝類。近年來，天津市青蛤養(yǎng)殖面積逐年增加，增殖放流力度逐年加大[2]，但苗種主要來自南方的浙江、福建，在天津的養(yǎng)殖過程中出現(xiàn)生長速度慢、死亡率高的現(xiàn)象，成為天津青蛤產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸，故本地土著苗種的大規(guī)模人工繁育迫在眉睫。

1980年以來，我國的青蛤育苗研究在多地展開，取得全人工育苗的重大突破[4]，但由于水處理以及餌料等方面的限制，傳統(tǒng)的育苗技術(shù)在天津沿海難以應(yīng)用。2013年5-7月，天津市海升水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司與國家貝類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系天津綜合試驗站合作，開展了天津土著青蛤的生產(chǎn)性室內(nèi)人工苗種繁育實驗。在實驗過程中，結(jié)合天津沿海特有的水質(zhì)和氣候條件，大膽改革育苗工藝，實現(xiàn)青蛤苗種規(guī)模培育，為青蛤在天津的產(chǎn)業(yè)化養(yǎng)殖奠定了基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

育苗室房頂覆蓋玻璃鋼瓦和保溫板，育苗池長方體、半露式，規(guī)格為5 m×3.2 m×1.3 m。采用鍋爐和熱交換器配合進行海水升溫，采用地下水和熱交換器配合進行海水降溫。給水管道均宜采用PVC管，每個育苗池并列設(shè)置海水和淡水龍頭各1個，用來調(diào)節(jié)海水鹽度。育苗池底設(shè)排水孔，廢水通過排水溝流出，排水溝低于池底30～50 cm。

育苗場內(nèi)設(shè)沉淀池，海水由面積為133.3 hm2的粗養(yǎng)蝦池引入，單胞藻含量保持在1×105～5×106cells/mL，鹽度范圍28‰～35‰。水處理措施為：由沉淀池進水，200 目篩絹配合脫脂棉濾袋，將海水濾入室內(nèi)30 m3水泥池，加入淡水，曝氣混勻，鹽度調(diào)節(jié)至25‰，進入育苗池前再經(jīng)200目篩絹過濾。經(jīng)處理的海水，懸浮泥沙顆粒明顯減少，海水褐綠色，含豐富單胞藻類，作為育苗用水。

親貝采于海升公司133.3 hm2的粗養(yǎng)蝦池，殼齡3～4齡，性腺成熟，平均殼長（39.80±3.56）mm，暫養(yǎng)24 h后催產(chǎn)。

1.2 催產(chǎn)與孵化

種貝陰干4 h，置入注滿新鮮海水的育苗池中，充氣流水加生殖產(chǎn)物刺激，0.5～1 h后排放精、卵，當(dāng)產(chǎn)卵池卵子密度達(dá)15～20粒/mL時，立即將種貝移入下一產(chǎn)卵池。受精卵孵化階段保持微充氣，水溫24～25 ℃，經(jīng)20 h發(fā)育至D形幼蟲，立即進行倒池并選幼。

經(jīng)過促熟，種貝性腺飽滿充盈，采用陰干、流水及性腺產(chǎn)物刺激的綜合方法進行催產(chǎn)。當(dāng)產(chǎn)卵池卵子密度達(dá)30～50粒/mL時，立即將種貝移入下一產(chǎn)卵池。受精卵孵化階段保持微充氣，水溫24～25 ℃，經(jīng)20～22 h發(fā)育至D形幼蟲，立即倒池，并以300目篩絹進行選幼，統(tǒng)計幼蟲數(shù)量。

1.3 浮游幼蟲

幼蟲培育密度，面盤幼蟲初期10～15個/mL，殼頂期，結(jié)合倒池，逐漸減小密度至5～10個/mL，受精后4～5 d，幼蟲轉(zhuǎn)入底棲，密度減至3～5個/mL，臨近變態(tài)以及變態(tài)期間不超過2 個/mL，變態(tài)后的稚貝隨生長不斷降低密度。浮游幼蟲及附著變態(tài)階段控制水溫在24～25 ℃，鹽度25‰，光照強度1 000 lx以下。

