蔣艷霞，焦志斌，崔素梅，張慧蘭

（山西康寶生物制品股份有限公司，山西 長(zhǎng)治046011）

早在1978年，四川省工業(yè)衛(wèi)生研究所就報(bào)道了中藥川芎素的有效成分是阿魏酸鈉（sodium ferulate，SF）。研究表明，阿魏酸鈉為非肽類內(nèi)皮素受體拮抗劑，作用機(jī)理復(fù)雜，具有多個(gè)靶向細(xì)胞組織，在改善血液流變學(xué)特征、降低血脂、增強(qiáng)免疫機(jī)能、治療心血管疾病等方面均有功效，并具有一定的鎮(zhèn)痛、解痙作用［1－2］。近年來(lái)，分子機(jī)理的研究表明細(xì)胞內(nèi)可以與阿魏酸鈉作用的蛋白酶很多［3－4］，其應(yīng)用潛力很大。因此阿魏酸鈉的含量測(cè)定研究十分重要。

作者采用高效液相色譜法測(cè)定阿魏酸鈉氯化鈉注射液中阿魏酸鈉的含量，擬為阿魏酸鈉的藥理研究和臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 實(shí)驗(yàn)

1．1 試劑與儀器

阿魏酸鈉（批號(hào)130118），純度99．7%，麗珠集團(tuán)利民制藥廠；氯化鈉（批號(hào)01130501），天津海光藥業(yè)有限公司；枸櫞酸鈉（批號(hào)20121205），臺(tái)山新寧制藥有限公司；枸櫞酸（批號(hào)20120301），湖南爾康制藥股份有限公司；焦亞硫酸鈉（批號(hào)121018），國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；甲醇（批號(hào)12105027），色譜純，美國(guó)慧杰公司；醋酸（批號(hào)121108），分析純，天津北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開發(fā)有限公司；色譜用水為自制注射用水。

AE240型電子分析天平，梅特勒－托利多儀器（上海）有限公司；1260型高效液相色譜儀，美國(guó)安捷倫公司。

1．2 對(duì)照品與供試品

阿魏酸鈉對(duì)照品（批號(hào)773－9405），中國(guó)藥品生物制品檢定所。

3批阿魏酸鈉氯化鈉注射液供試品（批號(hào)分別為：130701，130702，130703），依據(jù)確定的處方及工藝，按中試規(guī)模連續(xù)生產(chǎn)，包裝為玻璃瓶，規(guī)格為100mL，含阿魏酸鈉0．1g、氯化鈉0．83g，山西康寶生物制品股份有限公司。

1．3 色譜條件

C18色譜柱（150mm×4．6mm，5μm），填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相為水－甲醇－冰醋酸（69∶30∶1．5，體積比），波長(zhǎng)為310nm，理論塔板數(shù)按阿魏酸鈉峰計(jì)算應(yīng)不低于2 000。

1．4 方法

精密量取2mL阿魏酸鈉（批號(hào)130118），置于10 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。另精密稱取阿魏酸鈉對(duì)照品適量，加水制成濃度為20 μg·mL－1的對(duì)照品溶液。取上述兩種溶液各20μL，分別注入色譜儀，按外標(biāo)法計(jì)算阿魏酸鈉的含量。

1．5 分析測(cè)試

參照阿魏酸鈉氯化鈉注射液國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定方法［5］，采用高效液相色譜法測(cè)定阿魏酸鈉氯化鈉注射液中阿魏酸鈉的含量。

在2018年4月的時(shí)候，我國(guó)落實(shí)了有關(guān)金融機(jī)構(gòu)管理業(yè)務(wù)的指導(dǎo)意見(jiàn)的條例，條例中要求商業(yè)銀行必須有效地提升對(duì)資產(chǎn)的管理能力，所以商業(yè)銀行相關(guān)的投資和風(fēng)險(xiǎn)管理能力如果能夠在市場(chǎng)中充分體現(xiàn)出來(lái)，就能大幅度提高商業(yè)銀行的綜合實(shí)力，零售網(wǎng)點(diǎn)的轉(zhuǎn)型的成果也能更加顯著。要想做好管理工作，就需要工作人員具有較高的專業(yè)技能水平和扎實(shí)的知識(shí)基礎(chǔ)，企業(yè)要吸收更多金融市場(chǎng)上的人才，還可以成立專業(yè)的工作團(tuán)隊(duì)，建設(shè)出一支高素養(yǎng)和高職業(yè)技能的工作隊(duì)伍。此外，還可以設(shè)立專門的資管公司，可以更好地進(jìn)行管理，提高管理的效率。

2 結(jié)果與討論

2．1 色譜條件的選擇

2．1．1 流動(dòng)相的選擇

參照阿魏酸鈉原料藥標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)的高效液相色譜方法［6］，以水－甲醇－冰醋酸（69∶30∶1．5，體積比）為基礎(chǔ)對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行篩選，考察流動(dòng)相配比對(duì)色譜分離的影響，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 流動(dòng)相配比對(duì)分離效率的影響Tab．1 Effect of proportiono of mobile phase on separation efficiency

