齊衛(wèi)紅，王 超，李 欣，張 琳，劉運(yùn)強(qiáng)，李 偉

(1.中國(guó)食品藥品檢定研究院，北京 100050；2.江西青峰藥業(yè)有限公司，江西 贛州 341000)

喜炎平注射液是一種臨床廣泛應(yīng)用的中藥注射劑，其成分為穿心蓮內(nèi)酯磺化物。具有祛熱解毒，消炎止痛之功效，對(duì)細(xì)菌性與病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊療效[1]，被譽(yù)為天然抗生素藥物。臨床主要用于治療支氣管炎、扁桃體炎和細(xì)菌性痢疾、兒童手足口病等疾病。隨著近年來(lái)該藥的廣泛應(yīng)用，所引發(fā)的不良反應(yīng)多表現(xiàn)為皮疹、蕁麻疹、過(guò)敏性休克、心悸等[2-7]受到國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局的高度重視，第48期《藥品不良反應(yīng)信息通報(bào)》對(duì)該藥的不良反應(yīng)進(jìn)行了分析和總結(jié)。本文通過(guò)給比格犬連續(xù)靜脈點(diǎn)滴喜炎平注射液28 d，定期監(jiān)測(cè)比格犬心電圖，觀察喜炎平對(duì)循環(huán)系統(tǒng)的影響，設(shè)置14 d恢復(fù)期，觀察恢復(fù)情況。研究受試物為臨床人體過(guò)量用藥時(shí)可能出現(xiàn)的毒性反應(yīng)并結(jié)合組織生化學(xué)、病理學(xué)結(jié)果，對(duì)喜炎平注射液進(jìn)行上市后的安全性再評(píng)價(jià)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 供試品

喜炎平注射液濃度：規(guī)格：5 mL：125 mg。批號(hào)20110105，江西青峰藥業(yè)有限公司提供。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

比格犬，普通級(jí)，24只，雌雄各半，7～8月齡，體重范圍：雌：約6～8 kg；雄：約7～9 kg。購(gòu)于北京瑪斯生物技術(shù)有限公司【SCXK(京)2011-0003】；實(shí)驗(yàn)在國(guó)家藥物安全評(píng)價(jià)監(jiān)測(cè)中心實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)室進(jìn)行【SYXK(京)2011-0037】。

1.1.3 測(cè)定儀器

FX-7102心電圖機(jī)，北京福田電子醫(yī)療儀器有限公司生產(chǎn)，配魚(yú)嘴夾式電極。

7060型全自動(dòng)生化分析儀，日立公司(HITACHI)生產(chǎn)

1.1.4 統(tǒng)計(jì)方法

用比格犬肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖數(shù)據(jù)及同期血清生化指標(biāo)作統(tǒng)計(jì)分析，將數(shù)據(jù)輸入spss17.統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行t檢驗(yàn)分析。

1.2 方法

根據(jù)體重，使用TOXSTA 2006軟件將24只比格犬隨機(jī)分為陰性對(duì)照組(0 mg/kg)、低劑量組(15 mg/kg)、中劑量組(75 mg/kg)、高劑量組(250 mg/kg)。動(dòng)物靜脈點(diǎn)滴給藥，陰性對(duì)照組給予生理鹽水，高、中、低劑量組分別給予濃度為12.5 mg/mL、3.75 mg/mL、0.75 mg/mL的喜炎平注射液，給藥體積是20 mL/kg，給藥速度為180 mL/h。每日給藥1次，每周根據(jù)體重調(diào)整一次給藥量。在實(shí)驗(yàn)期間分別于檢疫期間、首次給藥結(jié)束后、給藥中期以及末次給藥結(jié)束后測(cè)定一次,恢復(fù)期結(jié)束測(cè)定1次動(dòng)物心電圖并取血測(cè)定動(dòng)物血清生化學(xué)指標(biāo)。

(1)檢疫期動(dòng)物馴化：動(dòng)物購(gòu)進(jìn)后每周三次模擬心電檢步驟抓取、固定動(dòng)物，使動(dòng)物對(duì)檢測(cè)不緊張，檢測(cè)結(jié)果中降低偽跡現(xiàn)象發(fā)生。

(2)心電圖測(cè)量方法：將比格犬站立姿勢(shì)固定于犬架上，剃除四肢內(nèi)側(cè)近心端被毛，涂抹生理鹽水，將心電圖儀的肢體導(dǎo)聯(lián)電極夾在處理好的皮膚處。待動(dòng)物安靜后，開(kāi)啟儀器校準(zhǔn)電壓后記錄5～10個(gè)心電圖波形。測(cè)定項(xiàng)目：描記Ⅱ?qū)碾妶D，待心電圖基線穩(wěn)定后，記錄大約5～10個(gè)心電圖波形，計(jì)算以下指標(biāo)：心率、P-R間期、Q-T間期、P波振幅、Q波振幅、R波振幅、S波振幅、ST振幅、T波振幅。

(3)血清生化學(xué)測(cè)定方法：動(dòng)物前肢頭靜脈采集約3 mL血到未加抗凝劑的管中，血樣凝固后離心得到血清，將血清吸取到一管中，用日立7060型全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 心電圖檢測(cè)結(jié)果

2.1.1 檢疫期間動(dòng)物心電圖檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1

檢疫期對(duì)全體動(dòng)物進(jìn)行心電圖檢測(cè)，結(jié)果顯示動(dòng)物各項(xiàng)指標(biāo)都在正常值范圍內(nèi)[8]。

