黃容旺，范文偉，李國斌，陳 銘

（廣東省東莞市石龍博愛醫(yī)院內(nèi)二科 523000）

胃癌是中國最常見的消化道腫瘤，其病死率居各種惡性腫瘤之首［1］。目前，診斷胃癌的主要方法是纖維胃鏡和上消化道造影檢查，其中，胃鏡被稱為是確診胃癌的“金標(biāo)準(zhǔn)”。由于這兩種途徑檢查方法必須要求具備先進(jìn)的儀器設(shè)備和專門的操作人員，技術(shù)要求高，費用也高，而且胃鏡又令患者很痛苦、不適合兒童和心肺功能不全的老年人，結(jié)果使不少患者望而卻步，且對亞臨床癥狀患者尚不能作為普查手段。而早期胃癌缺乏一定的特異性癥狀與體征，一般的消化道癥狀經(jīng)對癥治療后能暫時好轉(zhuǎn)，當(dāng)出現(xiàn)明顯的臨床癥狀而就診時，往往病情已屬中、晚期，使胃癌難以早期發(fā)現(xiàn)，從而使患者失去了最佳治療時機(jī)，影響胃癌的預(yù)后［2］。早診斷、早治療成為提高患者生存質(zhì)量、降低病死率的惟一途徑。這使得人們希望能有一種簡便、快速、重復(fù)性好、非介入性、便于動態(tài)監(jiān)測等優(yōu)點的檢查方法，能篩選出胃癌的高危人群，最好對胃癌能進(jìn)行早期診斷。近年來，血清腫瘤標(biāo)志物成為研究的熱點，腫瘤標(biāo)志物檢測操作簡單，價格便宜，適合腫瘤普查，但大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物特異性和敏感性較差，影響了臨床應(yīng)用。有研究表明，胃蛋白酶原（PG）、再生基因Ⅳ（RegⅣ）為近期研究較多的胃癌相關(guān)的血清標(biāo)志物，對胃癌早期診斷可能有輔助價值［3］，為探討PG與RegⅣ聯(lián)合檢驗對胃癌早期診斷的價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月至2013年6月本院收治的胃部病變患者216例，所有患者均經(jīng)胃鏡及病理學(xué)診斷確診。其中，胃癌患者18例（胃癌組）：男8例，女10例，年齡32～75歲，平均（52.6±7.2）歲，低分化癌8例，中分化癌5例，高分化癌5例。良性胃病患者198例（良性胃病組）：男82例，女116例，年齡35～75歲，平均（51.4±7.0）歲，其中，胃潰瘍38例，胃息肉54例，萎縮性胃炎46例，淺表性胃炎60例。另選取門診體檢健康者100例（對照組），男56例，女44例，無消化道、肝臟、腎臟疾病史。所有受試者均自愿參加試驗，并簽署知情同意書。

1.2 儀器與試劑 東芝120生化分析儀、意大利Alisei酶標(biāo)儀、Access2全自動微粒子化學(xué)發(fā)光分析儀、Bio－RAD公司i－Cycler熒光PCR儀；PGⅠ、PGⅡ試劑盒，購自北京美康生物技術(shù)研究中心，RegⅣELISA試劑盒，購自深圳匹基生物公司。

1.3 方法 所有受試者清晨采集空腹靜脈血5mL，3500 r／min離心15min，分離血清后－20℃保存，應(yīng)用東芝120生化分析儀進(jìn)行檢測分析（TrFIA）PGⅠ、PGⅡ；ELISA法檢測RegⅣ；定量檢測所用儀器系Bio－RAD公司i－Cycler熒光PCR儀；應(yīng)用羅氏電化學(xué)發(fā)光法，使用原裝試劑檢測CEA、CA19－9。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計量資料以表示，比較用t檢驗，多組間兩兩比較用單因素方差分析；計數(shù)資料采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組血清PGⅠ、PGⅡ、RegⅣ、CEA和CA19－9比較 胃癌組血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ／PGⅡ均顯著低于良性胃病組和對照組（P＜0.05）；良性胃病組血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ／PGⅡ顯著高于對照組（P＜0.05），胃癌組 RegⅣ、CEA和CA19－9均顯著高于良性胃病組和對照組（P＜0.05），見表1。

