曹曉君

[摘要] 目的 對(duì)Diasys R/S 2003和普利生尿沉渣分析系統(tǒng)進(jìn)行性能及臨床應(yīng)用的評(píng)估。方法 分別對(duì)兩臺(tái)尿沉渣儀與牛鮑氏計(jì)數(shù)板法進(jìn)行可比性試驗(yàn)，并對(duì)兩儀器作準(zhǔn)確性、重復(fù)性、線性檢測；對(duì)Diasys進(jìn)行攜帶污染率檢查。結(jié)果Diasys R/S 2003和普利生均與牛鮑氏計(jì)數(shù)板法顯示相關(guān)（r>r0.01）且有非常顯著性意義（P<0.01）；準(zhǔn)確率分別為124.2%和95.8%；重復(fù)性低值CV%分別為6.5%和3.6%，高值CV%分別為6.2%和3.7%；且均顯示良好線性；而Diasys的攜帶污染率為0.14%。結(jié)論 兩臺(tái)儀器均符合NCCLS尿沉渣定量分析標(biāo)準(zhǔn)，檢測結(jié)果與臨床相符，具有準(zhǔn)確性好、精密度高、操作簡便、污染少、成本低等優(yōu)點(diǎn)，因此兩者都是目前比較理想的尿沉渣分析儀。

[關(guān)鍵詞] 尿沉渣分析儀；尿沉渣檢查；儀器評(píng)價(jià)

[中圖分類號(hào)] R446.12 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2014）06-139-03

常規(guī)的尿液分析是作為腎臟疾病篩查的重要檢查項(xiàng)目之一，現(xiàn)今，科技的進(jìn)步以及日新月異的檢查方法，傳統(tǒng)的尿沉渣檢查已被高效、快速、簡便的尿液分析儀逐漸取代。但是，大量臨床實(shí)驗(yàn)證明尿液分析儀在某些方面不能做出準(zhǔn)確判斷，進(jìn)而誤導(dǎo)臨床醫(yī)生做出錯(cuò)誤判斷[1]。因此我們必須重視尿沉渣檢查這一傳統(tǒng)的檢查方法。尿液有形成分顯微鏡檢測是一種方法簡便、價(jià)廉、結(jié)果最可靠的檢查方法，同時(shí)也是最重要的參考方法[2]，但在傳統(tǒng)的尿沉渣檢查中，手工顯微鏡檢查費(fèi)時(shí)，程序繁瑣，使用儀器和檢查方法的不夠規(guī)范化，判斷標(biāo)準(zhǔn)帶有一定的主觀意識(shí)，其結(jié)果不能反映臨床實(shí)際情況，因此，尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化是檢驗(yàn)工作迫切解決的問題[3]。為了尿沉渣檢查的標(biāo)準(zhǔn)化，國內(nèi)、外推出了新的尿沉渣分析儀，如Diasys R/S 2003、普利生兩種尿沉渣分析儀都是根據(jù)NCCLS規(guī)定，對(duì)尿液進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化檢測的儀器。為了了解兩臺(tái)儀器的工作性能和臨床應(yīng)用情況，作者對(duì)臨床標(biāo)本對(duì)兩者的可比性、準(zhǔn)確性、精確度、攜帶污染以及稀釋功能進(jìn)行評(píng)估。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來源 2012年9～12月本院住院患者116例，其中男62例，女54例，年齡16～54歲，平均35.3歲，收集晨尿標(biāo)本，2h內(nèi)檢測完畢。

1.1.2 儀器 Diasys R/S 2003 尿沉渣分析儀（美國）；普利生尿沉渣分析系統(tǒng)（珠海黑馬公司）；光學(xué)顯微鏡（日本OLYMPUS CH20型）；改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板（上海求精生化試劑儀器有限公司）；標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)數(shù)板（浙江黃巖試劑公司）；標(biāo)準(zhǔn)化10mL刻度離心管及離心機(jī)等。

1.2 方法

1.2.1 檢查方法

1.2.1.1 Diasys法 取混勻尿液10mL于離心管中用400G相對(duì)離心力離心5min，棄去上層9.8mL，留取底層尿液0.2mL，搖勻，用Diasys尿沉渣分析儀對(duì)有形成分計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)1個(gè)大方格，將結(jié)果乘以4，即換算出每微升尿液中含細(xì)胞或管型數(shù)。

