陳婧，陳璽，柯文山，王萬(wàn)賢，袁莉，王美玲，趙佩奇，陳文華

（湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，湖北 武漢430062）

0 引言

日本血吸蟲(chóng)病是廣泛流行于中國(guó)和東南亞各國(guó)的寄生蟲(chóng)病.湖北釘螺（Oncomelaniahupensis）是日本血吸蟲(chóng)的唯一中間宿主，控制釘螺的發(fā)生是控制日本血吸蟲(chóng)病流行的有效防治手段之一［1］，了解釘螺的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖情況是實(shí)現(xiàn)控制釘螺數(shù)量的基礎(chǔ)工作.資料顯示，在釘螺的飼養(yǎng)方面有用蚯蚓糞作為飼養(yǎng)飼料［2］、泥土混合飼料［3］、螺旋藻和魚(yú)腥藻飼料［4-5］，也有用含藻類干粉的營(yíng)養(yǎng)紙飼養(yǎng)［6］以及人工配方飼料［7-8］多種.本實(shí)驗(yàn)選用釘螺滋生地常見(jiàn)且易獲材料為飼料，取浮游植物（phytoplankton）作為植物類型，常見(jiàn)的鯽魚(yú)（Carassiusauratus）、河蚌（Potamiluscapax）和蚯蚓（earthworm）作為動(dòng)物類型，將3種動(dòng)物材料分別與浮游植物材料按1∶1混合組成3種混合型飼料.用3種類型的7種飼料分別飼喂釘螺，觀察不同飼料對(duì)釘螺發(fā)育及繁殖的影響.所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更接近釘螺野外生活的現(xiàn)狀，希望能有利于對(duì)疫區(qū)釘螺發(fā)生量的預(yù)測(cè)，并對(duì)釘螺防控工作起到積極的作用.

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 釘螺來(lái)源 成螺采自武漢市天興洲，卵和幼螺來(lái)自實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng).

1.1.2 飼料來(lái)源 浮游植物、河蚌和蚯蚓從釘螺生活地（武漢市天興洲）采集，鯽魚(yú)從超市購(gòu)買.采集和購(gòu)買來(lái)的材料經(jīng)室內(nèi)加工處理而成.

1.1.3 材料處理

1）植物型材料浮游植物晾干，動(dòng)物型材料河蚌去殼，鯽魚(yú)去頭、鰭和大的棘刺.

2）用九陽(yáng)豆?jié){機(jī)（型號(hào)D25D）將上述處理的飼養(yǎng)材料粉碎或勻漿.

3）以冷凍干燥機(jī)（型號(hào) 福特斯FTS-7.5）除去水分.

4）以研缽將飼料塊研成粉狀，過(guò)40目篩后置于食品袋中0℃低溫保存?zhèn)溆?混合飼料則將浮游植物干粉分別與動(dòng)物干粉按1∶1混合后置于食品袋中0℃低溫保存?zhèn)溆?

5）制備的7種飼養(yǎng)飼料，下文中A＝水生浮游植物干粉，B＝鯽魚(yú)干粉，C＝河蚌干粉，D＝蚯蚓干粉，E＝水生浮游植物＋鯽魚(yú)干粉，F(xiàn)＝水生浮游植物＋河蚌干粉，G＝水生浮游植物＋蚯蚓干粉.

