姜妍等

摘 要：目的——觀察蕎麥黃酮復(fù)合物對(duì)小鼠白色念珠菌性陰道炎IGFBP7的影響，評(píng)價(jià)蕎麥黃酮復(fù)合物的療效。方法——苯甲酸雌二醇刺激下構(gòu)建小鼠白色念珠菌陰道炎模型，以蕎麥黃酮復(fù)合物為治療組，西藥氟康唑和中藥潔爾陰作為有效標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照。以Western Blot 法檢測(cè)各組胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7（IGFBP7）含量。結(jié)果——與模型對(duì)照組比較蕎麥黃酮復(fù)合物，可以抑制IGFBP7的高表達(dá)，其高劑量組作用與中藥潔爾陰組相近似，并且呈一定的劑量依賴(lài)性。結(jié)論——蕎麥黃酮復(fù)合物對(duì)小鼠白色念珠菌性陰道炎IGFBP7蛋白的高表達(dá)具有抑制作用，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

關(guān)鍵詞：蕎麥黃酮復(fù)合物 ；胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7（IGFBP7） ；白念珠菌性陰道炎；Western Blot法

1.材料

雌性SPF級(jí)昆明小鼠（北京華阜康生物科技股份有限公司）；唐山市開(kāi)灤醫(yī)院檢驗(yàn)科提供白色念珠菌臨床新分離菌株。蕎麥黃酮復(fù)合物：采用正交試驗(yàn)法以水加分離劑（殼聚糖）提取蕎麥黃酮復(fù)合物（成熟技術(shù)），配伍葛根、天花粉、麥冬、玄參和麻仁的水提物制成；顯微鏡（常州銳品精密儀器有限公司）。

2.方法

（1）模型建立與分組。將75只昆明雌性小鼠隨機(jī)挑出15只做空白對(duì)照組。剩余60只隔日皮下注射苯甲酸雌二醇注射液0.1 ml·d-1 使小鼠處于假發(fā)情狀態(tài)，6天后將密度為2.5×106 cfu·mL-1的菌懸液20?L（即白色念珠菌孢子接種量為5×104cfu），灌注入小鼠陰道內(nèi)。在接種白色念珠菌孢子后第2—5天對(duì)小鼠進(jìn)行模型鑒定：兩次分別隨機(jī)挑選5只進(jìn)行外陰情況觀察、鏡檢、處死后做陰道病理組織切片。結(jié)果發(fā)現(xiàn)外陰陰道腫脹并有膿性分泌物，鏡檢有大量孢子并有菌絲生成，觀察陰道病理組織切片有充血、紅腫即確定造模成功。造模成功后對(duì)60只小鼠進(jìn)行隨機(jī)分組：模型對(duì)照組、西藥氟康唑組、中藥潔爾陰洗液對(duì)照組、蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量組、蕎麥黃酮復(fù)合物中劑量組、蕎麥黃酮復(fù)合物低劑量組。

（2）指標(biāo)檢測(cè)。頸椎脫臼處死小鼠后，取陰道黏膜，Western Blot檢測(cè)各組IGFBP7蛋白含量。

（3） 統(tǒng)計(jì)分析方法。計(jì)量資料表示，所有結(jié)果比較均采用SPSS16.0 軟件進(jìn)行，計(jì)量資料數(shù)據(jù)采用方差分析。

3.結(jié)果

如表顯示，IGFBP7蛋白于正常對(duì)照組陰道黏膜有少量表達(dá)。模型組陰道黏膜IGFBP7蛋白含量明顯增高 （P<0.01）。中、西陽(yáng)性藥物及蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量組對(duì)IGFBP7蛋白的含量具有抑制作用。蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量與中藥潔爾陰洗液對(duì)照組作用相近（P<0.01）。

4.討論

念珠菌性陰道炎是一種由念珠菌在陰道內(nèi)過(guò)度繁殖引起的疾病。迄今為止，臨床對(duì)本病的治療重點(diǎn)還是西醫(yī)抗真菌藥物直接殺滅病原菌，如氟康唑、制霉菌素等。藥物的毒副作用和菌株的耐藥性成為一個(gè)潛在的問(wèn)題。隨著對(duì)本病認(rèn)識(shí)的深入以及醫(yī)學(xué)微生態(tài)學(xué)的研究，新的替代療法不斷出現(xiàn)：沖洗療法、乳酸桿菌、硼酸及大蒜素治療等。近年來(lái)，我國(guó)醫(yī)學(xué)不斷發(fā)展，許多學(xué)者應(yīng)用念珠菌動(dòng)物模型，對(duì)中藥制劑的安全性及有效性進(jìn)行了研究。具有非常重要的社會(huì)意義、經(jīng)濟(jì)效益和極大的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景。胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7（IGFBP7）是一種新發(fā)現(xiàn)的分泌蛋白，通過(guò)結(jié)合IGF-iv，進(jìn)而對(duì)免疫起調(diào)控作用。本次在實(shí)驗(yàn)研究上，主要進(jìn)行了體外抑真菌實(shí)驗(yàn)和構(gòu)建白念珠菌陰道炎小鼠模型以了解藥物的療效，并探討上述問(wèn)題。在以后的工作中，還可以篩選劑型穩(wěn)定、效高、價(jià)廉、副作用少、順應(yīng)性好的藥物進(jìn)行廣泛多層次研究，更好服務(wù)于患者。

參考文獻(xiàn)：

[1]梁君兒，黎小斌，何成群.香荷藥條治療白念珠菌性陰道炎的實(shí)驗(yàn)研究[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2000，16（12）：983—984.

[2]Wajapeyee.N，Serra.R.W，Zhu.X，eta.Oncogenic BRAF Induces Senescence and Apoptosis through Pathways Mediated by the Secreted Protein IGFBP7[J].Cell 2008，132（3）：363—374.

（作者單位：姜 妍 金 玲 王 妍河北聯(lián)合大學(xué)冀唐學(xué)院；高福佳 河北聯(lián)合大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院；韓淑英 河北聯(lián)合大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院）endprint