購入濃縮鹽藻（2×108 cells /mL）、新月菱形藻（2×108 cells /mL） 以及小球藻（2×1010 cells /mL）作為幼蟲餌料。轉(zhuǎn)變?yōu)镈形幼蟲第2 d開始投喂鹽藻及新月菱形藻（2×104 cells /mL），另加海洋紅酵母1×104 cells /mL，2 d后，幼蟲消化能力增強，餌料主要來自海水中的天然餌料，每天換水以補充自然餌料。適量搭配小球藻，維持水體單胞藻濃度5×104～1×105 cells /mL。變態(tài)后，維持水深0.5 m，每天早晚納入海水，每次換水量50%～80%，同時投喂螺旋藻粉1～2 g/m3。

1.4 數(shù)據(jù)分析

定期取樣，測量幼蟲殼長（30個樣本），Tukey 法計算平均殼長及標(biāo)準(zhǔn)差；孵化率為初始D形幼蟲數(shù)與受精卵數(shù)之比；浮游幼蟲期成活率為測量時幼蟲數(shù)量與初始D形幼蟲數(shù)量之比；變態(tài)率為變態(tài)后稚貝與匍匐幼蟲數(shù)量之比；稚貝成活率為測量時稚貝數(shù)量與初期稚貝數(shù)量之比。

2 結(jié)果與分析

2.1 產(chǎn)卵與孵化

親貝性比（♀：♂）為19∶18，排卵率72%，平均每枚雌貝排卵量為89萬，獲得受精卵24.2億，受精率97.6%。受精后22 h統(tǒng)計D形幼蟲，共獲得D形幼蟲19.8 億，孵化率81.8%。青蛤卵徑86 μm，初始?xì)らL（120±1.28） μm。

2.2 浮游幼蟲生長與成活

受精16 h開始出現(xiàn)D形幼蟲，經(jīng)3 d后轉(zhuǎn)變?yōu)闅ろ斊谟紫x，受精后5～6 d，幼蟲下沉轉(zhuǎn)變?yōu)榘敫∮伟胭橘霠顟B(tài)，受精后19 d后殼長達(dá)到216 μm，全部轉(zhuǎn)變?yōu)橘橘胗紫x，足伸縮頻繁，大部分幼蟲面盤退化，陸續(xù)進入變態(tài)階段。在此期間，每3 d測量平均殼長及成活率（表1）。

浮游幼蟲階段，殼長日均增長5.05 μm，其中，1～4 d和13～19 d生長較快，但第7～10 d，水溫升高，導(dǎo)致幼蟲生長緩慢，日增長僅0.2 μm，同時幼蟲死亡近半，通過熱交換方式，將水溫降至25 ℃，幼蟲生長及存活恢復(fù)正常。經(jīng)過19 d的培育，得到即將變態(tài)的青蛤幼蟲4.6億。

3.3 變態(tài)期及稚貝

青蛤幼蟲經(jīng)過15～20 d的培育，陸續(xù)出現(xiàn)眼點，受精后第19 d，倒池，采用無附著基采苗法（無沙采苗法）進行采苗。 同時加大換水量、增加投餌量。投餌量增加到6萬～10萬個細(xì)胞/mL，另補充螺旋藻粉或蛋黃作為替代餌料。變態(tài)期幼蟲殼長增長14.1 μm/d，幼蟲成活率37%，變態(tài)率32.9%（表2），至受精后31 d，得稚貝1.5億。

稚貝附著后，生長迅速，且成活率較高。2～3 d后殼長達(dá)400 μm，出水管形成；再過20 d左右，平均殼長達(dá)1 100 μm，成活率82.3%，出、入水管完全形成，開始營穴居生活，進入苗種中間培育階段。得到雙水管稚貝1.25億。