1.2.1.2 普利生法 用上述方法將尿液離心，搖勻后，把沉渣吸進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)板中，先在低倍鏡下瀏覽1μL的范圍，觀察標(biāo)本的分布情況，再用高倍計(jì)數(shù)10個(gè)大方格，共1μL尿液中有形成分。

1.2.1.3 牛鮑氏計(jì)數(shù)板法 參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版）[4]尿沉渣定量檢查法進(jìn)行。

1.2.2 評(píng)估方法

1.2.2.1 可比性試驗(yàn) 分別用Diasys、普利生、牛鮑氏板法對(duì)116例標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型的計(jì)數(shù)。

1.2.2.2 準(zhǔn)確性檢查 取新鮮尿液離心沉淀吸上清液配紅細(xì)胞含量（理論值）為：3160、1580、1050、790、632個(gè)/μL，5個(gè)級(jí)別的細(xì)胞懸液用Diasys，普利生分別數(shù)紅細(xì)胞2次取均值（）。

1.2.2.3 精密度檢查 取新鮮尿液配紅細(xì)胞懸液高、低值兩份，兩臺(tái)儀器對(duì)兩份標(biāo)本重復(fù)計(jì)數(shù)10次，計(jì)算均值（）、標(biāo)準(zhǔn)差（s）和變異系數(shù)（CV）。

1.2.2.4 攜帶污染率 取一份紅細(xì)胞高值及一份低值的尿標(biāo)本用Diasys分別重復(fù)計(jì)數(shù)3次，按以下公式計(jì)算：

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行相關(guān)性分析。采用相關(guān)分析比較兩儀器法與牛鮑氏板法對(duì)同一標(biāo)本檢測的相關(guān)性，P<0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 可比性分析

Diasys和普利生分別與牛鮑氏板比較，紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型都有相關(guān)（r>r0.01）且有顯著性意義（P<0.01）。見表1。直線回歸方程如下：Diasy：紅細(xì)胞y=1.61x-0.40；白細(xì)胞y=0.69x+1.36；管型y=1.85x+0.02。普利生：紅細(xì)胞y=1.93x+0.40；白細(xì)胞y=0.63x+1.60；管型y=0.74x+0.14。

2.2 準(zhǔn)確度檢查

Diasys和普利生準(zhǔn)確率分別是為124.2%和95.8%。見表2。

2.3 精密度檢測

Diasys和普利生分別重復(fù)計(jì)數(shù)紅細(xì)胞，得低值CV%分別為6.5%和3.6%，高值CV%分別為6.2%和3.7%。見表3。

2.4 攜帶污染率

取一份紅細(xì)胞高值及一份低值的尿標(biāo)本用Diasys分別重復(fù)計(jì)數(shù)3次，其中高值為（17 060、16 600、17 680），低值為（96、120、104）。按公式計(jì)算：Diasys的攜帶污染率為0.14%，

2.5 線性范圍檢測

Diasys和普利生細(xì)胞稀釋后線性其數(shù)據(jù)見表4、圖1。

3 討論

尿沉渣檢測是尿液分析的重要組成部分，被稱為“體外的腎活檢”[5]，對(duì)諸多疾患的臨床診斷、治療監(jiān)測及健康普查具有重要意義。因此，尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化是檢驗(yàn)工作迫切需要解決的問題。而標(biāo)準(zhǔn)化的首要就是分析過程的標(biāo)準(zhǔn)化，包括尿液的采集、使用儀器、檢查方法、判斷標(biāo)準(zhǔn)及報(bào)告結(jié)果的規(guī)范化[6]。Diasys R/S 2003和普利生尿沉渣分析儀均以××個(gè)/μL為報(bào)告方式，符合衛(wèi)生部“尿液沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化的建議”的要求[7]。精確的定量報(bào)告有利于動(dòng)態(tài)觀察疾病的發(fā)展和治療效果[8]。

