崔曉霞，尚世臣，張小飛，陳 旖，黃 斌，尚玉璞，王冬平，陳振文，王全新，隋麗華，李桂軍

(1.軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，北京 100071；2.首都醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部，北京 100069；3.遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司，本溪 117004)

地鼠，又名倉(cāng)鼠，屬哺乳綱(Mammalia)，嚙齒目(Rodentia)、倉(cāng)鼠科(Cricetidae)。實(shí)驗(yàn)用地鼠由野生地鼠馴養(yǎng)而成。常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的地鼠主要有金黃地鼠(Mesocricetusauratus)和中國(guó)地鼠(Cricetulusgriseus)。金黃地鼠現(xiàn)有近交系38種，突變系17種，遠(yuǎn)交群38種，但我國(guó)僅有1個(gè)遠(yuǎn)交群品種[1]。地鼠在生物醫(yī)學(xué)中主要應(yīng)用于腫瘤學(xué)研究、生殖生理和計(jì)劃生育研究、血管生理學(xué)和微循環(huán)研究、營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究和傳染病研究。地鼠是狂犬病毒、乙型腦炎病毒的研究及其疫苗生產(chǎn)的主要生物材料。

白化地鼠是金黃地鼠的突變?nèi)后w，性格溫順，眼為紅色，經(jīng)解剖頰囊及內(nèi)臟器官無(wú)明顯變化，1964年武漢生物制品研究所飼養(yǎng)的金黃地鼠群中首次發(fā)現(xiàn)了白色變種[2]。由于白化地鼠的腎細(xì)胞生長(zhǎng)與毒力檢查結(jié)果均優(yōu)于金黃地鼠，所以多用于狂犬疫苗生產(chǎn)[3]。2010年遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司所飼養(yǎng)的金黃地鼠群體中發(fā)現(xiàn)12只雄性地鼠和18只雌性地鼠毛色突變?yōu)榧儼咨?，并眼睛變?yōu)榧t色的地鼠，經(jīng)定向繁殖，已成功地繁殖出了均勻一致的白化地鼠，并形成了一定規(guī)模的群體。目前該白化地鼠群已繁殖5代。但該白化地鼠的生物學(xué)特性、白化發(fā)生機(jī)制及應(yīng)用價(jià)值尚未開(kāi)展研究。因此，本研究擬對(duì)該白化地鼠突變?nèi)旱陌椎鞍?、總蛋白、堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶等24項(xiàng)重要的血液生化指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，比較金黃地鼠與白化地鼠在血清生化指標(biāo)的差異，為建立規(guī)范的白化地鼠種群，開(kāi)發(fā)出自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的白化地鼠新品種，為醫(yī)學(xué)研究和藥物開(kāi)發(fā)提供新的動(dòng)物模型奠定基礎(chǔ)，為白化病發(fā)生機(jī)制研究提供新材料。

1 材料和方法為

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

8周齡金黃地鼠40只，雌雄各20只；8周齡白化地鼠40只，雌雄各20只。由遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司提供，清潔級(jí)，生產(chǎn)許可證號(hào):【SCXK(遼)2010-0001】。

1.2 血清制備

禁食12～24 h，乙醚麻醉后，眼眶靜脈取血，制備血清待用。

1.3 血液生化指標(biāo)測(cè)定及方法

共測(cè)定白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、堿性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、高密度膽固醇(HDLD)、總膽固醇(CHO)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、尿酸(URIC)、血糖(GLU)、甘油三酯(TG)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、鎂(Mg)、總膽紅素(TBIL)、乳酸脫氫酶(LD)、磷(P)、肌酸激酶(CK)、肌酐(Cr-s)、淀粉酶(AMY)、鈣(Ca)、鉀(K)、鈉(Na)、氯(Cl)、二氧化碳(CO2)、陰離子間隙(AG)等24項(xiàng)指標(biāo)。應(yīng)用美國(guó)Beckman公司生產(chǎn)的CX5PRO 全自動(dòng)生化測(cè)定儀及Beckman公司試劑測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用spss10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，進(jìn)行t檢驗(yàn)和方差數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果

2.1 8周齡金黃地鼠的血液生化指標(biāo)結(jié)果共測(cè)定24項(xiàng)

