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        上海市寶山區(qū)2株疑似霍亂弧菌的鑒定及分析

        2014-07-19 04:44:53沈雋卿等
        上海預防醫(yī)學 2014年3期
        關(guān)鍵詞:霍亂弧菌寶山區(qū)毒力

        沈雋卿等

        霍亂是由O1群和O139群霍亂弧菌引起的急性腸道傳染病,是發(fā)病急、傳播快、波及面廣、危害嚴重的甲類傳染病。解放前,我國的霍亂主要由O1群古典生物型引起,1961年我國廣東省首次出現(xiàn)El Tor生物型霍亂流行1993年,在新疆局部地區(qū)發(fā)生O139血清霍亂。上海市寶山區(qū)從1962年開始流行霍亂,當年本地人口病例數(shù)59人,發(fā)病率為12/10萬;1978—1981年為發(fā)病高峰期,1980年發(fā)病率最高為15/10萬;1994年有1次大爆發(fā),病例數(shù)達到109人,隔年病例數(shù)即下降至12人;1996—2004年,處于霍亂低發(fā)時期,偶有散發(fā)病例,共檢出10例陽性;2005—2011年無本地病例檢出;2012年5月檢出1株O139群霍亂弧菌。同我國近10年來的霍亂流行特點基本符合,多為小范圍的爆發(fā)流行及散發(fā),多數(shù)爆發(fā)為衛(wèi)生條件較差的聚餐活動引起,同時出現(xiàn)了以稻葉型為高發(fā)流行優(yōu)勢菌的發(fā)展趨向和低發(fā)水平時O139霍亂病例所占比例較高的特點。

        1材料與方法

        1.1樣品來源

        2012年5月,于淞南社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心腸道門診腹瀉病人肛拭樣品中,檢測到1株O139群霍亂弧菌(編號為BS-25);2012年7月,華山醫(yī)院寶山分院送檢鑒定1株未知群的霍亂弧菌(編號為7933)。

        1.4病例基本情況

        BS-25株的患者為寶山區(qū)淞南街道居民,女。2012年 5月1日至崇明縣參加喜宴聚餐,除此之外無其他聚餐活動和不潔飲食史,并將從酒席上帶回的剩余油爆蝦放入冰箱中冷藏,5月5日晚取出油爆蝦加熱后食用,5月6日發(fā)病。大便性狀為黃色糊狀便,無腹痛、無嘔吐、無發(fā)熱等其他癥狀。

        7933株的患者為寶山區(qū)水產(chǎn)路某小區(qū)居民,女,入院做闌尾手術(shù)。2012年7月29日采集闌尾滲出液進行實驗室病原學檢測時檢出,臨床使用頭孢類抗生素后炎癥好轉(zhuǎn)。

        3討論

        3.1霍亂弧菌的鑒別

        3.1.1菌落形態(tài)O139群霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心不明顯,與O1群霍亂弧菌黑心較明顯不同。O77群疑似霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心明顯。O139群霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上中間略有凹陷、中間藍色,邊緣透明,O77群疑似霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上菌落微凸、中間藍綠色,邊緣透明,但不明顯,菌落比較大。

        3.1.2生化結(jié)果2例霍亂弧菌利用甘露糖、蔗糖、阿拉伯糖、淀粉結(jié)果都為“-、+、-、+”,氧化酶試驗陽性。BS-25株山梨醇遲發(fā)酵,表明是流行株,有毒力,和毒力基因試驗結(jié)果符合。7933株山梨醇快發(fā)酵,表明不是流行株。

        3.1.3常規(guī)熒光定量PCR結(jié)果和毒力基因檢測兩者常規(guī)PCR檢測霍亂弧菌核酸都為陽性,這與血清凝集試驗結(jié)果符合,都屬于霍亂弧菌屬。O139群霍亂弧菌ctx、zot、ace、tcp 4種常見毒力基因的核酸檢測都為陽性,與以上流行株結(jié)果相符合。有研究發(fā)現(xiàn),霍亂流行時期的O139群霍亂弧菌感染者分離株檢測的毒力相關(guān)基因為陽性,將毒力相關(guān)基因分型用于判斷和區(qū)分O139群霍亂弧菌的流行株與非流行株也是可行的\[5\]。而O77群霍亂弧菌毒力基因檢測都為陰性,表明無毒力,與非流行株的結(jié)果相符合。

