朱鳳居

（重慶市長壽區(qū)渡舟街道畜牧獸醫(yī)站，重慶 長壽 401228）

1 雞球蟲病的危害

雞球蟲病因雞吞噬帶有感染性球蟲卵囊的土壤、飼料或飲水后而感染，其主要癥狀為：破壞雞腸上皮細胞引起腸道出血，降低雞采食量，消瘦、便血，甚至死亡。雞球蟲對雛雞的危害特別嚴重，特別是5～20日齡的雛雞發(fā)病率高，死亡率高達80%。即使病愈，雛雞的生長發(fā)育也會受到阻礙，感染后的成年雞，其產蛋和增重都會受到影響。雞球蟲病造成的養(yǎng)雞業(yè)經濟損失巨大。2007年，Lillehoj估計全世界因該病造成的經濟損失達70億美元。2008年，Mc－Dougald等報道，全世界僅藥物預防球蟲病費用一項就已超過30億美元。在我國，幾乎所有雛雞飼料中都添加有抗球蟲藥，僅每年用于防治雞球蟲病的藥費就高達20～30億元人民幣。

2 球蟲耐藥性的產生機理

2.1 離子載體類抗球蟲藥的耐藥機理 離子載體類抗生素能非特異性地結合球蟲體內陽離子，自身作為轉運載體將所結合的離子轉運出去，破壞細胞膜內外的電化學梯度，使大量電解質進入球蟲體內，最終導致蟲體脹裂。有報道認為，球蟲對這類藥物耐藥性的產生可能是由于球蟲細胞膜通透性發(fā)生了變化所致，當球蟲細胞膜通透性降低時，耐藥性就會產生。

2.2 作用于線粒體的抗球蟲藥的耐藥機理 線粒體氧化磷酸化是釋放代謝能的主要環(huán)節(jié)。呼吸鏈和ATP合成酶復合體是氧化磷酸化的結構基礎。Fry等（1984）研究表明，抗球蟲藥物喹啉酮通過阻斷蟲體線粒體內膜的電子傳遞，從而抑制ATP生成。

2.3 作用于內膜系統(tǒng)的抗球蟲藥的耐藥機理 三嗪酮是一種新型廣譜抗球蟲藥，通過抑制蛋白質合成來影響低氧濃度時的電子運輸，抵御球蟲對宿主細胞的侵襲。研究表明，三嗪酮在不影響宿主細胞的濃度下可使球蟲各發(fā)育階段的內質網(wǎng)、線粒體等膜質結構腫脹而發(fā)生嚴重的空泡變性，且其活性周期較長。Chapman（1984）認為，這類藥物耐藥性的產生是球蟲群體在抗球蟲藥物壓力作用下發(fā)生突變引起的。

3 雞球蟲耐藥性的主要特點

3.1 球蟲能耐受藥物的極高濃度 就某種藥物而言，球蟲一旦產生耐藥性，便可耐受使用濃度的4～8倍甚至更高濃度，而實際生產上，這足以對雞群本身造成毒害作用。這意味著養(yǎng)雞生產者一味地增加抗球蟲藥物的使用濃度，是毫無意義的。Augustine等（1987）報道，進行細胞培養(yǎng)時，對莫能菌素敏感的蟲株攝取的藥量顯著高于已經產生耐藥性的蟲株，因此體外抑制耐藥蟲株所需莫能菌素的劑量比敏感蟲株要高出30倍左右。

3.2 球蟲具有交叉耐藥性 當球蟲對某種抗球蟲藥物產生耐藥性后，對于從來未接觸過的結構近似或作用性質相同的抗球蟲藥物也可產生耐藥性，稱之為交叉耐藥，根據(jù)程度的不同，又有完全交叉耐藥和部分交叉耐藥之分。對于化學合成的抗球蟲藥，由于有特殊的作用機制，因而不易產生交叉耐藥性。馬立農等（2003）已經證實，具有不同作用性質的化學藥物百球清和地克珠利之間沒有交叉耐藥性。Bedrinik等（1989）報道,對某一種單價離子載體抗球蟲藥物產生耐藥性的蟲株，對同類的其他抗球蟲藥物也具有一定程度的耐藥性。