3 討論

3.1 天津沿海青蛤人工育苗的特點

由于天津沿岸灘涂縱深廣闊，且為泥沙質(zhì)海灘[5]，因此，在開展育苗的5-7月份，天津海區(qū)近岸海水水質(zhì)混濁，有機質(zhì)豐富。經(jīng)過沉淀池后，用封閉式砂濾器處理海水，濾料堵塞，砂濾器使用周期短（5～10 d），成本提高。未經(jīng)砂濾的海水，難用于培養(yǎng)單胞藻類。

天津地區(qū)池塘及淺海水質(zhì)肥沃，池塘水體中自然繁殖豐富的單細(xì)胞藻類，密度可高達(dá)107 cells /mL，主要藻類種群因池塘條件而不同。因此，可通過選擇不同池塘水源以及大量的換水，供應(yīng)幼蟲餌料。幼蟲開口后2 d內(nèi)，需要搭配投喂開口餌料，如等鞭金藻、鹽藻、海洋酵母等，通過購買解決，2 d后依靠自然餌料，變態(tài)后，稚貝食量明顯增加，加大換水量，同時搭配投喂螺旋藻粉。在整個育苗期間，采取以自然餌料為主，購買的開口餌料與螺旋藻粉為輔的投喂方式，簡化了育苗程序，降低了成本。

由于海水未經(jīng)砂濾等處理過程，隨水流進入池內(nèi)的敵害生物較多，特別是匍匐期及變態(tài)期間，幼蟲移動性差，抗逆性弱，池底的敵害生物導(dǎo)致幼蟲和稚貝大量死亡，觀察到車輪蟲等原生動物進入體弱稚貝，吮食軟體部。育苗池經(jīng)常換水，清除池底雜物，可降低敵害動物的危害。

3.2 無附著基采苗

傳統(tǒng)的青蛤育苗技術(shù)采用細(xì)沙基采苗，采苗效果良好，但制作、處理及投放附著基極大地增加了人力成本，而且底質(zhì)中帶入的浮泥影響幼苗的變態(tài)率及存活率。

本試驗采用無附著基苗種繁育方式，簡化了幼苗換水流程，顯著降低了勞動強度，同時降低了生產(chǎn)成本。變態(tài)期幼蟲殼長增長14.1 μm/d，生長速度基本正常。幼蟲成活率37%，低于任福海等人2001年青蛤育苗試驗的85.6%[6]，陳堅的研究也表明，對比用黃沙和海泥采苗，無泥沙采苗方式的稚貝成活率低[7]。但本實驗中，稚貝階段生長迅速，且成活率高，其原因為：采用未經(jīng)砂濾處理的海水作為育苗用水，且應(yīng)用無泥沙采苗，造成池底敵害生物滋生，對貝苗影響較大，在匍匐期和變態(tài)期淘汰弱苗，造成此階段存活率降低；完成變態(tài)的稚貝適應(yīng)性增強，成活率提高。

3.3 抑食性海球金藻的影響

2011年以來，在天津海區(qū)，抑食性海球金藻的爆發(fā)已呈常態(tài)化，每年5月底至6月底為高峰期，恰逢貝類性腺發(fā)育及苗種繁育的關(guān)鍵時期[8]。在抑食性海球金藻影響下，種貝不能攝食，D形幼蟲攝食完全抑制，不能存活，因此，即使種貝性腺發(fā)育成熟，亦不能進行催產(chǎn)育苗。

改變育苗工藝，最大限度地減小海球金藻的影響，是北方海區(qū)貝類育苗成敗的關(guān)鍵。本次育苗試驗中發(fā)現(xiàn)：不同海水池塘中，抑食性海球金藻濃度不同，個別池塘未檢出，可以作為貝類育苗的水源，這為今后的貝類育苗活動提供了參考。

