田玉旺 許春偉 方美玉

腎癌、前列腺癌、膀胱癌及睪丸癌全基因組關(guān)聯(lián)研究計(jì)量和熱點(diǎn)的分析

田玉旺 許春偉 方美玉

目的 分析腎癌、前列腺癌、膀胱癌和睪丸癌全基因組關(guān)聯(lián)研究(GWAS)英文文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的構(gòu)成特征。方法對(duì)國(guó)際最新GWAS研究數(shù)據(jù)庫(kù)之一——美國(guó)國(guó)立人類基因組研究所(NHGRI)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘。結(jié)果 應(yīng)用文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)方法，客觀分析了NHGRI的文獻(xiàn)基本特征、第一第二階段樣本量、染色體區(qū)域相關(guān)(核苷酸多態(tài)性)SNP、風(fēng)險(xiǎn)等位基因頻率、P值文獻(xiàn)中最強(qiáng)SNP、優(yōu)勢(shì)比(odds ratio，OR)或β相關(guān)系數(shù)、實(shí)驗(yàn)平臺(tái)及檢測(cè)SNP 數(shù)量8項(xiàng)數(shù)據(jù)，找出了泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS的一些共性特征。結(jié)論 8號(hào)染色體區(qū)域SNP多態(tài)性，可能是泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤遺傳易感區(qū)域，深入此易感區(qū)域研究，可能為闡述腫瘤發(fā)生、治療及預(yù)后評(píng)估提供一定線索。

全基因組關(guān)聯(lián)研究；文獻(xiàn)研究；數(shù)據(jù)挖掘

(ThePracticalJournalofCancer,2014,29:1548～1552)

全基因組關(guān)聯(lián)研究(genome-wide association study,GWAS)是應(yīng)用高通量基因芯片技術(shù)，對(duì)人類全基因組范圍內(nèi)常見遺傳變異——單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNP)和拷貝數(shù)變異(copy number variation,CNV)進(jìn)行總體關(guān)聯(lián)分析的研究方法[1]。它基于DNA是可遺傳的且和臨近的等位基因從上一代傳遞給下一代這一理論。它可以在病例和對(duì)照中比較全基因組范圍內(nèi)所有變異的等位基因頻率，從中發(fā)現(xiàn)與疾病相關(guān)聯(lián)的序列變異[2-3]。GWAS統(tǒng)計(jì)分析的基本原則是減少系統(tǒng)偏倚和加大研究強(qiáng)度，譬如進(jìn)行強(qiáng)有力的SNP設(shè)定分析[4]。2007年4月Duggan等[5]和Murabito等[6]利用Illumina及Affymetrix的基因芯片對(duì)前列腺癌進(jìn)行了GWAS，其結(jié)果同時(shí)首次在Science雜志上發(fā)表，自此以后越來越多腫瘤方面的GWAS研究結(jié)果陸續(xù)發(fā)表?，F(xiàn)通過對(duì)最新GWAS數(shù)據(jù)庫(kù)之一——NHGRI，進(jìn)行腎癌、前列腺癌、膀胱癌和睪丸癌文獻(xiàn)特征數(shù)據(jù)分析挖掘，所獲得的GWAS數(shù)據(jù)信息或許能對(duì)國(guó)內(nèi)泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS產(chǎn)生參考作用。

1 資料與方法

研究資料來源于NHGRI，該數(shù)據(jù)庫(kù)由Hindorff等始建于2008年11月25日。登入頁(yè)面http://www.genome.gov/page.cfm?pageid=26525384#searchForm。在頁(yè)面下Disease/Trait一欄中輸入“Renal cell carcinoma”，點(diǎn)擊Search后，再點(diǎn)擊“Download Spreadsheet of Search Result”保存“MyGWASSearch.xls”，并改名為“Renal cell carcinoma.xls”，并用同樣的步驟獲得“Prostate cancer.xls”、“Bladder cancer.xls”和“Testicular cancer.xls”。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)基本特征

