張抗懷，王 娜，蔡 艷，劉 娜，李 亞，仵文英(西安交通大學醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院藥劑科，西安 710004)

現(xiàn)代研究證明，藥物代謝酶、轉運蛋白、受體和藥物作用靶點的基因多態(tài)性是引起藥物效應和毒性個體差異的重要原因[1]。用藥之前，如果能夠明確患者的藥物相關基因類型，就可以制定更加科學的給藥方案，實現(xiàn)由“對癥下藥”到“對人下藥”的轉變，從而提高療效和減少不良反應。藥物相關基因檢測在心血管系統(tǒng)藥物、神經系統(tǒng)藥物、抗腫瘤藥物、抗菌藥物等方面的應用潛力巨大。

2012年，國家衛(wèi)計委“臨床藥學重點?？平ㄔO項目”要求開展藥物相關基因檢測工作。我科自2013年1月開展了藥物相關基因檢測工作，現(xiàn)將相關工作及體會匯報如下。

1 準備工作

1.1實驗室建設 開展藥物相關基因檢測需要較大的設備投入和較為嚴格的實驗條件。按照衛(wèi)生部的有關要求[2]，我科于2012年6月與長沙三濟生物科技有限公司合作建成了標準化的“臨床個體化用藥基因檢測室”，購置了PCR儀和測序儀等檢測設備，三濟生物科技有限公司負責專業(yè)知識培訓和提供技術支持。

1.2檢測方法 主要采用焦磷酸測序技術進行用藥相關基因的檢測。焦磷酸測序技術[3]是一種新的依靠生物發(fā)光進行DNA序列分析的技術。該技術不需要熒光標記的引物或核酸探針，也無需進行電泳，具有分析結果快速、準確、靈敏度高和自動化的特點。在遺傳多態(tài)性分析、重要微生物的鑒定與分型研究、克隆檢測和等位基因頻率分析等方面具有廣泛的應用。

1.3其他準備工作 組織臨床藥師在腫瘤科、感染科、兒科等科室進行檢測項目和監(jiān)測意義的介紹，向醫(yī)生發(fā)放相關資料；通過“醫(yī)院藥學簡訊”介紹藥物相關基因檢測研究進展；在全院開展專題講座。

對臨床藥學人員進行藥物基因檢測技術和知識培訓；選派人員參加省級“臨床基因擴增檢驗技術培訓班”，并取得資格證書。

制訂了實驗室各種標準操作規(guī)程及工作制度。設計了檢測申請單和報告單的模板。

2 檢測情況

已開展30種藥物相關基因的監(jiān)測，覆蓋腫瘤科、普外科、兒科等10余科室。檢測例次逐月增多，累計檢測120余人次。涉及5大類藥物，包括：①抗腫瘤藥物厄洛替尼、吉非替尼、伊馬替尼、卡鉑、順鉑、奧沙利鉑、5-氟尿嘧啶、阿那曲唑、多西他賽、吉西他濱、伊立替康、卡培他濱、貝伐單抗等；②心腦血管系統(tǒng)藥物華法林、氯吡格雷等；③神經系統(tǒng)藥物卡馬西平、丙戊酸鈉等；④抗病毒藥物拉米夫定、替比夫定、阿德福韋酯、恩替卡韋等；⑤乙醇。2013年1月～10月藥物相關基因檢測位點數分別為20，14，28，30，111，169，107，89，151和25個，合計716個。見表1和表2。

3 臨床應用

3.1EGFR基因檢測 表皮生長因子受體(EGFR)是一種具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白受體。EGFR外顯子18-21是受體酪氨酸激酶ATP結合位點的編碼區(qū)，其中外顯子18的G719S突變、外顯子19的缺失突變、外顯子20的S768I突變和外顯子21的L858R突變及L861Q突變與患者對酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI)的敏感性有關[4]。我科檢測了17例肺癌患者的EGFR基因類型，其中5例發(fā)生了具有臨床意義的突變，提示使用酪氨酸激酶抑制劑如吉非替尼、厄洛替尼的療效較好，可考慮使用，其余12例患者則不推薦使用。

表1 各科藥物相關基因檢測情況

表2 各種藥物相關基因類型檢測情況

3.2UGT1A1基因檢測 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉移酶(UGT)是藥物在生物體內進行第Ⅱ相生物轉化時最重要的一種酶，分布廣泛。UGT家族中1A1基因型(UGT1A1)與伊立替康的毒性關系極為密切[4]。我科檢測了10例腫瘤患者的UGT1A1基因類型，其中3例為突變基因攜帶者，提示使用伊立替康時發(fā)生毒副作用的風險較高，建議適當減少劑量或調整治療方案。

3.3CYP2C19基因檢測 細胞色素P4502C19(CYP2C19)是人體中重要的藥物代謝酶，參與多種藥物的代謝，如抗血小板聚集藥物氯吡格雷等。根據酶活性大小，可分為快代謝型和慢代謝型。中國人中弱代謝者表型幾乎均為CYP2C19*2和CYP2C19*3[5]。我科檢測了10例心血管疾病患者(主要為冠心病、腦梗死患者)的CYP2C19基因類型，其中5例為CYP2C19*2基因型，2例為CYP2C19*3基因型，提示這7例患者在使用氯吡格雷等藥物時，療效可能會有所下降，建議適當提高劑量或調整治療方案。

4 體會和展望

我科開展藥物相關基因檢測工作以來，得到了醫(yī)院領導和臨床科室的支持和配合，各項檢測工作進展較為順利，開辟了臨床個體化用藥的新途徑，檢測工作促進了臨床安全、有效用藥，提升了醫(yī)院藥物治療水平和形象。實驗室的建立和運行使得藥師與臨床的聯(lián)系進一步加強，推動了臨床藥學學科的發(fā)展。根據陜西省醫(yī)療服務項目價格(2011年版)“化學藥物用藥指導基因檢測”項目標準進行收費，取得了良好的社會效益和經濟效益。

目前，此工作還存在一些需要完善的地方。首先，部分臨床醫(yī)師對基因檢測的認知度還不高，有些醫(yī)師甚至不知道醫(yī)院有這項檢測，還需要加大宣傳推廣力度；其次，檢測報告書僅僅提出了用藥建議，醫(yī)生是否接受建議和調整用藥方案、如何調整、臨床實際效果如何等情況還不清楚，未來需要加強患者跟蹤隨訪。此外，質量控制極為重要，未來要根據國家有關要求，及時加入國家實驗室室間質控計劃，確保監(jiān)測結果的可靠性。

參考文獻：

[1] 周宏灝. 基因多態(tài)性與臨床合理用藥[J]. 中華醫(yī)學雜志，2000，80(9): 658-661.

[2] 中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會. 醫(yī)療機構臨床基因擴增管理辦法[S]. 衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號.

[3] 倪紅兵，鞠少卿，王惠民. 焦磷酸測序技術及其應用進展[J]. 國外醫(yī)學臨床生物化學與檢驗學分冊，2005，26(9): 600-602.

[4] 周宏灝，劉潔. 抗腫瘤藥物的基因導向性個體化治療[J]. 腫瘤藥學，2011，1(1): 6-10.

[5] 嚴非，夏春華，熊玉卿. CYP2C19基因多態(tài)性對藥物代謝的影響及其個體化用藥[J]. 中國臨床藥理學與治療學，2010，15(8): 949-951.