1.2 方法 幼螺的發(fā)育前期在飼養(yǎng)盒中進(jìn)行，生長(zhǎng)至4～5旋后轉(zhuǎn)至泥水盤中進(jìn)行，將初孵幼螺按每組30只分為7組在飼養(yǎng)盒（12cm×12cm×9cm）中飼養(yǎng).每組投放上述7種飼料，每日投放一次，每周更換飼養(yǎng)盒中的去氯水一次.幼螺生長(zhǎng)至5旋后轉(zhuǎn)至泥水瓷盤（32cm×23cm×7.5cm）中培養(yǎng)，泥盤放置時(shí)一端高出2cm，使盤中的泥面正好一半有水一半無(wú)水.幼螺飼料裝入紗巾做成的小紗袋（2.5cm×2.5cm）內(nèi)，便于更換.成螺飼料投放在1cm2的塑料墊片上，便于清理.飼養(yǎng)盒盤均置于25℃光照培養(yǎng)箱（GXZ型智能光照培養(yǎng)箱，寧波江南儀器制造廠）中進(jìn)行.其他實(shí)驗(yàn)于實(shí)驗(yàn)室自然溫度.

將早春（4月上、中旬）從野外收集的釘螺成螺分成7組，每組10頭，室內(nèi)自然溫度條件下分別飼養(yǎng)在泥盤中，5d后將泥盤中的雌螺轉(zhuǎn)入泥皿中，分單只投放相同飼料繼續(xù)飼養(yǎng)，皿置于25℃的光照培養(yǎng)箱中，每種飼料分泥皿10個(gè)，連續(xù)10d計(jì)數(shù)單只雌螺繁殖數(shù)據(jù).

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析 釘螺每15d統(tǒng)計(jì)一次死亡率［9］.每處理隨機(jī)觀察10只雌螺，觀察記錄每只產(chǎn)卵量.每處理隨機(jī)選取10只幼螺在解剖鏡下用測(cè)微尺量體長(zhǎng).所用數(shù)據(jù)來(lái)自3次重復(fù)的平均值.方差分析采用鄧肯多重比較.

2 結(jié)果與分析

2.1 飼養(yǎng)幼螺的存活 不同飼料飼養(yǎng)下釘螺幼螺飼養(yǎng)至105d時(shí)，飼料G的存活率最高達(dá)43%，其他飼料存活率在30%～33%之間，B、C兩種飼料所飼養(yǎng)的幼螺一個(gè)月內(nèi)全部死亡（表1）.從表1可見(jiàn)，飼養(yǎng)幼螺的死亡以1～15d最高，以后隨幼螺的發(fā)育死亡率逐漸降低，90d以后的15d中無(wú)死亡.

表1 不同飼料飼養(yǎng)釘螺的死亡率與死亡時(shí)間

2.2 食物與發(fā)育 1種植物飼料（A）、3種動(dòng)物性飼料（B、C、D）和3種混合飼料（E、F、G）喂養(yǎng)釘螺幼螺，觀察幼螺生長(zhǎng)情況（圖1）.結(jié)果表明，在25℃的條件下，飼料A和G喂養(yǎng)的釘螺，其體長(zhǎng)最長(zhǎng)，分別為6.89mm和6.81mm，且顯著長(zhǎng)于飼料F、E、D喂養(yǎng)的釘螺（P＜0.05），分別為3.05、4.51、5.11mm；飼料F、E、D喂養(yǎng)的釘螺也顯著長(zhǎng)于飼料B、C所飼養(yǎng)的幼螺（P＜0.05）；飼料B、C所飼養(yǎng)的幼螺表現(xiàn)為不能發(fā)育.且A、D、E、F、G 5種飼料飼養(yǎng)的釘螺，在觀察期間內(nèi)，其體長(zhǎng)與喂養(yǎng)時(shí)間程明顯的線性關(guān)系（圖2）.飼料A和G幾乎無(wú)差別，飼料E和F差別不明顯，飼料D發(fā)育緩慢.

