馬瀟瀟 任瑞鋒 張素萍 李 俊 趙海英 管 燕

人附睪分泌蛋白4對卵巢癌復(fù)發(fā)的臨床診斷價值

馬瀟瀟 任瑞鋒 張素萍 李 俊 趙海英 管 燕

目的 評估人附睪分泌蛋白4(HE4)對判斷卵巢癌復(fù)發(fā)的敏感性和特異性。方法 42例可疑卵巢癌復(fù)發(fā)患者和42例良性附件病變患者，在二次手術(shù)前24 h內(nèi)留取血清樣品集中檢測HE4和CA125水平。結(jié)果 CA125診斷卵巢癌復(fù)發(fā)的敏感性和特異性分別為38.09%和57.14%。HE4以70 pmol/L 和150 pmol/L作為診斷界點，診斷卵巢癌復(fù)發(fā)的敏感度分別為76.19%和28.57%。特異性均為100.00%。結(jié)論 HE4判斷卵巢癌復(fù)發(fā)優(yōu)于CA125，以70 pmol/L作為診斷界點可以獲得絕對的特異性。

人附睪分泌蛋白4；糖類抗原-125；卵巢癌復(fù)發(fā)

(ThePracticalJournalofCancer，2014，29：1544～1547)

晚期卵巢癌即使經(jīng)過手術(shù)和幾個月的化療，總體2年無復(fù)發(fā)生存率為33.6至95.8%之間[1]。監(jiān)測腫瘤復(fù)發(fā)的策略目前仍未統(tǒng)一。目前多數(shù)婦科腫瘤醫(yī)師在完成初次治療后的第一年里對患者每3個月進行一次CA125聯(lián)合CT或MRI成像加體格檢查的組合評價[2]。

由于CA125經(jīng)常在非惡性腫瘤疾病升高所以其具有很高的假陽性率[3]。

因此，近年來為了提高檢測卵巢癌的特異性和靈敏性，有許多對新型生物標(biāo)志物，如人附睪蛋白4(HE4)單獨或聯(lián)合CA125的組合的研究[4-6]。HE4是近年來用于診斷早期卵巢癌一個新標(biāo)記物，比CA125具有更高的靈敏度(76.9%)[7]。近期美國食品和藥物管理局(FDA)批準(zhǔn)HE4與CA125檢測相結(jié)合用于監(jiān)測上皮性卵巢癌復(fù)發(fā)或疾病進展[8]。然而，目前為止只有兩個關(guān)于HE4應(yīng)用于監(jiān)測卵巢癌復(fù)發(fā)[4，9]的研究。這兩項研究均未單獨計算HE4監(jiān)測復(fù)發(fā)卵巢癌的敏感度和特異性。本研究為首個前瞻、對照比較CA125和HE4在卵巢癌復(fù)發(fā)組(研究組)與良性附件病變組(對照組)患者中表達的敏感性和特異性的研究。

1 資料與方法

1.1 資料來源

本研究自2010年11月至2013年6月，前瞻性入選華北石油管理局總醫(yī)院婦科可疑卵巢癌復(fù)發(fā)的患者(研究組)和良性附件病變組(對照組)，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。入選標(biāo)準(zhǔn)如下：①年齡18～80歲；②符合2009年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)標(biāo)準(zhǔn)；③獲得了患者的知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)包括：①嚴(yán)重肝腎功能不全，嚴(yán)重心力衰竭，血液疾?。恍呐K異常、血液、腎臟、呼吸和(或)肝功能異常；②存在其他的惡性腫瘤。

1.2 主要儀器和試劑

DENLEY DRAGON Wellscan MK 3 全自動酶標(biāo)儀：芬蘭Thermo 公司生產(chǎn)；Alisei 全自動酶免疫分析儀：意大利 SEAC 公司生產(chǎn)；HE4試劑盒和質(zhì)控品由瑞典CanAg公司提供；CA125試劑盒和質(zhì)控品由瑞士Roche公司提供。HE4 水平檢測采用ELISA 雙抗體夾心法；CA125水平的測定采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法。CA125參考值為 0～35 U/ml，CA125>35 U/ml 判斷為CA125陽性。血清HE4 參考值為 0～150 pmol/L，設(shè)定兩個界值HE4>70 pmol/L和 HE4>150 pmol/L 判斷為 HE4 陽性。

所有可疑復(fù)發(fā)的卵巢癌患者均行盆腔超聲檢查、CT或MRI檢查中的至少一個。所有患者于手術(shù)前一天獲取用于腫瘤標(biāo)志物分析的血液樣品。

