董培良，于棟華，包順茹，劉樹(shù)民

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，黑龍江 哈爾濱 150040)

高脂血癥是各種原因?qū)е碌难獫{中膽固醇和(或)甘油三酯水平升高的一種疾病，是引發(fā)和加重動(dòng)脈粥樣硬化的病理基礎(chǔ)及導(dǎo)致動(dòng)脈硬化、心絞痛、心肌梗死、腦梗塞及腎損害等動(dòng)脈栓塞性疾病的獨(dú)立危害因素［1－2］。山精膠囊由山楂葉、黃精，薤白三味藥物組成，其功效為活血化瘀，通陽(yáng)養(yǎng)陰，散結(jié)止痛，主要用于氣滯血瘀所致的胸痹。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立高脂血癥模型，觀察山精膠囊對(duì)血脂代謝的影響及其抗氧化作用，為其對(duì)高脂血癥的臨床治療提供科學(xué)研究依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

清潔級(jí)SD大鼠72只，雌雄各半，體質(zhì)量(200±20)g，購(gòu)自黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào)SCXK黑2008004。

1.2 試劑與試藥

山精膠囊內(nèi)容物(山楂葉、黃精、薤白的提取物，黑龍江貴龍醫(yī)藥有限公司提供，批號(hào)20111018;心安膠囊內(nèi)容物(山楂葉提取物，哈爾濱紅太陽(yáng)健康產(chǎn)業(yè)集團(tuán)有限公司提供，批號(hào)20110401，高脂飼料(81.5%基礎(chǔ)飼料，3%膽固醇，10%豬油，5%雞蛋黃粉，0.3%膽酸鈉，0.2%丙硫氧嘧啶，10kg高脂飼料加1kg白糖);TC測(cè)定試劑盒(121361)、TG測(cè)定試劑盒(125351)、LDL－C測(cè)定試劑盒(120451)、HDL－C測(cè)定試劑盒(120441)、ApoA1/ApoB試劑盒(120391)(中生北控生物科技股份有限公司);超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)試盒(20120709)、丙二醛(MDA)測(cè)試盒(20120613)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH－Px)測(cè)試盒(20120618)、一氧化氮(NO)測(cè)試盒(20120608)(南京建成生物工程研究所)。

1.3 儀器

756PC型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司);A－6半自動(dòng)生化分析儀(北京松上技術(shù)有限公司);KDC－160HR高速冷凍離心機(jī)(科大創(chuàng)新股份有限公司)。

2 方法

2.1 高脂血癥模型建立及分組

SD大鼠普通飼料喂養(yǎng)一周，禁食12h。眶內(nèi)靜脈叢取血，半自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中的總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)，均為正常者用于實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)分為空白組，模型組，心安膠囊組，山精膠囊高、中、低劑量組，每組12只，雌雄各半。除空白組外，其余各組大鼠均給予高脂飼料，連續(xù)4周。于第4周末，禁食12h，半自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中的總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)，低密度脂蛋白膽固醇(LDL－C)，確定高脂血癥模型建立成功，見(jiàn)表1。次日開(kāi)始灌胃給藥，心安膠囊以0.342g/kg灌胃給藥，山精膠囊高，中，低劑量組分別以1.701g/kg，0.8505g/kg，0.2835g/kg 灌胃給藥，共 10天。給藥期間繼續(xù)給予高脂飼料。

2.2 生化指標(biāo)檢測(cè)

末次給藥后，禁食12h，眶內(nèi)靜脈叢取血2.5ml，4℃靜置，3500r/min離心15min，分離血清，用半自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)TC，TG，HDL－C，LDL－C水平以及載脂蛋白ApoA1和ApoB水平，用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)SOD，MDA，NO及GSH－Px水平。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

3 結(jié)果

3.1 大鼠高脂血癥模型的建立

SD大鼠高脂飼料喂養(yǎng)4周后，眶內(nèi)靜脈叢取血檢測(cè)脂質(zhì)指標(biāo)。與空白組比較，模型組血清 TC、TG、LDL－C含量均有顯著性升高(P＜0.05)，HDL－C含量顯著性降低(P＜0.05)，說(shuō)明造模成功。見(jiàn)表1。

表1 高脂血癥大鼠脂質(zhì)水平(s)

表1 高脂血癥大鼠脂質(zhì)水平(s)

注:與空白組比較，*P ＜0.05。

組別 TC(mmol/L)TG(mmol/L)HDL－C(mmol/L)LDL－C(mmol/L)空白組1.54 ±0.10 0.58 ±0.13 0.70 ±0.04 0.43 ±0.02模型組 3.52 ±0.86* 0.92 ±0.23* 0.48 ±0.06* 0.85 ±0.21*

3.2 山精膠囊對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響

與空白組相比較，模型組血清TC、TG、LDL－C和ApoB均有顯著性升高(P＜0.05)，HDL－C和ApoA1含量均顯著性降低(P＜0.05)，說(shuō)明造模成功。與模型組相比較，山精膠囊高、中、低三個(gè)劑量組血清中TC、TG、LDL－C和ApoB的含量均明顯低于模型組(P＜0.05)，HDL－C和ApoA1含量均顯著性高于模型組(P ＜0.05)。見(jiàn)表2。

表2 山精膠囊對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響(s)

表2 山精膠囊對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響(s)