數(shù)據(jù)庫(kù)原記錄包含30篇論文[5-34](腎癌3篇，前列腺癌21篇，膀胱癌4篇、睪丸癌2篇)、涉及135個(gè)SNP(腎癌8個(gè)SNP，前列腺癌112個(gè)SNP，膀胱癌12個(gè)SNP，睪丸癌3個(gè)SNP)。論文分別發(fā)表在Nat Genet(IF：35.209/2012)16篇，BMC Med Genet(IF：2.536/2012)1篇，Cancer Biol Ther(IF：3.287/2012)1篇，Cancer Res(IF：8.65/2012)1篇，Hum Genet(IF：4.633/2012)1篇，Hum Mol Genet(IF：7.692/2012)7篇，J Natl Cancer Inst (IF：14.336/2012)1篇，Cancer Epidemiol Biomarkers Prev(IF：4.559/2012)2篇。

2.2 第一(篩選)階段樣本量

30篇泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS研究文獻(xiàn)，第一階段病例組樣本量從202～6 621例；對(duì)照組從100～41 603例。按病例數(shù)/對(duì)照數(shù)的研究文獻(xiàn)的分布見表1。3.33%的文獻(xiàn)沒有明確報(bào)告對(duì)照組樣本量。

表1 泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS文獻(xiàn)第一階段樣本量分布

注：NR為未報(bào)道。

2.3 第二(驗(yàn)證) 階段樣本量

第二階段病例組樣本量從439～22 957例，沒有報(bào)告第二階段病例數(shù)據(jù)的文獻(xiàn)占3.33%。對(duì)照組從860～24 726例。按病例數(shù)/對(duì)照數(shù)的研究文獻(xiàn)的分布見表2。

表2 泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS文獻(xiàn)第二階段樣本量分布

2.4 染色體區(qū)域相關(guān)SNP(NCBI rs登記號(hào))

所定位的染色體區(qū)域分布大致與染色體長(zhǎng)度近似。其中8號(hào)染色體明顯多于鄰近的染色體，見表3。

2.5 對(duì)照組相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)等位基因頻率

泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS文獻(xiàn)中對(duì)照組相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)等位基因P頻率的分布見表4，其中未發(fā)現(xiàn)稀有變異(即在對(duì)照人群中的發(fā)生頻率<0.01)。

2.6 優(yōu)勢(shì)比(odds ratio，OR)或β相關(guān)系數(shù)

文獻(xiàn)中最強(qiáng)SNP相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)等位基因優(yōu)勢(shì)比(或β相關(guān)系數(shù))，其中β相關(guān)系數(shù)最小值為1.04，最大值為3.07，見表5。

2.7P值文獻(xiàn)中最強(qiáng)SNP

相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)等位基因P值選擇<1×10-6為錄入標(biāo)準(zhǔn)，最小P值3×10-33。P值分布見表6。

2.8 實(shí)驗(yàn)平臺(tái)及檢測(cè)核苷酸多態(tài)性(SNP)數(shù)量

文獻(xiàn)中SNP試驗(yàn)平臺(tái)見表7。超過一半(73.33%)的泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS獨(dú)立使用了Illumina研究平臺(tái)，六分之一(16.67%)使用Affimetrix芯片系統(tǒng)。SNP數(shù)量從60 275～5 340 737個(gè)。16.67%研究試驗(yàn)平臺(tái)的SNP數(shù)量在100萬～1 000萬間，見表7，8。

3 討論

3.1 概述

表3 泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS文獻(xiàn)染色體區(qū)域相關(guān)SNP (NCBI rs 登記號(hào))

表4 泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS文獻(xiàn)中對(duì)照組相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)等位基因頻率分布

表5 最強(qiáng)SNP相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)等位基因優(yōu)勢(shì)比(或β相關(guān)系數(shù))分布

表6 P值分布

表7 泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS文獻(xiàn)實(shí)驗(yàn)的試驗(yàn)平臺(tái)分布

表8 泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS文獻(xiàn)使用的試驗(yàn)平臺(tái)檢測(cè)核苷酸多態(tài)性(SNP)數(shù)量