3.3 球蟲具有多重耐藥性 多重耐藥性是指球蟲對一種抗球蟲藥物產生耐藥性的同時，對其他結構不同、作用靶點不同的抗球蟲藥物也具有耐藥性。耐受不同藥物的蟲株間還可通過遺傳重組，同時或先后對化學性質和作用機理不同的藥物產生耐藥性。Williams（1998）對堆型艾美耳球蟲的耐藥蟲株進行了表型分析，認為克球粉和喹啉類藥物之間確實不存在耐藥基因的轉移，其雙重耐藥性的產生可能是由于球蟲群體中存在對兩種藥物有耐藥性的突變體。

3.4 對藥物耐受性有差異 同一蟲株對不同種抗球蟲藥物的耐藥性程度不同，同一種抗球蟲藥物對不同球蟲的藥效也具有顯著差異。顧有方等（2004）對E.tenella鳳陽株、宣城株、揚州株、蒙城株和南京株的藥效試驗發(fā)現(xiàn)，宣城株和南京株對馬杜霉素、氯羥吡啶、氯苯胍和地克珠利均有不同程度的耐藥。

3.5 具有遺傳性和相對穩(wěn)定性 耐藥性的產生是球蟲群體中突變個體多次重復選擇的結果，球蟲在其生活周期的后期進行有性生殖，形成卵囊，耐藥性也世代相傳，因此認為，耐藥性是通過耐藥基因而遺傳的。有實驗先只使裂殖子獲得耐藥性，然后發(fā)現(xiàn)裂殖子會將這種耐藥性傳遞給世代交替的卵囊，最后將獲得耐藥性的蟲株分離后保存在實驗室，發(fā)現(xiàn)這種耐藥性可長期保持。

4 改變球蟲耐藥性的應對措施

4.1 無藥物壓力下提高球蟲對藥物的敏感性 實踐證明，通過不斷的改變藥物，造成某些藥物停用，形成無藥物壓力，會使一些耐藥株的藥物敏感性有所提高。上世紀90年代以前，北京、?？?、上海地區(qū)在養(yǎng)雞生產中廣泛使用氯苯胍作為主要的抗球蟲藥物，隨著莫能菌素投入使用，基本停止使用氯苯胍，然而在1994年，寧長申等人發(fā)現(xiàn)這三個地區(qū)的抗藥E.tenella蟲株重新對氯苯胍產生了敏感性。另一方面，對某一特定種群而言，敏感蟲群的進入也可使耐藥蟲群所占的比例減少，從而呈現(xiàn)出整體敏感性提高。

4.2 改變用藥方式提高藥物對球蟲的敏感性 根據(jù)藥物的作用峰期合理用藥，這包括預防和治療兩個方面。在選擇預防用藥方案時，應根據(jù)藥物的作用峰期合理配藥，如采用輪換用藥、聯(lián)合用藥和穿梭用藥等方案，可使蟲株恢復對藥物的敏感性。在采用輪換用藥和穿梭用藥方案時，必須根據(jù)藥物的作用方式和特點確定這些藥物的使用順序，應避免使用作用方式相同的2種藥物。Long（1985）曾分別做過兩藥穿梭和三藥穿梭，發(fā)現(xiàn)穿梭用藥有延緩球蟲耐藥性產生的作用。謝明權等（1998）聯(lián)合使用幾種單用時抗球蟲效果很差的化學合成藥，結果取得了良好的抗球蟲效果。聶奎等（2006）研究發(fā)現(xiàn)，使用地克珠利5mg/kg+氨丙啉240 mg/kg+左旋咪唑1.5 mg/kg的雛雞存活率為100%，相對增重率為97.5%，抗球蟲指數(shù)（ACI）值為181.9，抗球蟲效果明顯。

4.3 使用中獸藥 臨床上常用的防治雞球蟲病的中草藥有五大類：驅蟲類藥，如常山、仙鶴草、苦楝皮、百部、冰片等；清熱燥濕類藥，如黃芩、黃連、黃柏、白頭翁、秦皮、苦參、龍膽草、茵陳等；清熱解毒類藥，如青蒿、馬齒莧、柴胡、蒲公英、穿心蓮、金銀花、大青葉等；補氣益血類藥，如黨參、黃芪、當歸、熟地、白術、白芍、甘草、大棗等；活血止血類藥，如丹參、桃仁、地榆炭、仙鶴草、旱蓮草、白及等。聶奎等人分別對具有補益作用、涼血作用、清熱燥濕作用和固澀作用的中藥進行多次抗雛雞球蟲感染試驗，發(fā)現(xiàn)這些中藥對雛雞的保護率均可達90%，抗球蟲指數(shù)（ACI）達到160～180。劉詩柱等（2011）自擬中藥方劑（常山、仙鶴草、青蒿、柴胡、穿心蓮、白芍、金銀花、地榆炭、白茅根、甘草）治療雞球蟲病，結果雞相對增重率在84.6%～94.5%，ACI值達171.2、164.7。中藥抗球蟲劑有許多優(yōu)點，不論是單味還是復方，都具有多功能的組合效應?，F(xiàn)在許多大型集約化養(yǎng)殖場已越來越重視使用天然中草藥來防病治病，這樣不僅可以降低和消除長期使用化學藥物造成的藥物殘留，避免蟲體產生抗藥性，而且能提高肉蛋產品的質量，更好地滿足人們對綠色食品與日俱增的需求。