表1 各組血清PGⅠ、PGⅡ、RegⅣ、CEA和CA19－9比較

2.2 血清PG聯(lián)合RegⅣ篩查胃癌的效果評價 以病理診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，以PGⅠ＜70ng／mL聯(lián)合PGⅠ／PGⅡ＜3.0為界值，血清PG檢測胃癌的敏感性為72.0%，特異性為63.8%；血清PG聯(lián)合RegⅣ檢測胃癌的敏感性為83.3%，特異性為78.2%。血清CEA聯(lián)合CA19－9檢測胃癌的敏感性為55.6%，特異性為59.1%。PG與RegⅣ聯(lián)合檢驗敏感性、特異性均顯著高于CEA與CA19－9聯(lián)合檢驗（P＜0.05），見表2～3。

表2 PG與RegⅣ聯(lián)合檢驗結(jié)果（n）

表3 CEA與CA19－9聯(lián)合檢驗結(jié)果（n）

3 討 論

長期以來，胃癌一直是中國發(fā)病率和病死率較高的惡性腫瘤之一。國內(nèi)有報道顯示［4］，中國胃癌患者手術(shù)后5年生存率為30%～50%，其中，進(jìn)展期患者術(shù)后5年生存率為40%，早期患者術(shù)后5年生存率為90%。早診斷、早治療成為提高患者生存質(zhì)量、降低病死率的惟一途徑。然而，目前，臨床上胃癌的診斷主要依靠纖維胃鏡和上消化道造影檢查，這兩種檢查操作難度大，對儀器設(shè)備和操作人員要求高，費用貴，不能作為普查手段，且往往在患者有明顯占位病變才能確診，從而使患者失去了最佳治療時機(jī)。近年來，腫瘤標(biāo)志物研究與應(yīng)用已經(jīng)成為腫瘤診斷的研究熱點。由于腫瘤標(biāo)志物可以在腫瘤患者組織、體液和排泄物中檢出，標(biāo)本易于獲得，且操作相對簡單，價格低廉，特別適合作為腫瘤普查和早期診斷的方法［5］。然而，目前大多數(shù)標(biāo)志物檢測相應(yīng)腫瘤的敏感度及特異度仍不夠理想，尚未找到一種靈敏度、高特異度的指標(biāo)，而多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢驗可以提高腫瘤診斷的效果，正成為腫瘤診斷的研究方向。

PG屬于門冬氨酸蛋白家族，是胃黏膜特異性功能酶－胃蛋白酶的無活性前體，主要包括PGⅠ和PGⅡ。PGⅠ主要表達(dá)于胃底部，由主細(xì)胞和頸黏液細(xì)胞分泌。PGⅡ主要表達(dá)于十二指腸和全胃部。由于胃幾乎是PG的惟一來源，并且在分泌階段PG分泌量會發(fā)生變化，通過對血清PGⅠ和PGⅡ的檢測可以反映不同部位胃黏膜功能。已有研究表明，淺表性胃炎和幽門螺桿菌感染胃炎PGⅠ和PGⅡ分泌量升高，而腸上皮化生、不典型增生和胃癌時PGⅠ和PGⅡ分泌量降低［6］。本研究結(jié)果顯示，良性胃病組患者血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ／PGⅡ水平明顯升高，而胃癌組患者血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ／PGⅡ水平低于良性胃病患者和健康對照組，與相關(guān)報道基本一致［7］。其原因主要是胃潰瘍、淺表性胃炎等良性胃病主細(xì)胞和壁細(xì)胞數(shù)量增加，PG分泌量增多，而胃癌患者胃腺體和主細(xì)胞數(shù)量減少，有些被腸上皮替代，導(dǎo)致PG分泌量降低。