目前泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS方面的報(bào)道主要在腎癌、前列腺癌、膀胱癌和睪丸癌領(lǐng)域，其中腎癌GWAS方面Purdue等[9]研究發(fā)現(xiàn)2p21區(qū)域(EPAS1基因)rs7579899、12q24.31區(qū)域(SCARB1基因)rs4765623和11q13.3區(qū)域(基因間隔區(qū))rs7105934位點(diǎn)多態(tài)性與腎細(xì)胞癌遺傳易感性相關(guān)聯(lián)。Wu等[8]研究發(fā)現(xiàn)12p11.23區(qū)域(ITPR2基因)rs718314位點(diǎn)多態(tài)性與腎細(xì)胞癌遺傳易感性相關(guān)聯(lián)。前列腺癌GWAS方面2007年Murabito等[6]研究發(fā)現(xiàn)3p22區(qū)域(CTDSPL基因)rs9311171、6p12區(qū)域(PKHD1基因)rs10498792、5q14區(qū)域(HAPLN1基因)rs4466137、3q24區(qū)域(基因間隔區(qū))rs345013和13q33區(qū)域(基因間隔區(qū))rs1529276與前列腺癌遺傳易感性相關(guān)聯(lián)。并在在同一年Duggan等[5]也報(bào)道前列腺癌GWAS結(jié)果但未報(bào)道位點(diǎn)具體未知，以上這兩篇是GWAS首次在腫瘤中的報(bào)道，從此也拉開了腫瘤GWAS的序幕，此后在前列腺癌GWAS領(lǐng)域陸續(xù)發(fā)現(xiàn)上百個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)。膀胱癌GWAS方面Wu等[32]研究發(fā)現(xiàn)8q24.3區(qū)域(PSCA基因)rs2294008位點(diǎn)多態(tài)性與膀胱癌遺傳易感性相關(guān)聯(lián)。睪丸癌GWAS方面Kanetsky等[34]研究發(fā)現(xiàn)9p24區(qū)域(DMRT1基因)rs7040024和rs755383與睪丸癌遺傳易感性相關(guān)。一年后Kanetsky等[33]又發(fā)現(xiàn)12q21.3區(qū)域(KITLG基因)rs4474514也與睪丸癌遺傳易感性相關(guān)。

3.2 NHGRI數(shù)據(jù)庫(kù)分析

通過對(duì)NHGRI數(shù)據(jù)庫(kù)中泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤中八項(xiàng)數(shù)據(jù)進(jìn)行不完全統(tǒng)計(jì)后，我們發(fā)現(xiàn)泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤有如下特點(diǎn)：①在文獻(xiàn)基本特征方面：泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤在Nat Genet發(fā)表的文獻(xiàn)最多，占53.33%，其次Hum Mol Genet占23.33%和Cancer Epidemiol Biomarkers Prev占6.67%，BMC Med Genet、Cancer Biol Ther、Cancer Res、Hum Genet和J Natl Cancer Inst各一篇。筆者推測(cè)Nat Genet以其影響力將是優(yōu)質(zhì)泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS的主要陣地。②泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS第一、二階段的病例組樣本量方面：一般從幾百例到幾萬例不等，且以千例為主，最大樣本量均不超過25，000例；對(duì)照組樣本量也從幾百例到幾萬例不等，但以千例以上為主，最大樣本量均為超過50，000例。③染色體區(qū)域相關(guān)SNP方面：以8號(hào)染色體區(qū)域SNP居多，其中8號(hào)染色體區(qū)域SNP在胃腸消化系統(tǒng)腫瘤中也居多。④對(duì)照組相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)等位基因頻率方面：泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS中風(fēng)險(xiǎn)等位基因以Risk Allele Frequency=0.40左右最多，其次是Risk Allele Frequency=0.50，但未發(fā)現(xiàn)稀有變異。⑤P值文獻(xiàn)中最強(qiáng)SNP方面：泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤P值以10-10為主，其中最強(qiáng)P值2×10-33。⑥優(yōu)勢(shì)比(odds ratio，OR)或β相關(guān)系數(shù)方面：泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤OR以1.00左右的弱相關(guān)占多數(shù)，2.00以上的強(qiáng)相關(guān)也占相當(dāng)一部分比例。⑦實(shí)驗(yàn)平臺(tái)及檢測(cè)SNP 數(shù)量方面：泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤實(shí)驗(yàn)平臺(tái)方面Illumina研究平臺(tái)占大多數(shù)，其次是Affymetrix芯片系統(tǒng)，未見Perlegen或Invader研究平臺(tái)的報(bào)道。檢測(cè)SNP數(shù)量從60 275個(gè)到5 340 737個(gè)不等，1/6試驗(yàn)平臺(tái)的SNP數(shù)量在100萬～1 000萬之間。

