茍小麗，邢時云，楊衛(wèi)兵

(遵義醫(yī)學(xué)院附院腫瘤醫(yī)院 胸部腫瘤科，貴州 遵義 563099)

肺癌已成為威脅人類健康的疾病之一[1]。我國肺癌患者以每年25%的速度增長[2]，其死亡率目前已位居癌癥死因的首位。其中非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)占75%～80%。由于多數(shù)患者就診時為晚期，失去手術(shù)機(jī)會，5年生存率不足20%。因此，探索參與肺癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)特點(diǎn)，對于肺癌高危人群的篩查、早期診斷、治療前的評估、療效監(jiān)測進(jìn)而提高療效、改善預(yù)后顯得尤為重要。尤其是在肺癌病理組織取材體積小，難以檢測時，尋找方便、快捷、經(jīng)濟(jì)的外周血腫瘤標(biāo)志物，并盡可能提高其敏感性與特異性更具有臨床價值。本實(shí)驗(yàn)旨在通過對非小細(xì)胞肺癌相關(guān)腫瘤標(biāo)記物CEA、CA-125、VEGF、MT及MMP-9聯(lián)合檢測，探索其在晚期NSCLC中的表達(dá)規(guī)律及臨床價值。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)分組 實(shí)驗(yàn)組：收集2011年1月至12月在我院初診的晚期NSCLC(Ⅲ-Ⅳ期)患者40例，均經(jīng)病理確診，男 31例，女9例，中位年齡為55歲；鱗癌25例，腺癌15例；臨床分期III期病人16例，IV期病人24例。 對照組：健康獻(xiàn)血者36例，男19例，女17例，中位年齡為40.75歲。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 抽取實(shí)驗(yàn)組及對照組空腹靜脈血0.5mL，采用寶生物工程(大連)有限公司試劑用RT-PCR法測定外周血中CEA、CA125、VEGF、MMP9及MTmRNA表的表達(dá)。

2 結(jié)果

2.1 肺癌組五項(xiàng)標(biāo)志物外周血mRNA表達(dá)均高于對照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表1)。

組別例數(shù)CEACA125MMP9MTVEGF肺癌組4012.30±3.44 1.86±1.4013.47±4.62 11.76±3.42 4.29±0.96對照組368.28±2.300.68±0.449.54±3.249.07±2.962.32±0.87T3.9312.2443.2173.1554.447PP<0.01P<0.05P<0.01P<0.01P<0.01

2.2 肺癌組五項(xiàng)標(biāo)志物外周血mRNA表達(dá)與NSCLC患者病理類型及臨床分期均無相關(guān)性，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見表2)。

臨床因素例數(shù)CEA(mRNA)CA125(mRNA)MMP9(mRNA)MT(mRNA)VEGF(mRNA)病理類型腺癌1511.96±3.211.02±0.3914.91±3.7512.13±4.173.98±0.78鱗癌2513.75±4.011.75±0.5112.58±3.2610.91±3.715.43±1.25T- 0.875 - 0.396-1.7821.432 - 0.769PP>0.05P>0.05P>0.05P>0.05P>0.05臨床分期III期1613.58±3.541.79±0.5214.37±2.0710.37±3.233.78±0.67IV期2411.26±3.191.01±0.2313.68±3.5112.53±3.215.36±0.91T 1.213 0.6920.475- 1.376 - 1.979PP>0.05P>0.05P>0.05P>0.05P>0.05

2.3 聯(lián)合檢測五種標(biāo)記物其靈敏度上升至90%，特異性上升至97.2%(見表3)。

表3五項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物敏感性和特異性比較[n /n(%)]

項(xiàng)目CEACA125VEGFMTMMP-9聯(lián)合檢測敏感性23/40(57.5)**22/40(55.0)**27/40(67.5)*16/40(40.0)**26/40(65.0)**36/40(90.0)特異性24/36(66)*30/36(83)*28/36(77.7)*27/36(75)*25/36(69.4)*22/36(61.1)

注：與聯(lián)合檢測比較：*P<0.05,**P<0.01。

3 討論

腫瘤標(biāo)記物(tumor markers)是從臨床應(yīng)用角度,在組織、血漿或其他體液中能夠測到的有關(guān)生化物質(zhì),其在腫瘤患者體內(nèi)異常升高。反映了腫瘤惡性轉(zhuǎn)化各個階段的細(xì)胞表型以及基因的內(nèi)在特性，與腫瘤生長、發(fā)展、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。一種腫瘤細(xì)胞可產(chǎn)生多種腫瘤標(biāo)志物，且表達(dá)的腫瘤抗原呈多樣性，單一指標(biāo)檢測的靈敏度及特異性均難滿足臨床對肺癌的篩查、診斷、鑒別診斷、療效及預(yù)后評估的要求，有學(xué)者倡導(dǎo)用聯(lián)合測定多項(xiàng)標(biāo)志物以提高靈敏度[3]。較多文獻(xiàn)報(bào)道聯(lián)合檢測化療前NSCLC血清標(biāo)志物有助于診斷、病情評估、預(yù)測轉(zhuǎn)移、評價療效及預(yù)后[4]。目前，沒有任何一種標(biāo)志物對肺癌具有較高的敏感性及特異性[5]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示以下幾點(diǎn)：