研究組中入選的卵巢癌復(fù)發(fā)患者均行二次手術(shù)，由婦科腫瘤病理學(xué)家進行病理檢查。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用統(tǒng)計軟件SPSS 18.0進行統(tǒng)計學(xué)分析，首先進行正態(tài)分布檢驗。經(jīng)檢驗CA125和HE4數(shù)據(jù)均不符合正態(tài)分布，HE4和CA125水平以中位數(shù)(四分位數(shù)間距)表示；以病理診斷為“金標(biāo)準(zhǔn)”進行四格表分析，計算敏感度和特異度。應(yīng)用受試者工作特征(ROC)曲線得到診斷卵巢癌復(fù)發(fā)的診斷界值，并由ROC曲線下面積綜合評價CA125和HE4的診斷準(zhǔn)確性。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者一般情況(表1)

2.2 兩組患者HE4和CA125水平

研究組CA125中位數(shù)為68 (23～133)U/ml；HE4中位數(shù)為103.6 pmol/L(58～187)。研究組中CA125水平高于診斷界點16例(38.09%)，HE4水平高于診斷界點(70 pmol/L)32例(76.19%)，而HE4水平高于診斷界點150 pmol/L 12例(28.57%)。

對照組CA125中位數(shù)為25 U/ml(13～162)；HE4中位數(shù)為19 pmol/L(10～42)。對照組患者中CA125水平高于診斷界點18例(42.9%)，HE4水平高于診斷界點70和150 pmol/L未檢測到。

研究組中CA125單獨檢測對判斷卵巢癌復(fù)發(fā)的靈敏度38.09%，而HE4以70和150 pmol/L作為診斷界點的敏感性分別是76.19%和28.57%。在這兩種情況下，HE4的特異性是絕對的(100.00%)，而CA125的特異性僅為57.14%，陽性預(yù)測值47.06%，見表2。

表1 兩組患者一般情況(例，%)

表2 HE4和CA125診斷準(zhǔn)確性/%

CA125和HE4診斷卵巢癌復(fù)發(fā)的ROC分析：HE4的陽性預(yù)測值(PPV)是100%，診斷界點定為70和150 pmol/L時陰性預(yù)測值(NPV)是80.77%和58.33%。CA125診斷卵巢癌復(fù)發(fā)的ROC曲線：ROC曲線下面積為0.558(95%，CI 0.417-0.699)(圖1)。HE4診斷卵巢癌復(fù)發(fā)的ROC曲線：ROC曲線下面積為0.901(95%，CI 0.813-0.980)(圖2)。

圖1 CA125診斷卵巢癌復(fù)發(fā)的ROC曲線

圖2 HE4診斷卵巢癌復(fù)發(fā)的ROC曲線

3 討論

目前監(jiān)測卵巢癌復(fù)發(fā)的策略尚未統(tǒng)一。Rustin等發(fā)現(xiàn)，高達70%的患者在卵巢癌復(fù)發(fā)的癥狀和體征出現(xiàn)之前5個月血清CA125水平已經(jīng)升高，其預(yù)測疾病進展的敏感性為80%～90%[10-11]。雖然串聯(lián)數(shù)個指標(biāo)監(jiān)測可早期發(fā)現(xiàn)卵巢癌術(shù)后復(fù)發(fā)，但卻增加漏診率。唯一對比根據(jù)CA125水平同傳統(tǒng)的臨床指標(biāo)監(jiān)測卵巢癌復(fù)發(fā)的隨機、對照、多中心試驗的結(jié)果顯示兩種治療方案在總體生存率方面未見明顯統(tǒng)計學(xué)差異[12]。此外還有一些關(guān)于CA125作為腫瘤血清標(biāo)志物監(jiān)測卵巢癌復(fù)發(fā)的文獻報道。CA125抗原不僅在卵巢癌患者血清中高表達，也在非惡性疾病升高從而導(dǎo)致其特異性降低[13]。因而急需新的監(jiān)測卵巢癌復(fù)發(fā)或疾病進展的標(biāo)志物應(yīng)用于臨床。

作為單個腫瘤標(biāo)記物，HE4與CA125相比在檢測早期階段的惡性腫瘤方面具有更高的靈敏度(76.9%)[7]。HE4在漿液性和子宮內(nèi)膜樣卵巢癌中高表達，提示其可用于區(qū)分不同的腫瘤類型[14]。有研究證實 HE4在非惡性婦科疾病中與CA125 具有相似的敏感性，且假陽性率更低[5，15]。