結(jié)果顯示雄性和雌性之間相比較高密度膽固醇(HDLD)、甘油三酯(TG)和陰離子間隙(AG)差異顯著(P<0.05)，白蛋白(ALB)、堿性磷酸酶(ALP)和氯(Cl)差異極顯著(P<0.01)，其余18項(xiàng)均無(wú)顯著性差異(P>0.05)(表1)。

2.2 8周齡白化地鼠的血液生化指標(biāo)結(jié)果共測(cè)定24項(xiàng)

結(jié)果顯示雄性和雌性之間相比較堿性磷酸酶(ALP)和鉀(K)差異顯著(P< 0.05)，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和鈉(Na)差異極顯著(P< 0.01)，其余20項(xiàng)均無(wú)顯著性差異(P> 0.05)(表2)。

2.3 8周齡金黃地鼠和白化地鼠的血液生化指標(biāo)結(jié)果共測(cè)定24項(xiàng)

結(jié)果顯示金黃地鼠和白化地鼠之間相比較白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、高密度膽固醇(HDLD)、總膽固醇(CHO)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和鎂(Mg)差異顯著(P< 0.05)，堿性磷酸酶(ALP)、淀粉酶(AMY)、鉀(K)和鈉(Na)差異極顯著(P< 0.01)，其余14項(xiàng)均無(wú)顯著性差異(P> 0.05)(表3)。

3 討論

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液生化參數(shù)主要是動(dòng)物自身的遺傳因素與環(huán)境因素決定與控制。遺傳因素是決定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液生化參數(shù)的內(nèi)在物質(zhì)基礎(chǔ)，而環(huán)境因素則是決定血液生化參數(shù)變化的外在條件。其中遺傳因素決定的大小, 常常用遺傳度表示,某種動(dòng)物的血液生化參數(shù)都有特定的波動(dòng)范圍，這種范圍構(gòu)成了每種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物特有的生物學(xué)特性參數(shù)[10]。不同品系(種)的動(dòng)物血液正常生化值存在較大差異，每個(gè)品系(種)的血液指標(biāo)都有其相對(duì)穩(wěn)定值，這也是區(qū)別各品系(種)的一個(gè)指標(biāo)[11]。

表1 金黃地鼠血清生化參數(shù)

表2 白化地鼠血清生化參數(shù)

表3 金黃地鼠和白化地鼠血清生化參數(shù)

肝臟是合成蛋白質(zhì)最重要的器官，當(dāng)肝細(xì)胞有病變時(shí)，合成各種蛋白質(zhì)的功能降低，可發(fā)生蛋白質(zhì)與量的改變，所以血液生化檢查是最常用、最具有意義的檢測(cè)項(xiàng)目。反映肝功能合成與分解功能的指標(biāo)主要有轉(zhuǎn)氨酶、血清總蛋白、白蛋白等[12]。目前，對(duì)于金黃地鼠和白化地鼠的研究報(bào)道很少，本研究對(duì)8周齡成年金黃地鼠及白化地鼠正常血清生化值進(jìn)行檢測(cè), 結(jié)果發(fā)現(xiàn): 大多數(shù)所檢測(cè)指標(biāo)均在正常值范圍內(nèi),與灰倉(cāng)鼠、黑線倉(cāng)鼠及大、小鼠等無(wú)明顯差異[4-9]，同種動(dòng)物雌雄個(gè)體間在少數(shù)幾個(gè)指標(biāo)存在一定差異，如堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶等，這可能與性別有關(guān)。而金黃地鼠與其白化地鼠之間白蛋白、總蛋白、高密度膽固醇、總膽固醇、谷丙轉(zhuǎn)氨酶差異顯著，堿性磷酸酶和淀粉酶差異極顯著，值得注意的是除高密度膽固醇外，其余幾項(xiàng)的值均為白化地鼠高于金黃地鼠，這或許與白化地鼠的突變基因有一定關(guān)系。

生化指標(biāo)一定程度上反映了動(dòng)物的新陳代謝和生理機(jī)能狀況，本研究結(jié)果為白化地鼠生物學(xué)特性積累數(shù)據(jù)基礎(chǔ),為研究白化地鼠突變機(jī)理奠定基礎(chǔ)，對(duì)該動(dòng)物的飼養(yǎng)管理以及實(shí)驗(yàn)應(yīng)用都具重要的參考價(jià)值，進(jìn)而為白化地鼠在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的廣泛應(yīng)用提供依據(jù)。

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