3.1 非小細(xì)胞肺癌外周血清腫瘤標(biāo)志物檢測可作為健康人群或肺癌高危人群的篩查。與正常健康人對照組比較，NSCLC患者血清中CEA、CA-125、VEGF、MT 及MMP-9的基因表達(dá)明顯升高，差異具有顯著性。這可能與腫瘤組織生長發(fā)展中的代謝產(chǎn)物刺激組織細(xì)胞，使這些抗原物質(zhì)大量釋放入血液有關(guān)。因此，對于健康人群防癌檢查，尤其是具有長期大量吸煙、長期暴露于各種理化致癌因子以及具有家族腫瘤史的高危人群的篩查，具有簡單方便易行的優(yōu)勢。同時對肺癌的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療具有較大的臨床價值。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與郝崇華、Carmeliet P 、許浪等[6-8]研究報(bào)道結(jié)果一致。

3.2 聯(lián)合檢測非小細(xì)胞血清CEA、CA-125、VEGF、MT 及MMP-9五項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物，可以提高其敏感性。研究顯示，CEA是最早用于肺癌的廣譜腫瘤標(biāo)志。血循環(huán)中CEA陽性細(xì)胞可同質(zhì)粘附，致瘤細(xì)胞在循環(huán)中聚集，形成瘤栓，延長瘤細(xì)胞在血管床滯留時間，增加瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移機(jī)會 。文獻(xiàn)報(bào)道30%～65% NSCLC患者CEA增高[9]，在結(jié)腸癌患者血清增高達(dá)70%。 CA-125公認(rèn)為是卵巢癌標(biāo)志物,目前研究發(fā)現(xiàn)可由肺腺癌產(chǎn)生，陽性率僅有32%～55.9%[10]。VEGF作為一個重要的血管生成調(diào)節(jié)因子,具有很強(qiáng)的促血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖和增加血管通透性作用,在肺癌生長和轉(zhuǎn)移過程中起著極為重要的作用[11-14]。金屬硫蛋白存在于許多正常細(xì)胞中,它的發(fā)展?fàn)顩r與其他的癌胚基因產(chǎn)物十分相似,近年研究證實(shí)其在甲狀腺腫瘤、鼻咽癌、宮頸癌、乳腺癌中呈高水平表達(dá)[15-17]，并與腫瘤的分化程度、體積大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等因素存在密切關(guān)系。MMP9屬于明膠酶類，能特異性降解基底膜中的IV型膠原，破壞基底膜的完整性，有利于腫瘤細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)移。在直腸癌、食管癌、胃癌、肝癌等多種腫瘤組織中過表達(dá)。由此可見，CEA、CA-125、VEGF、MT 及MMP-9均從不同環(huán)節(jié)共同參與腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移，同時又在多種腫瘤中表達(dá)，其特異性及敏感性受到限制。本實(shí)驗(yàn)通過聯(lián)合檢測五種腫瘤標(biāo)志物，其敏感性由單項(xiàng)檢測的50%～67%上升到90%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由于血清標(biāo)本獲取方便，故在已確診肺癌的治療前，聯(lián)合檢測外周血清中的多項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物，有利于對NSCLC生物學(xué)行為的初步評估，以便選擇合理的個體化治療方案，避免過度治療或治療不足。

3.3 本次試驗(yàn)結(jié)果與病理類型及分期無明顯相關(guān)性。不同病理類型的NSCLC因生長部位和生長方式的不同，其生物學(xué)行為也有所差異，結(jié)果導(dǎo)致侵襲、轉(zhuǎn)移程度、治療方案及預(yù)后都各不相同。文獻(xiàn)報(bào)道CEA、CA125在腺癌中表達(dá)較高，而本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示CEA、CA125及VEGF在鱗癌中表達(dá)較高，MT及MMP9在腺癌中表達(dá)較高，其差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此外，研究顯示CEA、CA-125、VEGF、MT 及MMP-9的表達(dá)與腫瘤的TNM分期或淋巴結(jié)惡性轉(zhuǎn)移程度成正相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道不相一致，其原因可能與腫瘤的異質(zhì)性；個體差異大；病例數(shù)少以及標(biāo)本取材量少等有關(guān)。下一步將擴(kuò)大病例數(shù)，并對治療后的腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測，探討聯(lián)合檢測CEA、CA-125、VEGF、MT 及MMP-9與療效的相關(guān)性，以進(jìn)一步證實(shí)其臨床價值。

總之，聯(lián)合檢測肺癌的血清標(biāo)志物既可以作為肺癌高危人群的防癌篩查，也可以作為提高對治療前肺癌患者病情的準(zhǔn)確評估方法，從而為NSCLC的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷及合理制定治療方案提供有價值的輔助指標(biāo)。

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