RegⅣ屬于鈣依賴性凝集素超家族，其所編碼的蛋白是一種表達(dá)于胃腸道和胰腺的分泌性蛋白［8］。有研究表明，RegⅣ與消化系統(tǒng)腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切的關(guān)系［9］。胃癌患者RegⅣ表達(dá)明顯增強(qiáng)，RegⅣ表達(dá)產(chǎn)物可以促進(jìn)細(xì)胞增殖，加速胃癌進(jìn)展。Qin等［10］研究發(fā)現(xiàn)29.4%的胃癌RegⅣ呈陽性表達(dá)，其表達(dá)水平與腫瘤分期、患者預(yù)后等明顯相關(guān)性。通過定量RT－PCR分析顯示RegⅣ在30.4%的胃癌中呈高水平表達(dá)［11］。本研究結(jié)果顯示，胃癌組患者RegⅣ陽性表達(dá)率為30.7%，與Qin等［10］報道基本一致，而定量RT－PCR結(jié)果顯示胃癌組RegⅣ水平明顯高于良性胃病組和對照組。而CEA和CA19－9檢查結(jié)果也表明兩種腫瘤標(biāo)志物與胃部病變情況有很好的一致性。

本研究還對血清PG聯(lián)合RegⅣ篩查胃癌的效果進(jìn)行了評價。血清PG聯(lián)合RegⅣ檢測胃癌的敏感性為83.3%，特異性為78.2%。血清CEA聯(lián)合CA19－9檢測胃癌的敏感性為55.6%，特異性為59.1%。PG與RegⅣ聯(lián)合檢驗敏感性、特異性均顯著高于CEA與CA19－9聯(lián)合檢驗。證實血清PG聯(lián)合RegⅣ檢測適用于胃癌高危人群的篩查。

［1］段樹全，劉琳，王殿棟，等.胃癌腹膜轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的檢測［J］.中國普通外科雜志，2011，20（10）：1075－1079.

［2］黃語嫣，葉建新，高楠，等.幽門螺桿菌、血清胃蛋白酶原與慢性胃病及胃癌的關(guān)系［J］.江蘇醫(yī)藥，2013，39（5）：528－530.

［3］Shafaghi A，Mansour－Ghanaei F，Joukar F，et al.Serum gastrin and the pepsinogenⅠ／Ⅱratio as markers for diagnosis of premalignant gastric lesions［J］.Asian Pac J Cancer Prev，2013，14（6）：3931－3936.

［4］易楠，王玨，王江紅.血清胃蛋白酶原在胃癌及胃癌前病變診斷中的意義［J］.重慶醫(yī)學(xué)，2011，40（27）：2722－2723.

［5］Cao XY，Jia ZF，Jin MS，et al.Serum pepsinogen Ⅱis a better diagnostic marker in gastric cancer［J］.World J Gastroenterol，2012，18（48）：7357－7361.

［6］汪欣，趙素萍，吳旋，等.血清胃蛋白酶原ELISA法檢測參考范圍探討［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（18）：2284－2285.

［7］Zolotarev VA，Khropycheva RP.Effect of proton pump inhibitors on the secretion of bicarbonates and pepsinogen induced by chemical stimulation of the gastric mucosa［J］.Bull Exp Biol Med，2013，154（4）：415－418.

［8］鄧薇，張小田，白志剛，等.人再生基因蛋白Ⅳ在晚期胃癌患者血清中的表達(dá)及意義［J］.醫(yī)學(xué)臨床研究，2012，29（12）：2304－2307.

［9］周海峰，徐珞，崔海燕.前列腺細(xì)胞REGⅣ基因功能的初步研究［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2010，10（23）：4407－4410.

［10］Qin Y，Li L，Chen J，et al.Fentanyl inhibits progression of human gastric Cancer MGC－803cells by NF－kappaB downregulation and PTEN upregulation in vitro［J］.Oncol Res，2012，20（2／3）：61－69.

［11］Mukoubayashi C，Yanaoka K，Ohata H，et al.Serum pepsinogen and gastric Cancer screening［J］.Intern Med，2007，46（6）：261－266.