左立新

不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的應(yīng)用研究

左立新

目的 評價(jià)酶聯(lián)免疫吸附劑測定（ELISA），電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)（ECLIA），時(shí)間分辨熒光免疫分析技術(shù)（TRFIA）及化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）四種檢測方法對乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測的一致性。方法 選取2009年1月～2011年2月株洲市人民醫(yī)院診治的120例乙型肝炎患者，采用ELISA、ECLIA、TRFIA及CLIA進(jìn)行乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測。結(jié)果 在ELISA與ECLIA檢測中，HBsAg檢測Kappa值為0.821（μ=29.21），HBeAg檢測Kappa值為0.887（μ=16.54）一致性極強(qiáng)；抗HBs檢測Kappa值為0.754（μ=31.54），抗HBe檢測Kappa值為0.751（μ=25.54），抗HBc檢測Kappa值為0.691（μ=27.54），有高度一致性。在ELISA與TRFIA檢測中，HBsAg檢測Kappa值為0.841（μ=31.54），抗HBs檢測Kappa值為0.814（μ=25.43），抗HBe檢測Kappa值為0.852（μ=18.21），及抗HBc檢測Kappa值為0.816（μ=27.54），有極強(qiáng)一致性；HBeAg檢測Kappa值為0.761（μ=27.54），有高度一致性。在ELISA與CLIA檢測中，抗HBs檢測Kappa值為0.876（μ=19.21），抗HBc檢測Kappa值為0.864（μ=29.21），有極強(qiáng)一致性；HBsAg檢測Kappa值為0.764（μ=26.54），HBeAg檢測Kappa值為0.712（μ=24.42），抗HBe檢測Kappa值為0.721（μ=21.43），有高度一致性。結(jié)論 在對乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測時(shí)，ELISA、ECLIA、TRFIA和CLIA 4種檢測均有一致性，不同檢測方法結(jié)果可以互認(rèn)。

乙型肝炎血清標(biāo)志物；酶聯(lián)免疫吸附劑測定（ELISA）；電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)（ECLIA）；時(shí)間分辨熒光免疫分析技術(shù)（TRFIA）；化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）；一致性

乙型肝炎為全球性多發(fā)疾病，目前全球約有3億乙型肝炎病毒攜帶者。而我國更是乙型肝炎高發(fā)地區(qū)[1]，約1億患者攜帶乙型肝炎病毒。目前臨床上對乙型肝炎的診斷主要依靠乙型肝炎血清標(biāo)志物，主要有乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎表面抗體（抗HBs）、乙型肝炎e抗體（HBeAg）、乙型肝炎e抗體（抗HBe）及乙型肝炎核心抗體（抗HBc）。傳統(tǒng)的檢測方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）[2]，隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，新的實(shí)驗(yàn)儀器與技術(shù)不斷用于臨床，電化學(xué)發(fā)光發(fā)（ECLIA），時(shí)間分辨免疫熒光法（TRFIA）及化學(xué)發(fā)光法（CLIA）等新試驗(yàn)方法均在近幾年在臨床上廣泛應(yīng)用。本研究對用4種方法（ELISA，ECLIA，TRFIA及 CLIA）對120份血清標(biāo)本進(jìn)行檢測，并對它們的一致性進(jìn)行了評價(jià)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2009年1月～2011年2月株洲市人民醫(yī)院診治的120例乙型肝炎患者，其中男74例，女46例；年齡20～51歲，平均（34.5±1.2）歲?；颊呔弦倚透窝自\斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。

1.2 方法 抽取120例患者血清樣本，并采用ELISA，ECLIA，TRFIA及CLIA這4種方法進(jìn)行檢測。ELISA采用PHOMO酶標(biāo)儀（安圖生物公司）進(jìn)行檢測[4]；ECLIA檢測采用羅氏E601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀；TRFIA采用Angtest時(shí)間分辨免疫熒光分析儀；CLIA檢測采用意大利IASON化學(xué)發(fā)光熒光免疫分析儀[5]。

