曹景鋒,杜曉鵬,星 云,徐 陶,唐樹生
(公安部昆明警犬基地,云南 昆明 650204)
1.1 血清 2011年12月5~7日,分別采集79頭警犬血樣,3~5 mL/頭,帶回實驗室,經3000 r/min離心10 min,取上層血清,-20℃冷凍備用。
1.2 檢測試劑盒 犬弓形蟲IgG抗體酶免檢測試劑盒(ELISA),購自珠海經濟特區(qū)海泰生物制藥有限公司;動物弓形蟲IHA試劑盒,購自江蘇省農業(yè)科學院獸醫(yī)研究所;旋毛蟲病抗體快速檢測試劑條,購自河南百奧生物工程有限公司。
1.3 主要儀器 酶標儀(Bio Tek Instrument Inc,Vermont,USA)、臺式離心機、移液器、37℃恒溫箱、微量振蕩器、110°醫(yī)用V型血凝板等。
1.4 方法
1.4.1 弓形蟲IgG抗體ELISA檢測 按照ELISA試劑盒說明書進行操作,結果判定標準如下.陽性:樣品OD值>臨界對照OD均值×1.1;可疑:臨界對照OD值均值×0.9≦樣品OD值≦臨界對照OD均值×1.1;陰性:樣品OD值<臨界對照OD值平均值×0.9。
1.4.2 弓形蟲間接血凝實驗(IHA)檢測 按照弓形蟲間接血凝試劑盒說明書進行操作,結果判定標準如下。陽性血清對照效價應≥1∶1024,凝集反應 ≥50%(++);血清凝集價 ≥ 1∶64為陽性;血清凝集價≥1∶32為可疑;血清凝集價≤1∶16為陰性。
1.4.3 旋毛蟲檢測 按照旋毛蟲病快速檢測試劑條操作說明書操作,結果判斷標準如下。試劑條出現(xiàn)兩條棕色“││”線時,判為陽性。僅出現(xiàn)一條棕色“│”對照線,判為陰性。
2.1 弓形蟲抗體檢測結果 對79份血清進行弓形蟲抗體檢測,用ELISA檢出陽性血清38份,陽性率為48.10%(38/79),可疑6份。IHA檢出陽性血清27份,陽性率為34.18%(27/79),可疑7份。結果見表1。
表1 犬弓形蟲和旋毛蟲抗體檢測
上述兩種方法檢測,均為陽性有17份,陽性率為21.52%(27/79),2份都檢為可疑。
ELISA方法檢測警犬血清弓形蟲抗體陽性率(48.10%)高于IHA(34.18%),但是兩者的差異不顯著(P>0.05)。說明兩種方法均可行,不同檢測方法所獲得結果存在的差異在正常范圍之內。
2.2 旋毛蟲抗體檢測結果 79份血清共檢出5份旋毛蟲抗體呈陽性,陽性率為6.33%(5/79),結果見表1。
2.3 結果分析 弓形蟲病為重要的人犬共患病,犬感染弓形蟲主要是因為食用了未煮熟的含有弓形蟲包囊的肉,或是因誤食了終末宿主貓排出的感染性卵囊。犬感染弓形蟲后,可以傳播給人,主要通過兩種途徑,一是機械性的傳播,即犬將戶外的弓形蟲卵囊攜帶入室后被人食入;二是人食用了未煮熟的含有弓形蟲包囊的狗肉。警犬是重要的工作犬,獲悉其弓形蟲感染情況具有重要的意義,目前,尚未見警犬弓形蟲病流行情況報道,為此,開展了本試驗調查,已為警犬弓形蟲病的防控奠定基礎。
本調查分別采用ELISA和IHA檢測犬血清弓形蟲抗體,陽性率較高,不管哪種方法檢測為陽性,都只能說明被檢犬只曾感染過弓形蟲,并在體內產生了弓形蟲抗體,并不能說明抗體陽性犬體內正帶蟲,是否正帶蟲,需要取其相應的組織做進一步檢測,而取警犬的內臟組織可行性不大。介于抗體陽性率的存在,建議進一步加強犬只弓形蟲病的防治。除了用藥物預防之外,特別注意在(野外)訓練時,盡量避免其吞咬非專屬犬食,特別防止其接觸貓糞。同時,還需要采取有效措施,禁止野貓出入。犬感染旋毛蟲主要是因為食入了含有旋毛蟲包囊的生或半生的動物肉?;\養(yǎng)警犬的感染與戶主平時飼養(yǎng)有很大關系,喂食生的或未煮熟的含有旋毛蟲包囊的肉制品是犬主要的感染來源,通常應提倡熟食飼喂,盡可能將旋毛蟲的感染幾率降到最低,防治該病在使用一些藥物的同時,還應該保證警犬犬舍周圍的環(huán)境衛(wèi)生,可控制或消滅周圍環(huán)境的鼠類,避免犬攝食性嚙齒動物而感染。
2.3.1 犬弓形蟲血清抗體陽性率 對79份警犬血清進行弓形蟲抗體檢測,用ELISA檢出陽性血清38份,可疑6份,陽性率為48.10%;IHA檢出陽性血清27份,可疑7份,陽性率為34.18%。79份血清中有17份兩種方法檢測都檢為陽性,2份都檢為可疑;有4份ELISA檢測為陽性的血清用IHA檢測為可疑;17份ELISA檢測為陽性而用IHA檢測為陰性;7份ELISA檢測為陰性而IHA檢測為陽性。
ELISA方法檢測警犬血清弓形蟲抗體陽性率(48.10%)高于IHA(34.18%),但是兩者的差異不顯著(P>0.05)。
2.3.2 犬旋毛蟲抗體膠體快速檢測 79份血清共檢出5份旋毛蟲抗體呈陽性,陽性率為6.33%,見表1。
該警犬基地犬弓形蟲感染率較高,ELISA和IHA檢測陽性率分別為48.10%和34.18%。說明警犬接觸到弓形蟲卵囊的幾率高,警犬感染的弓形蟲的風險較高。兩種方法檢測的是警犬血清中弓形蟲抗體的水平,不管哪種方法檢測為陽性,都只能說明被檢犬只曾感染過弓形蟲,并在體內產生了弓形蟲抗體,并不能說明抗體陽性犬現(xiàn)在體內是否帶蟲,抗體陽性犬只帶蟲與否還需作進一步調查。
ELISA方法的特異性和敏感性一般要高于IHA方法,鑒于兩種檢測方法檢出的結果,建議兩種方法檢測為陽性和可疑的犬都應該引起犬主的重視,在不知是否帶蟲的情況下,可以選用一些抗弓形蟲藥物進行防治,并且應勤打掃犬舍,注意警犬生活環(huán)境衛(wèi)生,從多方面防犬弓形蟲病于未然。
犬等宿主因食入含有旋毛蟲包囊的生或半生的動物肉類而感染。本調查結果所檢測出的血清陽性,同樣說明警犬曾經感染過或正帶蟲感染。防治該病在使用一些藥物的同時,還應該保證警犬犬舍周圍的環(huán)境衛(wèi)生,可控制或消滅周圍環(huán)境的鼠類,并提倡熟食飼喂。
本次調查只是針對犬弓形蟲病和旋毛蟲病進行了檢測,犬是否感染有其他寄生蟲等疾病,有待進一步研究。