由可比性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，Diasys尿沉渣分析儀和普利生尿沉渣分析儀均與牛鮑氏計(jì)數(shù)板有良好的相關(guān)性（r>r0.01），且相關(guān)有顯著性意義（P<0.01）。其中紅細(xì)胞的相關(guān)性Diasys尿沉渣分析儀（r=0.69）和普利生尿沉渣分析儀（r=0.73）兩者相近，而白細(xì)胞和管型的相關(guān)性Diasys尿沉渣分析儀（0.92、0.96）較普利生尿沉渣分析儀（0.78、0.71）好。可能由于Diasys尿沉渣分析儀背景顯像較清晰，對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)干擾較少有關(guān)。

由準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，普利生尿沉渣分析儀的平均準(zhǔn)確率（95.8%）優(yōu)于Diasys尿沉渣分析儀的平均準(zhǔn)確率（124.2%）。分析其原因，Diasys計(jì)數(shù)時(shí)只數(shù)1個(gè)大方格（0.25μL），再乘以4，若存在計(jì)數(shù)誤差，誤差就會(huì)增加4倍，而普利生尿沉渣分析儀則先在低倍鏡下瀏覽1μL的范圍，觀察標(biāo)本的分布情況，再用高倍計(jì)數(shù)，可減少偶然誤差。因此，要獲得良好的準(zhǔn)確性，應(yīng)在保證臨床檢測速度的同時(shí)，盡量增大計(jì)數(shù)容積。

由精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，Diasys尿沉渣分析儀和普利生尿沉渣分析儀均有良好的精密度。Diasys尿沉渣分析儀的低值、高值CV%分別為6.5%和6.2%，較普利生尿沉渣分析儀的3.6%和3.7%高。分析其原因?yàn)槠绽褂玫氖且淮涡詷?biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)板，沒有攜帶污染，而且計(jì)數(shù)區(qū)域在計(jì)數(shù)板上均勻分布，因而令精密度較佳。而Diasys尿沉渣分析儀的計(jì)數(shù)范圍一般局限在0.25μL內(nèi)，受充池的液體分布液體容積限制。

Diasys R/S 2003尿沉渣分析儀的沖洗、進(jìn)樣都是自動(dòng)化，而且在全密閉的空間里進(jìn)行，因而大大減少標(biāo)本污染工作人員和周圍環(huán)境幾率。由于Diasys尿沉渣分析儀在固定計(jì)數(shù)池上進(jìn)行檢測，計(jì)數(shù)板的重復(fù)使用，雖然節(jié)約了成本，但是必然會(huì)有一定的交叉污染，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示其攜帶污染率僅為0.14%，較為理想。但為了得到更好的檢測結(jié)果，應(yīng)在檢測標(biāo)本后及時(shí)沖洗，如尿液黏度較大，膿球較多時(shí)要多次沖洗，必要時(shí)可用5%次氯酸鈉浸泡以獲得良好的計(jì)數(shù)結(jié)果。

由線性檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，有形成分稀釋后Diasys尿沉渣分析儀和普利生尿沉渣分析儀都具有良好的線性。

另外，Diasys尿沉渣分析儀有自動(dòng)稀釋功能，稀釋倍數(shù)能自動(dòng)換算，自動(dòng)化程度較高，計(jì)數(shù)速度較快，但當(dāng)尿液標(biāo)本中細(xì)胞含量較多時(shí)需要儀器進(jìn)行自動(dòng)稀釋，多次稀釋會(huì)引入誤差，造成計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確[9]。普利生尿沉渣分析儀是使用一次性標(biāo)準(zhǔn)定量板，需人工加樣和稀釋，從而增加了計(jì)數(shù)成本和時(shí)間，但沒有攜帶污染，安全可靠。

綜上所述，Diasys R/S 2003[10]和普利生兩臺(tái)尿沉渣分析儀均符合NCCLS尿沉渣定量分析標(biāo)準(zhǔn)，具有準(zhǔn)確性較好、精密度高、操作簡便、安全可靠、污染少等優(yōu)點(diǎn)，檢測結(jié)果與臨床相符，但各有優(yōu)缺點(diǎn)。兩者都是目前比較理想的尿沉渣分析儀。

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（收稿日期：2014-01-26）