1.3 結(jié)果判斷 根據(jù)廠家試劑說明書規(guī)定的Cut-off值做為判斷標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)用競爭法檢測時(shí)陽性為＜Cut-off值，夾心法檢測時(shí)檢測陽性為＞Cut-off值[6]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 判斷不同檢測方法檢測結(jié)果是否具有一致性采用Kappa檢驗(yàn)，并采用μ檢驗(yàn)進(jìn)行抽樣誤差影響的排除。根據(jù)Kappa系數(shù)對檢測結(jié)果一致性程度進(jìn)行分區(qū)，一般劃分為6個(gè)區(qū)段：Kappa系數(shù)＜0表示極差；0～0.2表示微弱；0.21～0.4表示弱；0.41～0.6表示中度；0.61～0.8表示高度；0.81～1.0表示極強(qiáng)。

2 結(jié)果

ELISA與ECLIA檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果見表1。ELISA與TRFIA檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果見表2。ELISA與CLIA檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果見表3。

表1 應(yīng)用ELISA與ECLIA方法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志結(jié)果比較

表2 應(yīng)用ELISA與TRFIA方法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志結(jié)果比較

3 討論

我國為乙型肝炎高發(fā)地區(qū)，故需一種或幾種可靠檢驗(yàn)方法來診斷乙型肝炎。目前臨床上診斷乙型肝炎的方法主要依靠乙型肝炎血清標(biāo)志物，標(biāo)志物檢測主要包括HBsAg、抗HBc、抗HBe、抗HBs及HBeAg[7]。

目前臨床上乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測有多種方法，主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，電化學(xué)發(fā)光法，時(shí)間分辨免疫熒光法及化學(xué)發(fā)光法，其中最常用的為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，特異性及敏感性最佳的檢測方法為電化學(xué)發(fā)光法[8]。

表3 應(yīng)用ELISA與CLIA方法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志結(jié)果比較

本研究結(jié)果顯示，在ELISA與TRFIA檢測中，HBsAg檢測Kappa值為0.841（μ=31.54），抗HBs檢測Kappa值為0.814（μ=25.43），抗HBe檢測Kappa值為0.852（μ=18.21），及抗HBc檢測Kappa值為0.816（μ=27.54），有極強(qiáng)一致性；HBeAg檢測Kappa值為0.761（μ=27.54），有高度一致性。在ELISA與ECLIA檢測中，HBsAg檢測Kappa值為0.821（μ=29.21），HBeAg檢測Kappa值為0.887（μ=16.54）一致性極強(qiáng)；抗HBs檢測Kappa值為0.754（μ=31.54），抗HBe檢測Kappa值為0.751（μ=25.54），抗HBc檢測Kappa值為0.691（μ=27.54），有高度一致性。在ELISA與CLIA檢測中，抗HBs檢測Kappa值為0.876（μ=19.21），抗HBc檢測Kappa值為0.864（μ=29.21），有極強(qiáng)一致性；HBsAg檢測Kappa值為0.764（μ=26.54），HBeAg檢測Kappa值為0.712（μ=24.42），抗HBe檢測Kappa值為0.721（μ=21.43），有高度一致性。總的來說4種方法在對乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測均具有高度或極強(qiáng)的一致性，故在臨床檢測中，這4種方法可以進(jìn)行互認(rèn)。

[1] 楊凡,單詠梅,周宏，等.不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評價(jià)分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2010,25(9):723-726.

[2] 潘曉紅.不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果評價(jià)[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2012,7(21):112-114.

[3] 張碧瓊.不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果評價(jià)[J].健康必讀（中旬刊）,2012,11(4):145-146.

[4] 董劍.不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果評價(jià)的分析[J].貴陽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2012,34(6):60-61.

[5] 朱麗坤.不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評價(jià)分析[J].按摩與康復(fù)醫(yī)學(xué)（中旬刊）,2011,2(10):22.

[6] 毛炎輝.不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評價(jià)分析[J].中外醫(yī)療,2013,32(9):167-168.

[7] 劉軍.不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物的結(jié)果分析[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2013,8(18):40-41.

[8] 張俊峰,許現(xiàn)偉.不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果評價(jià)[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2013,8(27):129-130.

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.23.085

湖南 412000 株洲市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科（左立新）