目前僅有兩個關(guān)于HE4監(jiān)測卵巢癌的研究。Havrilesky等[4]入選卵巢癌復(fù)發(fā)患者27例，使用生物標(biāo)志物組合(包括HE4，MMP7和Glycodelin)預(yù)測復(fù)發(fā)的敏感性為100%，單獨使用CA125的敏感性為 96%。生物標(biāo)志物組合中至少有一種在患者出現(xiàn)臨床癥狀、體征之前升高(提前時間范圍6～69周)，其中CA125升高的占 14/27例(52%)[4]。Anastasi等入選卵巢癌復(fù)發(fā)患者5例，HE4在CA125升高前5～8個月已經(jīng)升高[9]。盡管這兩個研究未對單獨使用HE4作為監(jiān)測指標(biāo)的敏感性和特異性進行研究。仍提示HE4可能是卵巢癌復(fù)發(fā)的早期重要指標(biāo)。

本研究為首個前瞻、對照比較CA125和HE4在卵巢癌復(fù)發(fā)患者中表達敏感性和特異性的研究。結(jié)果顯示CA125靈敏度35.29%低于Havrilesky等的研究結(jié)果(96%)。但是，回顧分析文獻資料中CA125的敏感性，根據(jù)38篇文獻采用35 U / ml的作為診斷界點敏感性為65%，前置時間中位數(shù)為3個月(1～7個月)[16]。

本研究結(jié)果顯示HE4在鑒別惡性疾病方面比CA125更有效。此外，特異性和陽性預(yù)測值均為100%。文獻中未見關(guān)于HE4診斷復(fù)發(fā)性卵巢癌的敏感性和特異性的數(shù)據(jù)同本研究比較。Havrilesky等[4]使用生物標(biāo)志物組合(包括HE4)研究其預(yù)測卵巢癌復(fù)發(fā)的敏感性，但該研究未考慮單個標(biāo)記物的敏感性。

既往有許多研究都試圖確定HE4的診斷界點但是結(jié)果不一致[17-18]。本研究中HE4設(shè)置兩個診斷界點：150 pmol/L(按照制造商的指示)，和70 pmol/L( Moore等所建議的)[6]。使用HE4>1.8 ng/ mL作為診斷界點檢測早期敏感性達到82.7%，而檢測惡性程度高的敏感性為92.5%。Anastasi等HE4使用150 pmol/L作為診斷界點診斷卵巢癌有96.9%的敏感性[9]。另一方面，Moore等的使用70 pmol/L作為HE4診斷界點用于檢測早期卵巢癌，可以獲得95%的特異性和72.9%的靈敏度[17]。與此相反，Montagnana等使用30 pmol/L作為早期卵巢癌的診斷界點，發(fā)現(xiàn)靈敏度和特異度分別是98%和100%[18]。本研究結(jié)果顯示，HE4在診斷卵巢癌復(fù)發(fā)方面較CA125具有更高的敏感性和特異性。根據(jù)本研究中ROC曲線，最佳HE4檢測卵巢癌復(fù)發(fā)診斷界點是67.1 pmol/L。

總之，HE4的絕對特異性可能是至關(guān)重要的，可以避免不必要的探查性手術(shù)和(或)影像學(xué)檢查，并可選擇卵巢癌復(fù)發(fā)的高危患者轉(zhuǎn)院至到高度專業(yè)化的腫瘤中心。HE4尤其適用于監(jiān)測CA125陰性的卵巢癌患者。

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(編輯：吳小紅)

Clinical Diagnostic Value of Human Epididymal Secretory Protein 4 in the Recurrence of Ovarian Cancer

MAXiaoxiao，RENRuifeng，ZHANGSuping，etal.

GeneralHospitalofNorthChinaPetroleumAdministrationBureau，Renqiu，062552

Objective To evaluate the sensitivity and specificity of human epididymal secretory protein 4(HE4)in detecting recurrent ovarian cancer.Methods Serum samples were obtained 24 h before surgery from 42 cases of suspicious recurrent ovarian cancer and 42 patients with benign adnexal leison.HE4 and carbohydrate antigen 125(CA125) levels were detected.Results Sensitivity and specificity of CA125 in detecting recurrent ovarian cancer were 38.09 and 57.14 %，respectively.Two HE4 cut-off value were 70 pmol/L and 150 pmol/L.The HE4 sensitivity were 76.19 and 25.87 %，respectively.The HE4 specificity was 100 %.Conclusion HE4 is superior to CA125 in detecting ovarian cancer recurrence，70 pmol/L cut-off of HE4 can achieve absolute specificity.

Human epididymis protein 4(HE4)；Carbohydrate antigen 125(CA125)；Recurrent ovarian cancer

華北油田礦區(qū)臨床醫(yī)學(xué)研究課題(編號：2013-HB-G-19-3)

062552 華北石油管理局總醫(yī)院婦產(chǎn)科

管 燕

10.3969/j.issn.1001-5930.2014.12.011

R737.31

A

1001-5930(2014)12-1544-04

2014-10-09

2014-10-29)