陳 霆，李楓棣，鄧 巍，秦 川

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所，衛(wèi)生部人類疾病比較醫(yī)學(xué)重點實驗室，國家中醫(yī)藥管理局人類疾病動物模型三級實驗室，北京 100021)

由于小鼠體型小,生長繁殖快,成本低,易于控制,因此常被用作醫(yī)學(xué)實驗動物。在各種基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中，為了觀察藥物，新化合物等的藥效毒理；在疾病發(fā)生的病因，病機，病理研究中，為了觀察動物的機體功能，代謝以及形態(tài)變化，都需要對實驗動物采用一定的給藥方式。而小鼠尾靜脈注射就是其中最常用的方法之一，但小鼠尾靜脈較細(xì),造成穿刺難度較大,因此很大程度上制約了實驗的成功與否。近年來出現(xiàn)了一種新型的小鼠靜脈注射方法卻可以解決這個問題，即小鼠內(nèi)眥靜脈注射，其操作更簡單，成功率更高，本文即通過分別對小鼠進(jìn)行尾靜脈注射操作和內(nèi)眥靜脈注射，對其操作難易程度以及成功率進(jìn)行對比。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物：4～6周齡SPF級雌性BALB/C小鼠20只，體重14～16 g，來自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司(合格證號：SCXK(京)2012-0001)。實驗場所：中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所ABSL-3實驗室(注冊號：CNAS BL0010)。

1.1.2 0.9%氯化鈉注射液：石家莊四藥有限公司，批號130531407

1. 1. 3 1 mL注射器

1.2 方法

將動物分成2組，每組10只，一組為尾靜脈注射組，一組為內(nèi)眥靜脈注射組，由同一實驗人員對兩組分別進(jìn)行注射，每次每只小鼠注射100 μL0.9%氯化鈉注射液，并分別觀察每組注射的成功率以及所耗費時間。內(nèi)眥靜脈叢操作方法見圖1：

圖1 小鼠內(nèi)眥靜脈叢注射實際操作圖

2 結(jié)果

該實驗人員為首次進(jìn)行此兩種靜脈注射方法，實驗前由其他精通此兩種方法的實驗人員為其演示并講解操作要領(lǐng)后分別進(jìn)行操作。實驗結(jié)果見表1：

實驗結(jié)果表明，該實驗人員對尾靜脈注射組的成功率僅為40%，而內(nèi)眥靜脈注射的成功率為100%；而在時間上，內(nèi)眥靜脈注叢射組所花費的時間明顯要比尾靜脈注射組短很多。

3 討論

本次實驗所用的內(nèi)眥靜脈叢注射方法與之前所報道過的方法不同，之前有報道過的內(nèi)眥靜脈叢注射法為使針頭與鼠面成約45°的夾角,然后刺入下眼瞼與眼球之間,刺入深度約2～3 mm,同時固定好小鼠，防止因小鼠掙扎而造成的跑針，但這種操作方法的缺點是，注射是容易將針刺入小鼠淚腺，而使所注入的液體從小鼠鼻腔或口腔流出[1]。本次實驗實用的方法為將小鼠固定好，并使眼球突出于眼眶，使針頭與小鼠眼眶中心處成90°角刺入，刺入深度為2～3 mm，見注射器有回血即可進(jìn)行注射，這種方法的更易于操作，且成功率高。之前的報道中科研人員還進(jìn)行過利用這兩種方法對小鼠進(jìn)行碳廓清實驗[2-3]，碳廓清實驗是測定小鼠機體非特異性免疫功能的常用方法之一,其墨汁注入量的準(zhǔn)確性與否是該項實驗?zāi)芊袢〉贸晒Φ年P(guān)鍵因素之一。實驗結(jié)果表明用內(nèi)眥靜脈叢注入法注射墨汁測定碳廓清速率與尾靜脈注入法一樣,亦可敏感地反映小鼠的碳廓清能力[2]。通過本實驗可以說明小鼠內(nèi)眥靜脈叢注射是一種更簡單,更易掌握,且成功率高的小鼠靜脈注射方法，值得推廣。

表1 小鼠內(nèi)眥靜脈叢注射組與尾靜脈注射組所用時間及成功率

參考文獻(xiàn)：

[1] 王紅梅,馬玲,吳少單,等.比較兩種墨汁注射途徑對免疫低下小鼠廓清實驗的影響[J].中國食品衛(wèi)生雜志,2003,15:314-316.

[2] 秦光和,景簫,王偉,等. 墨汁的注入途徑不同對小鼠碳廓清實驗的影響[J].毒理學(xué)雜志,2007(21)2: 77-78.

[3] 中華人民共和國衛(wèi)生部.保健食品檢驗和評價技術(shù)規(guī)范,2003，2,28，29.