參考文獻(xiàn)：

[1] 楊星星，陳堅，于業(yè)紹，等.青蛤工廠化育苗生產(chǎn)性試驗[J].海洋漁業(yè)，2004，26（2）：126-130

[2] 邢克智，高一力，郭永軍等.天津市貝類產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展展望[J].水產(chǎn)科學(xué)，2013，32（9）：555-558

[3] 王興強，曹梅，閻斌倫，等.青蛤的生物學(xué)及其繁殖[J].水產(chǎn)科學(xué)，2006，25（6）：312-316

[4] 于業(yè)紹，周琳.青蛤工廠化育苗[J].上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報，1998，7（2）：121-129

[5] 張潤生，孫秋巖.天津市海岸帶和灘涂資源綜合調(diào)查報告-海洋生物[M].天津：天津新聞出版管理局，1986

[6] 任福海，劉吉明，楊輝，等.青蛤室內(nèi)人工育苗試驗[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2003，22（3）：27-28

[7] 陳堅，楊星星，柯愛英等.青蛤人工育苗中附著基的選擇.上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報，2006，15（1）：114-117

[8] 柯巧珍，李琪，陳常杰，等.黃河三角洲青蛤的繁殖生物學(xué)研究.中國海洋大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）2010，40（增刊）：99-103

3.3 變態(tài)期及稚貝

青蛤幼蟲經(jīng)過15～20 d的培育，陸續(xù)出現(xiàn)眼點，受精后第19 d，倒池，采用無附著基采苗法（無沙采苗法）進行采苗。 同時加大換水量、增加投餌量。投餌量增加到6萬～10萬個細(xì)胞/mL，另補充螺旋藻粉或蛋黃作為替代餌料。變態(tài)期幼蟲殼長增長14.1 μm/d，幼蟲成活率37%，變態(tài)率32.9%（表2），至受精后31 d，得稚貝1.5億。

稚貝附著后，生長迅速，且成活率較高。2～3 d后殼長達(dá)400 μm，出水管形成；再過20 d左右，平均殼長達(dá)1 100 μm，成活率82.3%，出、入水管完全形成，開始營穴居生活，進入苗種中間培育階段。得到雙水管稚貝1.25億。

3 討論

3.1 天津沿海青蛤人工育苗的特點

由于天津沿岸灘涂縱深廣闊，且為泥沙質(zhì)海灘[5]，因此，在開展育苗的5-7月份，天津海區(qū)近岸海水水質(zhì)混濁，有機質(zhì)豐富。經(jīng)過沉淀池后，用封閉式砂濾器處理海水，濾料堵塞，砂濾器使用周期短（5～10 d），成本提高。未經(jīng)砂濾的海水，難用于培養(yǎng)單胞藻類。

天津地區(qū)池塘及淺海水質(zhì)肥沃，池塘水體中自然繁殖豐富的單細(xì)胞藻類，密度可高達(dá)107 cells /mL，主要藻類種群因池塘條件而不同。因此，可通過選擇不同池塘水源以及大量的換水，供應(yīng)幼蟲餌料。幼蟲開口后2 d內(nèi)，需要搭配投喂開口餌料，如等鞭金藻、鹽藻、海洋酵母等，通過購買解決，2 d后依靠自然餌料，變態(tài)后，稚貝食量明顯增加，加大換水量，同時搭配投喂螺旋藻粉。在整個育苗期間，采取以自然餌料為主，購買的開口餌料與螺旋藻粉為輔的投喂方式，簡化了育苗程序，降低了成本。

由于海水未經(jīng)砂濾等處理過程，隨水流進入池內(nèi)的敵害生物較多，特別是匍匐期及變態(tài)期間，幼蟲移動性差，抗逆性弱，池底的敵害生物導(dǎo)致幼蟲和稚貝大量死亡，觀察到車輪蟲等原生動物進入體弱稚貝，吮食軟體部。育苗池經(jīng)常換水，清除池底雜物，可降低敵害動物的危害。