腫瘤方面GWAS的最終目標(biāo)是應(yīng)用于臨床，主要體現(xiàn)在對(duì)正常人群進(jìn)行腫瘤的危險(xiǎn)度預(yù)測(cè)評(píng)估和指導(dǎo)腫瘤的個(gè)體化治療。個(gè)體化治療推崇在腫瘤遺傳譜指導(dǎo)下的個(gè)體化醫(yī)學(xué)(personalized medicine)，為腫瘤發(fā)生和治療療效提供早期預(yù)測(cè)，促進(jìn)腫瘤預(yù)防和治療。泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS經(jīng)過7年的發(fā)展，已在腎癌、前列腺癌、膀胱癌和睪丸癌遺傳易感性研究方面取得了很大成功，為個(gè)體化治療打下了基礎(chǔ)。本文通過運(yùn)用文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)方法客觀分析了NHGRI的文獻(xiàn)基本特征、第一、二階段樣本量、染色體區(qū)域相關(guān)SNP、對(duì)照組相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)等位基因頻率、P值文獻(xiàn)中最強(qiáng)SNP、優(yōu)勢(shì)比(odds ratio，OR)或β相關(guān)系數(shù)和實(shí)驗(yàn)平臺(tái)及檢測(cè)SNP 數(shù)量8項(xiàng)數(shù)據(jù)，找到了泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS的一些共性特征，為把握泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS的研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢(shì)奠定基礎(chǔ)，并對(duì)國(guó)內(nèi)泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤GWAS產(chǎn)生參考作用。

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(編輯：吳小紅)

Measurement and Hot Research of Genome-wide Association Study in Renal Cell Carcinoma、Prostate Cancer、Bladder Cancer and Testicular Cancer

TIANYuwang,XUChunwei,FANGMeiyu.

DepartmentofPathology,theMilitaryGeneralHospitalofBeijingPLA,Beijing,100700

Objective To analyze the data constitution features of genome-wide association study (GWAS) in Renal cell carcinoma、Prostate cancer、Bladder cancer and Testicular cancer in English literature.Methods National human genome institute GWAS database，one of the latest international research database of GWAS，was meticulously data mined.Results Using literature metrology method objectively analyzed 8 data of the NHGRI's basic characteristics of the literature,the first and second stage of sample size,chromosomal regions associated SNPS,related risk allele frequency in the control group,P value with the strongest SNP in the literature,odds ratio or beta coefficient of correlation and experimental platform including testing the SNP number,and found out the common characteristics of the urogenital system tumor GWAS.Conclusion Chromosome 8 regional SNP polymorphism may be the urogenital system tumor genetic susceptibility region,and through into the susceptible area can provide some clues in the treatment of cancer and prognosis assessment.

Genome-wide Association Study( GWAS);Literature research；Data Mining

100700 中國(guó)人民解放軍北京軍區(qū)總醫(yī)院(田玉旺，許春偉)；310021 浙江省腫瘤醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科(方美玉)

許春偉

10.3969/j.issn.1001-5930.2014.12.012

R73-36

A

1001-5930(2014)12-1548-05

2014-02-24

2014-03-18)