圖1 釘螺幼螺在不同飼料下的發(fā)育（25℃）

圖2 飼料與釘螺體長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)系

2.3 飼料與繁殖 實(shí)驗(yàn)每只或每組雌螺在10d內(nèi)的繁殖結(jié)果見(jiàn)表2.表2結(jié)果顯示：在25℃的溫度條件下，從野外采回的成螺在室內(nèi)各飼料飼養(yǎng)下均能正常產(chǎn)卵，其產(chǎn)卵量的高低、有效產(chǎn)卵天數(shù)、平均產(chǎn)卵天數(shù)均與飼料種類不同有關(guān).植物型飼料A飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵時(shí)間長(zhǎng)，產(chǎn)卵量高（13.9%）；動(dòng)物型飼料B、C、D飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵時(shí)間短產(chǎn)卵量也低；混合飼料E和F飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵時(shí)間和產(chǎn)卵量低于植物型飼料，而高于動(dòng)物型飼料飼養(yǎng)的釘螺.混合飼料G飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵量最高（14.1%）.但不同飼料都表現(xiàn)出：產(chǎn)卵量隨時(shí)間的延長(zhǎng)不斷減少，動(dòng)物型飼料飼養(yǎng)的釘螺的產(chǎn)卵時(shí)間僅3～5d（圖3）.各種食物飼養(yǎng)的釘螺所產(chǎn)的卵均能正常孵化，其孵化率在77.30%～80.91%之間，孵化期（15.53±0.40）d［1］.

表2 不同飼料對(duì)釘螺繁殖的影響（25℃）

3 小結(jié)與討論

3.1 不同飼料喂養(yǎng)釘螺幼螺實(shí)驗(yàn)表明（表1），浮游植物與蚯蚓混合飼料喂養(yǎng)的成活率最高，是較好的混合喂養(yǎng)飼料，而鯽魚(yú)和河蚌干粉則不宜于喂養(yǎng).飼養(yǎng)幼螺的死亡主要集中在孵化后的一個(gè)月內(nèi)，占總死亡率的80%以上，是飼養(yǎng)需要關(guān)注和改進(jìn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié).從不同飼料對(duì)幼螺生長(zhǎng)情況看（圖1），在25℃的條件下，浮游植物干粉及蚯蚓與浮游植物混合飼養(yǎng)的幼螺發(fā)育最快.因此，這兩種飼料是本實(shí)驗(yàn)最佳室內(nèi)喂養(yǎng)飼料，且利用水生浮游植物飼養(yǎng)釘螺具有簡(jiǎn)便易得、經(jīng)濟(jì)實(shí)用的特點(diǎn)，是一種可供選擇的良好飼養(yǎng)材料.同時(shí)也可推斷，自然界中，水生浮游植物是湖北釘螺繁殖和生長(zhǎng)發(fā)育的主要食物.

圖3 7種不同飼料對(duì)產(chǎn)卵量和產(chǎn)卵時(shí)間的影響產(chǎn)卵量為10頭♀螺所產(chǎn)，產(chǎn)卵時(shí)間為每組產(chǎn)卵天數(shù).

以蚯蚓干粉飼喂的釘螺相較于鯽魚(yú)干粉和河蚌干粉飼喂的釘螺，其存活的時(shí)間較長(zhǎng)且能發(fā)育，可能與取自釘螺適生區(qū)蚯蚓的消化道內(nèi)有取食時(shí)隨泥土進(jìn)入水生浮游植物、藻類和苔蘚等有關(guān).這可能也是有些報(bào)道可用蚯蚓糞和泥土能飼養(yǎng)釘螺的原因［2-3］.

3.2 從野外采回的成螺在室內(nèi)各飼料飼養(yǎng)下均能正常產(chǎn)卵，在25℃的溫度條件下植物型飼料飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵時(shí)間長(zhǎng)產(chǎn)卵量高（y＝-2.042x＋25.133，R2＝0.833 5）；動(dòng)物型飼料產(chǎn)卵時(shí)間短產(chǎn)卵量也低（y＝-2.099x＋10.365，R2＝0.947 6）；混合飼料產(chǎn)卵時(shí)間和產(chǎn)卵量低于植物型飼料高于動(dòng)物型飼料（y＝-2.109x＋23.331，R2＝0.961 3）.在3種不同類型飼料飼養(yǎng)的繁殖實(shí)驗(yàn)中，浮游植物和混有浮游植物的混合飼料的產(chǎn)卵量遠(yuǎn)高于單一動(dòng)物飼料，說(shuō)明植物型食物是繁殖釘螺的主要營(yíng)養(yǎng)源.以動(dòng)物型飼料飼養(yǎng)的釘螺能少量產(chǎn)卵3～5d，可能與前期野外生活時(shí)的營(yíng)養(yǎng)儲(chǔ)備殘留有關(guān).