3.2 無附著基采苗

傳統(tǒng)的青蛤育苗技術(shù)采用細(xì)沙基采苗，采苗效果良好，但制作、處理及投放附著基極大地增加了人力成本，而且底質(zhì)中帶入的浮泥影響幼苗的變態(tài)率及存活率。

本試驗采用無附著基苗種繁育方式，簡化了幼苗換水流程，顯著降低了勞動強度，同時降低了生產(chǎn)成本。變態(tài)期幼蟲殼長增長14.1 μm/d，生長速度基本正常。幼蟲成活率37%，低于任福海等人2001年青蛤育苗試驗的85.6%[6]，陳堅的研究也表明，對比用黃沙和海泥采苗，無泥沙采苗方式的稚貝成活率低[7]。但本實驗中，稚貝階段生長迅速，且成活率高，其原因為：采用未經(jīng)砂濾處理的海水作為育苗用水，且應(yīng)用無泥沙采苗，造成池底敵害生物滋生，對貝苗影響較大，在匍匐期和變態(tài)期淘汰弱苗，造成此階段存活率降低；完成變態(tài)的稚貝適應(yīng)性增強，成活率提高。

3.3 抑食性海球金藻的影響

2011年以來，在天津海區(qū)，抑食性海球金藻的爆發(fā)已呈常態(tài)化，每年5月底至6月底為高峰期，恰逢貝類性腺發(fā)育及苗種繁育的關(guān)鍵時期[8]。在抑食性海球金藻影響下，種貝不能攝食，D形幼蟲攝食完全抑制，不能存活，因此，即使種貝性腺發(fā)育成熟，亦不能進行催產(chǎn)育苗。

改變育苗工藝，最大限度地減小海球金藻的影響，是北方海區(qū)貝類育苗成敗的關(guān)鍵。本次育苗試驗中發(fā)現(xiàn)：不同海水池塘中，抑食性海球金藻濃度不同，個別池塘未檢出，可以作為貝類育苗的水源，這為今后的貝類育苗活動提供了參考。

參考文獻(xiàn)：

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[2] 邢克智，高一力，郭永軍等.天津市貝類產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展展望[J].水產(chǎn)科學(xué)，2013，32（9）：555-558

[3] 王興強，曹梅，閻斌倫，等.青蛤的生物學(xué)及其繁殖[J].水產(chǎn)科學(xué)，2006，25（6）：312-316

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[5] 張潤生，孫秋巖.天津市海岸帶和灘涂資源綜合調(diào)查報告-海洋生物[M].天津：天津新聞出版管理局，1986

[6] 任福海，劉吉明，楊輝，等.青蛤室內(nèi)人工育苗試驗[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2003，22（3）：27-28

[7] 陳堅，楊星星，柯愛英等.青蛤人工育苗中附著基的選擇.上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報，2006，15（1）：114-117

[8] 柯巧珍，李琪，陳常杰，等.黃河三角洲青蛤的繁殖生物學(xué)研究.中國海洋大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）2010，40（增刊）：99-103

3.3 變態(tài)期及稚貝

青蛤幼蟲經(jīng)過15～20 d的培育，陸續(xù)出現(xiàn)眼點，受精后第19 d，倒池，采用無附著基采苗法（無沙采苗法）進行采苗。 同時加大換水量、增加投餌量。投餌量增加到6萬～10萬個細(xì)胞/mL，另補充螺旋藻粉或蛋黃作為替代餌料。變態(tài)期幼蟲殼長增長14.1 μm/d，幼蟲成活率37%，變態(tài)率32.9%（表2），至受精后31 d，得稚貝1.5億。

稚貝附著后，生長迅速，且成活率較高。2～3 d后殼長達(dá)400 μm，出水管形成；再過20 d左右，平均殼長達(dá)1 100 μm，成活率82.3%，出、入水管完全形成，開始營穴居生活，進入苗種中間培育階段。得到雙水管稚貝1.25億。