4.4 使用營養(yǎng)添加劑 國內外許多學者正嘗試著從飼料添加劑入手來防治球蟲病，以解決雞球蟲耐藥性的問題。Kettunen（2001）認為，甜菜堿能保護腸絨毛抵抗球蟲的感染或損害；Giannenas（2003）報道了牛至油有較好的抗柔嫩艾美耳球蟲的作用。Dalloul等（2003）報道乳桿菌能減少球蟲卵囊的產生量，降低盲腸病變平均記分，減少發(fā)病率、死亡率，且ACI值達到173。另外，日糧中添加魚油、亞麻籽、椰子油、寡糖、甜菜堿可有效抑制球蟲的發(fā)育，降低感染雞的病變損傷，減少死亡率。

4.5 研制抗球蟲新藥 不斷探索和篩選高效、低毒、廣譜、低殘留的抗球蟲藥，是現(xiàn)代學者們研究和開發(fā)新藥的目標。Allcocco等（2001）研究了雙間硝基苯二硫的作用機制，指出可研制新藥作用于球蟲的甘露醇循環(huán)來控制球蟲病。另外，球蟲的生物學特征以及蟲體內酶功能的研究也為防治球蟲病找到了新方法。Williams（1999）認為，艾美耳屬球蟲的三種酶可能成為化學治療的靶點，尤其是羥丁酸脫氫酶的發(fā)現(xiàn)證實了脂肪酸具有抗球蟲活性。

總之，從球蟲耐藥性產生機理、形成途徑以及抗球蟲藥物作用原理等入手研究，將是控制雞球蟲病、保護或恢復抗球蟲藥物效力的根本策略。

[1]聶奎.動物寄生蟲病診斷與防治[M].2版.重慶:重慶大學出版社，2013:201-204.

[2]Lillehoj H S， Kim C H， Keeler C L Jr， et al.Immunogenomic approaches to study host immunity to enteric pathogens[J].Poult.Sci.，2007，86（7）:1491-1500.

[3]Chapman H.D.Resistance to anticoccidial drugs in fowl［J］.Parasitology Today，1993，9（5）:159-162.

[4]Martínez-Larra?aga M R， Anadón A.Veterinary drugs Residues:Coccidiostats［J］.Encyclopedia of Food Safety，2014，3（1）:63-75.

[5]黃兵，趙其平，吳薛忠，等.上海地區(qū)雞球蟲對6種抗球蟲藥的抗藥程度研究［J］.中國獸醫(yī)寄生蟲病，2001，9（2）:1-7.

[6]馬立農，陳杖榴.柔嫩艾美爾球蟲對地克珠利和百球清的交叉耐藥性檢驗[J].中國獸醫(yī)雜志，2003，39（11）:6-9.

[7]顧有方，郭廣富，陳會良，等.5株柔嫩艾美爾球蟲對4種抗球蟲藥的抗藥性[J].畜牧獸醫(yī)學報，2004，35（6）:727-730.

[8]寧長申，孔繁瑤，殷佩云，等.四株柔嫩艾美爾球蟲對4種抗球蟲藥的抗藥性研究[J].河南畜牧獸醫(yī)，1994，15（2）:14-17.

[9]聶奎，顏焰，高俊偉，等.地克珠利、氨丙啉與左旋咪唑聯(lián)合使用對Eimeria tenella的效力試驗[J].中國獸醫(yī)寄生蟲病，2006，14（1）:1-4.

[10]周作勇，聶奎.中藥復方防治雞球蟲病的研究現(xiàn)狀與展望[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2006，25（4）:60-63.

[11]劉詩柱，方磊涵，韓慶斌.自擬純中藥復方制劑球克星對雞球蟲病的治療效果[J].河南農業(yè)科學，2011，40（12）:149-152.

……