表1 檢疫期比格犬心電圖檢測(cè)結(jié)果

表2 首次給藥結(jié)束后各劑量組動(dòng)物心電圖檢測(cè)結(jié)果

表3 給藥中期各劑量組動(dòng)物心電圖檢測(cè)結(jié)果

表4 末次給藥結(jié)束后各劑量組動(dòng)物心電圖檢測(cè)結(jié)果

表5 恢復(fù)期結(jié)束各劑量組動(dòng)物心電圖檢測(cè)結(jié)果

2.1.2 首次給藥結(jié)束后動(dòng)物心電圖檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2

可見(jiàn)首次給藥結(jié)束后，低劑量組動(dòng)物心率減慢與陰性對(duì)照組比較有顯著性差異(P< 0.05)；高劑量組動(dòng)物P-R間期延長(zhǎng)與陰性對(duì)照組比較有顯著性差異(P< 0.05)，高劑量組動(dòng)物P-R間期延長(zhǎng)與該組檢疫期比較有顯著性差異(P< 0.05)。其它各項(xiàng)指標(biāo)未見(jiàn)異常(P﹥0.05)。

2.1.3 給藥中期動(dòng)物心電圖檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表3

各組各指標(biāo)與陰性對(duì)照組比較均未見(jiàn)顯著性差異(P﹥0.05)。

2.1.4 末次給藥結(jié)束后動(dòng)物心電圖檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表4

各組各指標(biāo)與陰性對(duì)照組比較均未見(jiàn)顯著性差異(P﹥0.05)。

2.1.5 恢復(fù)期動(dòng)物心電圖檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表5

恢復(fù)期結(jié)束，各劑量組動(dòng)物心電圖各指標(biāo)與陰性對(duì)照組比較均未見(jiàn)顯著性差異(P﹥0.05)。

2.2 血清生化學(xué)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果均在正常范圍內(nèi)[8]

3 討論

報(bào)道顯示臨床上喜炎平注射液出現(xiàn)皮疹、蕁麻疹、過(guò)敏性休克、心悸、過(guò)敏性休克從而引起循環(huán)系統(tǒng)衰竭等癥狀[7]，為此我們對(duì)該中藥注射劑進(jìn)行了安全性再評(píng)價(jià)，通過(guò)監(jiān)測(cè)動(dòng)物心電圖及血清生化學(xué)以觀察供試品對(duì)動(dòng)物循環(huán)系統(tǒng)的影響。結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)選用的比格犬，在檢疫期心電圖及血清生化學(xué)各指標(biāo)均在正常值范圍之內(nèi)[9]。并且檢疫期間多次對(duì)動(dòng)物進(jìn)行清醒狀態(tài)下心電檢測(cè)訓(xùn)練，目的為減少干擾獲取真實(shí)結(jié)果。

首次給藥后喜炎平高劑量組(250 mg/kg)動(dòng)物心電圖P-R間期延長(zhǎng)與陰性對(duì)照組比較有顯著性差異(P< 0.05)，該組動(dòng)物P-R間期數(shù)據(jù)與自身檢疫期比較同樣存在顯著性差異(P< 0.05)。結(jié)合同期的血清生化學(xué)檢測(cè)結(jié)果及實(shí)驗(yàn)結(jié)束后組織病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果未發(fā)現(xiàn)藥物對(duì)心臟造成損傷，因此認(rèn)為首次給藥后高劑量組(250 mg/kg)動(dòng)物心電圖P-R間期延長(zhǎng)為一過(guò)性改變，具體原因有待進(jìn)一步研究確定如增加動(dòng)物數(shù)量；運(yùn)用安全藥理遙測(cè)動(dòng)物進(jìn)行24 h心電監(jiān)測(cè)等。首次給藥后低劑量組動(dòng)物心率減慢與陰性對(duì)照組比較有顯著性差異(P< 0.05)；可能與動(dòng)物個(gè)體差異較大、數(shù)量少有關(guān)，心率減慢但仍在正常值范圍。檢疫期發(fā)現(xiàn)5只動(dòng)物竇性心率不齊可能與動(dòng)物年青，其心臟傳導(dǎo)系統(tǒng)發(fā)育未成熟、生理功能不健全和植物神經(jīng)不穩(wěn)定有關(guān)[9-11]，因?yàn)榈?、中、高三個(gè)劑量組均分有竇性心律動(dòng)物。而且隨著時(shí)間的發(fā)展，給藥中期、給藥結(jié)束、恢復(fù)期各組動(dòng)物心電圖檢測(cè)結(jié)果顯示竇性心律不齊的動(dòng)物全部恢復(fù)。低劑量組及高劑量組與檢疫期該組結(jié)果比較未見(jiàn)異常。因此認(rèn)為以上異常與喜炎平藥物無(wú)關(guān)，與動(dòng)物個(gè)體差異有關(guān)。

實(shí)驗(yàn)給藥中期、給藥結(jié)束后及恢復(fù)期分別檢測(cè)全體動(dòng)物心電圖，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理均未見(jiàn)異常，因此認(rèn)為喜炎平注射液對(duì)比格犬陰性對(duì)照組(0 mg/kg)、低劑量組(15 mg/kg)、中劑量組(75 mg/kg)、高劑量組(250 mg/kg)連續(xù)靜脈滴注給藥28 d及恢復(fù)14 d，未見(jiàn)對(duì)心電圖造成明顯影響。本次試驗(yàn)對(duì)喜炎平進(jìn)行了安全性再評(píng)價(jià)研究，如果有必要再進(jìn)一步對(duì)循環(huán)系統(tǒng)開(kāi)展研究可以采用遙測(cè)裝置檢測(cè)24 h心電、血壓、呼吸等指標(biāo)，血清生化學(xué)指標(biāo)也要增加針對(duì)循環(huán)系統(tǒng)的檢測(cè)項(xiàng)目。

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