3 討論

3.1 天津沿海青蛤人工育苗的特點

由于天津沿岸灘涂縱深廣闊，且為泥沙質(zhì)海灘[5]，因此，在開展育苗的5-7月份，天津海區(qū)近岸海水水質(zhì)混濁，有機質(zhì)豐富。經(jīng)過沉淀池后，用封閉式砂濾器處理海水，濾料堵塞，砂濾器使用周期短（5～10 d），成本提高。未經(jīng)砂濾的海水，難用于培養(yǎng)單胞藻類。

天津地區(qū)池塘及淺海水質(zhì)肥沃，池塘水體中自然繁殖豐富的單細(xì)胞藻類，密度可高達(dá)107 cells /mL，主要藻類種群因池塘條件而不同。因此，可通過選擇不同池塘水源以及大量的換水，供應(yīng)幼蟲餌料。幼蟲開口后2 d內(nèi)，需要搭配投喂開口餌料，如等鞭金藻、鹽藻、海洋酵母等，通過購買解決，2 d后依靠自然餌料，變態(tài)后，稚貝食量明顯增加，加大換水量，同時搭配投喂螺旋藻粉。在整個育苗期間，采取以自然餌料為主，購買的開口餌料與螺旋藻粉為輔的投喂方式，簡化了育苗程序，降低了成本。

由于海水未經(jīng)砂濾等處理過程，隨水流進入池內(nèi)的敵害生物較多，特別是匍匐期及變態(tài)期間，幼蟲移動性差，抗逆性弱，池底的敵害生物導(dǎo)致幼蟲和稚貝大量死亡，觀察到車輪蟲等原生動物進入體弱稚貝，吮食軟體部。育苗池經(jīng)常換水，清除池底雜物，可降低敵害動物的危害。

3.2 無附著基采苗

傳統(tǒng)的青蛤育苗技術(shù)采用細(xì)沙基采苗，采苗效果良好，但制作、處理及投放附著基極大地增加了人力成本，而且底質(zhì)中帶入的浮泥影響幼苗的變態(tài)率及存活率。

本試驗采用無附著基苗種繁育方式，簡化了幼苗換水流程，顯著降低了勞動強度，同時降低了生產(chǎn)成本。變態(tài)期幼蟲殼長增長14.1 μm/d，生長速度基本正常。幼蟲成活率37%，低于任福海等人2001年青蛤育苗試驗的85.6%[6]，陳堅的研究也表明，對比用黃沙和海泥采苗，無泥沙采苗方式的稚貝成活率低[7]。但本實驗中，稚貝階段生長迅速，且成活率高，其原因為：采用未經(jīng)砂濾處理的海水作為育苗用水，且應(yīng)用無泥沙采苗，造成池底敵害生物滋生，對貝苗影響較大，在匍匐期和變態(tài)期淘汰弱苗，造成此階段存活率降低；完成變態(tài)的稚貝適應(yīng)性增強，成活率提高。

3.3 抑食性海球金藻的影響

2011年以來，在天津海區(qū)，抑食性海球金藻的爆發(fā)已呈常態(tài)化，每年5月底至6月底為高峰期，恰逢貝類性腺發(fā)育及苗種繁育的關(guān)鍵時期[8]。在抑食性海球金藻影響下，種貝不能攝食，D形幼蟲攝食完全抑制，不能存活，因此，即使種貝性腺發(fā)育成熟，亦不能進行催產(chǎn)育苗。

改變育苗工藝，最大限度地減小海球金藻的影響，是北方海區(qū)貝類育苗成敗的關(guān)鍵。本次育苗試驗中發(fā)現(xiàn)：不同海水池塘中，抑食性海球金藻濃度不同，個別池塘未檢出，可以作為貝類育苗的水源，這為今后的貝類育苗活動提供了參考。

參考文獻(xiàn)：

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