由表1可看出，隨有機(jī)相比例的增大，阿魏酸鈉保留時(shí)間提前。

另外還考察了磷酸鹽緩沖溶液的分離情況，采用甲醇∶pH3．5磷酸鹽緩沖溶液（30∶70，體積比）時(shí)，阿魏酸鈉的保留時(shí)間為22min，主要雜質(zhì)保留時(shí)間為20min。綜合考慮相鄰的降解物峰與阿魏酸鈉峰的分離情況，確定流動(dòng)相為水－甲醇－冰醋酸（69∶30∶1．5，體積比），流速為1mL·min－1。

2．1．2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

紫外光譜掃描得知，以水為溶劑的阿魏酸鈉在波長(zhǎng)分別為213nm、287nm、310nm時(shí)的吸收系數(shù)十分接近，其中310nm波長(zhǎng)下進(jìn)行含量測(cè)定時(shí)的干擾較少。因此，選擇310nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2．2 方法學(xué)考察

2．2．1 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

精密量取阿魏酸鈉對(duì)照品適量，加水分別制成16 μg·mL－1、20μg·mL－1、24μg·mL－1的對(duì)照品溶液，各濃度連續(xù)進(jìn)樣5次進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算平均峰面積及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab．2 Results of repeatability experiment

2．2．2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

精密量取上述對(duì)照品溶液，避光放置，分別于0h、2h、4h、8h、24h取樣測(cè)定，計(jì)算平均峰面積及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab．3 Results of stability experiment

由表3可看出，3個(gè)濃度的對(duì)照品溶液在5個(gè)時(shí)間點(diǎn)（24h內(nèi)）測(cè)定的RSD在0．08%～0．10%之間。表明該方法的穩(wěn)定性良好。

2．2．3 回收率實(shí)驗(yàn)

取上述阿魏酸鈉對(duì)照品溶液，按處方比例加入氯化鈉和輔料，用水稀釋至刻度，進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表4。

由表4可看出，阿魏酸鈉回收率在99．9%～100．8%之間。表明氯化鈉和輔料對(duì)阿魏酸鈉的含量測(cè)定沒(méi)有影響。

2．2．4 線性關(guān)系考察

精密稱取阿魏酸鈉對(duì)照品適量，配制成1．0mg·mL－1阿魏酸鈉水溶液作為貯備液。分別精密量取不同體積的貯備液于100mL量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，制得濃度分別為7．944μg·mL－1、11．92μg·mL－1、15．89μg·mL－1、19．86μg·mL－1、23．83μg·mL－1、31．78μg·mL－1、39．72μg·mL－1的阿魏酸鈉溶液。各吸取20μL注入液相色譜儀，按外標(biāo)法進(jìn)行定 量 測(cè) 定，峰 面 積 依 次 為 646 940、990 242、1 330 078、1 686 090、2 035 564、2 731 828、3 425 585，以濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并擬合得到線性回歸方程：y＝0．0000142x＋0．6145，R2＝1。表明阿魏酸鈉濃度在7．944～39．72μg·mL－1的范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

表4回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab．4 Results of recovery rate experiment

2．2．5 樣品含量測(cè)定

測(cè)定3批阿魏酸鈉氯化鈉注射液供試品中阿魏酸鈉的含量，分別為103．0%、102．6%、101．6%。

3 結(jié)論

采用高效液相色譜法測(cè)定阿魏酸鈉氯化鈉注射液中阿魏酸鈉的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：阿魏酸鈉氯化鈉注射液中的氯化鈉和輔料對(duì)阿魏酸鈉的含量測(cè)定沒(méi)有影響；回收率在99．9%～100．8%之間；重復(fù)性和穩(wěn)定性良好；阿魏酸鈉濃度在7．944～39．72μg·mL－1范圍內(nèi)與峰面積的線性關(guān)系良好。表明高效液相色譜法適合阿魏酸鈉氯化鈉注射液中阿魏酸鈉含量的測(cè)定。

［1］趙琪，馬詠梅．阿魏酸鈉的藥理作用與臨床應(yīng)用［J］．中外健康文摘，2008，4（12）：66－67．

［2］趙保勝，桂海水，朱寅荻，等．阿魏化學(xué)成分、藥理作用及毒性研究進(jìn)展［J］．中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（17）：279－281．

［3］JIN Y，YAN E Z，F(xiàn)AN Y，et al．Sodium ferulate prevents amyloidbeta－induced neurotoxicity through suppression of p38MAPK and upregulation of ERK－1／2and Akt／protein kinase B in rat hippocampus［J］．Acta Pharmacol Sin，2005，26（8）：943－951．

［4］LIN C M，CHIU J H，WU I H，et al．Ferulic acid augments angiogenesis via VEGF，PDGF and HIF－1alpha［J］．The Journal of Nutritional Biochemistry，2010，21（7）：627－633．

［5］YBH16132005，阿魏酸鈉氯化鈉注射液［S］．

［6］國(guó)家藥典委員會(huì)．中國(guó)藥典［M］．2010年版，二部．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：410．