注:與空白組比較，*P ＜0.05;與模型組比較，#P ＜0.05。

組別 TC(mmol/L)TG(mmol/L)HDL－C(mmol/L)LDL－C(mmol/L)ApoA1(mmol/L)ApoB(mmol/L)3 ±0.06 0.25 ±0.01模型組 9.64 ±1.32* 1.88 ±0.19* 0.27 ±0.07* 1.94 ±0.38* 0.58 ±0.02* 0.35 ±0.04*高劑量組 4.56 ±0.29# 1.17 ±0.06# 0.47 ±0.07# 0.88 ±0.12# 0.61 ±0.02# 0.28 ±0.01#中劑量組 3.46 ±0.39# 0.80 ±0.05# 0.37 ±0.07# 0.80 ±0.20# 0.61 ±0.02# 0.27 ±0.01#低劑量組 6.52 ±0.48# 1.31 ±0.18# 0.45 ±0.05 1.21 ±0.32# 0.68 ±0.02# 0.3 ±0.01#陽(yáng)性藥組 5.73 ±0.48# 1.00 ±0.12# 0.99 ±0.26# 1.00 ±0.24# 0.65 ±0..02# 0.29 ±0.01空白組 2.21 ±0.49 0.55 ±0.56 0.99 ±0.26 0.44 ±0.09 0.8#

3.3 山精膠囊對(duì)高脂血癥大鼠脂質(zhì)過(guò)氧化水平的影響

與空白組相比較，模型組血清中MDA含量顯著性升高(P ＜0.05)，NO 的含量，SOD、GSH －Px活性顯著性降低(P＜0.05)。與模型組相比較，山精膠囊高、中、低三個(gè)劑量組血清中MDA含量低于模型組(P＜0.05)，NO 的含量，SOD、GSH －Px活性均高于模型組(P ＜0.05)。見(jiàn)表3。

表3 山精膠囊對(duì)高脂血癥大鼠脂質(zhì)過(guò)氧化水平的影響(s)

表3 山精膠囊對(duì)高脂血癥大鼠脂質(zhì)過(guò)氧化水平的影響(s)

注:與空白組比較，*P ＜0.05;與模型組比較，#P ＜0.05。

組別MDA(mmol/L)SOD(mmol/L)NO(mmol/L)GSH－Px(mmol/L)空白組 2.17 ±0.72 119.26 ±8.41 55.58 ±6.11 1138.08 ±101.20模型組 9.49 ±0.82* 30.44 ±6.39*12.53 ±4.75* 761.76 ±44.23*高劑量組 4.89 ±0.91# 80.92 ±7.16#24.95 ±3.26#971.52 ±34.26#中劑量組 4.37 ±0.57# 98.70 ±22.01#38.63 ±4.09# 994.08 ±55.49#低劑量組 6.39 ±0.84# 59.31 ±21.90#19.26 ±3.33# 853.44 ±24.03#陽(yáng)性藥組 5.26 ±0.81# 71.92 ±8.03#24.11 ±4.34# 967.20 ±48.49#

4 討論

山精膠囊能夠有效降低實(shí)驗(yàn)性高脂血癥模型大鼠的TC，TG，LDL－C和 ApoB的含量，升高 HDL－C，ApoA1含量。結(jié)果表明，山精膠囊能顯著調(diào)節(jié)由高脂飲食引起的高脂血癥的脂質(zhì)代謝紊亂。與心安膠囊相比，山精膠囊的治療效果更佳。這可能與山精膠囊中黃精里的多糖、薤白里的甲基烯丙基三硫的調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝作用相關(guān)［3－4］。黃精能夠明顯抑制膽固醇生物合成的限速酶羥甲基戊二酰輔酶還原酶活力，從而減少內(nèi)源性膽固醇的生成。薤白中有效成分甲基烯丙基三硫及其它含硫化合物通過(guò)升高細(xì)胞內(nèi)環(huán)磷酸腺苷水平，增加平滑肌細(xì)胞內(nèi)酸性膽固醇酯水解酶的活性，促進(jìn)膽固醇酯的水解和轉(zhuǎn)運(yùn)，從而降低血脂［5］。二者配伍山楂葉可達(dá)到多途徑、多靶點(diǎn)調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝。此外，山精膠囊可以顯著提高 NO的含量，增強(qiáng) SOD和GSH－Px的活性，降低MDA含量。初步表明山精膠囊的調(diào)脂作用可能還與其抗氧化能力增強(qiáng)，減少脂質(zhì)過(guò)氧化物產(chǎn)生，改善血管內(nèi)皮功能有關(guān)，可防止高脂血癥進(jìn)一步發(fā)展形成動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死等心血管疾病。

［1］呂秋軍.新藥藥理學(xué)研究方法［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2007:234.

［2］董培良，殷鑫，張?zhí)煊?，?當(dāng)歸芍藥散對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥模型大鼠的影響(Ⅰ)［J］.中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2013，41(6):81 －83.

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［4］孫文娟，劉潔，楊世杰.不同產(chǎn)地長(zhǎng)梗薤白提取物對(duì)高脂血癥大鼠脂代謝的影響及其抗氧化作用［J］.白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，25(3):259－260.

［5］陳麗萍，白旭東，于國(guó)良.高分辨率超聲觀察薤白制劑對(duì)高脂血癥的治療作用［J］.中國(guó)老年學(xué)雜志，2002，22(3):182－183.