長(zhǎng)期野外的數(shù)量調(diào)查［2］和資料顯示［3］，天興洲早春調(diào)查釘螺始現(xiàn)于3月下旬，交配產(chǎn)卵盛于4月中旬，至5月上旬產(chǎn)卵量逐漸減少.本實(shí)驗(yàn)材料取于4月19日，20日開(kāi)始用設(shè)定飼料進(jìn)行“過(guò)渡”飼養(yǎng)，25日開(kāi)始單只連續(xù)10d的產(chǎn)卵觀察，結(jié)束時(shí)間在5月上旬，室內(nèi)飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)卵數(shù)量與時(shí)間的關(guān)系與野外調(diào)查的結(jié)果基本一致.表明生活在天興洲的湖北釘螺產(chǎn)卵期在4月上中旬至5月中旬，有明顯的較為集中的時(shí)間段［3］.

3.3 湖北釘螺產(chǎn)卵量的高低與食物種類密切相關(guān).水生浮游植物干粉飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵量最高，混有水生浮游植物干粉的各動(dòng)物型干粉飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵量次之，單一動(dòng)物型干粉飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵量最低.從產(chǎn)卵量的時(shí)間效應(yīng)看，各飼料飼養(yǎng)的釘螺產(chǎn)卵量隨產(chǎn)卵時(shí)間的延長(zhǎng)產(chǎn)卵量逐漸減少，室內(nèi)飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)卵數(shù)量與時(shí)間的關(guān)系與野外調(diào)查的結(jié)果基本一致.不同食物飼養(yǎng)對(duì)湖北釘螺卵的孵化率和孵化歷期影響不明顯，各種食物飼養(yǎng)的釘螺所產(chǎn)卵孵化率均在77.30%～80.91%之間.

［1］周曉農(nóng).實(shí)用釘螺學(xué)［M］.北京：科學(xué)出版社，2004：88-90.

［2］張壘，莊黎，陳婧，等.湖北釘螺在不同溫度下的發(fā)育速率及形態(tài)變化［J］.湖北大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2008，30（2）：205-207.

［3］奚偉萍，姜玉驥.泥土混合飼料飼養(yǎng)釘螺的實(shí)驗(yàn)觀察［J］.中國(guó)血吸蟲(chóng)病防治雜志，1997，9（1）：46-47.

［4］魏風(fēng)華，陳浩峰，羅秀蘭.螺旋藻和魚(yú)腥藻飼養(yǎng)釘螺的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)血吸蟲(chóng)病防治雜志，1999，11（5）：286-287.

［5］魏風(fēng)華，陳浩峰，羅秀蘭.用螺旋藻、魚(yú)腥藻飼養(yǎng)釘螺的效果觀察［J］.湖北預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，1997，8（3）：35-36.

［6］錢翠英.營(yíng)養(yǎng)紙喂飼釘螺的觀察［J］.寄生蟲(chóng)病與感染性疾病，2003，2（1）：61.

［7］黃柏青，金露萍，李巧.不同條件飼養(yǎng)釘螺和釋放尾蚴的對(duì)比觀察［J］.中國(guó)民康醫(yī)學(xué)，2007，19（7）：523-524.

［8］倪紅，馬安寧，王萬(wàn)賢.3種食物引誘劑誘螺效果及在滅螺劑中的作用［J］.湖北大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2009，31（4）：422-425.