        3.1.4藥敏試驗結(jié)果BS-25株有多重耐藥的現(xiàn)象,7933株對利福平中度敏感,提示這種抗菌藥物有耐藥的趨向,對其余的抗菌藥物則均為敏感。

        3.2加強監(jiān)測,及時發(fā)現(xiàn)疫情

        雖然非O1、O139群的霍亂弧菌通常不引起嚴重的腹瀉,且未列入法定傳染病,但是這類細菌在自然界中普遍存在,有時對人們的健康也造成了一定的危害,需要引起重視。而本株O139群霍亂弧菌的檢出,說明我區(qū)仍然有霍亂發(fā)病及流行的潛在危險,而且我區(qū)地處長江入???,海水和淡水交匯處,應做好各種水源中霍亂弧菌的監(jiān)測?;颊叽蠖嗍峭ㄟ^被污染的食品而感染,因此,必須搞好城鎮(zhèn)衛(wèi)生,加強疫情監(jiān)測。本次疫情發(fā)生后,我區(qū)疾病預防控制中心立即組織對全區(qū)醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)進行了霍亂弧菌知識及檢測的業(yè)務(wù)培訓,并加強對醫(yī)療機構(gòu)的日常指導和質(zhì)控,及時掌握流行動向。

        4參考文獻

        [1]羅朝成,謝一俊,張靜.霍亂流行態(tài)勢及我國霍亂防控中存在的問題\[J\].傳染病信息,2008,21(3):153-154.

        [2]燕勇,羅建勇,朱心強,等.霍亂及霍亂弧菌檢測技術(shù)研究進展\[J\].上海預防醫(yī)學,2012,24(8):459-462.

        [3]Singh DV, Sree Renjini Isac,Colwell RR. Development of a hexaplex PCR assay for rapid detection of virulence and regulatory genes in vibrio cholerae and vibrio mimicus\[J\]. J Clin Microbiol,2002,40(11):4321-4324.

        [4]古文鵬,伏曉慶,楊建斌,等.2011年云南省中緬邊境地區(qū)三起霍亂疫情菌株分子分型研究\[J\].中華預防醫(yī)學雜志,2012,46(6):573-574.

        [5]詹鑾峰,王曉萍,郭維植,等.霍亂弧菌毒力相關(guān)基因檢測分析\[J\].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2008,18(9):1727-1728.

        霍亂是由O1群和O139群霍亂弧菌引起的急性腸道傳染病,是發(fā)病急、傳播快、波及面廣、危害嚴重的甲類傳染病。解放前,我國的霍亂主要由O1群古典生物型引起,1961年我國廣東省首次出現(xiàn)El Tor生物型霍亂流行1993年,在新疆局部地區(qū)發(fā)生O139血清霍亂。上海市寶山區(qū)從1962年開始流行霍亂,當年本地人口病例數(shù)59人,發(fā)病率為12/10萬;1978—1981年為發(fā)病高峰期,1980年發(fā)病率最高為15/10萬;1994年有1次大爆發(fā),病例數(shù)達到109人,隔年病例數(shù)即下降至12人;1996—2004年,處于霍亂低發(fā)時期,偶有散發(fā)病例,共檢出10例陽性;2005—2011年無本地病例檢出;2012年5月檢出1株O139群霍亂弧菌。同我國近10年來的霍亂流行特點基本符合,多為小范圍的爆發(fā)流行及散發(fā),多數(shù)爆發(fā)為衛(wèi)生條件較差的聚餐活動引起,同時出現(xiàn)了以稻葉型為高發(fā)流行優(yōu)勢菌的發(fā)展趨向和低發(fā)水平時O139霍亂病例所占比例較高的特點。

        1材料與方法

        1.1樣品來源

        2012年5月,于淞南社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心腸道門診腹瀉病人肛拭樣品中,檢測到1株O139群霍亂弧菌(編號為BS-25);2012年7月,華山醫(yī)院寶山分院送檢鑒定1株未知群的霍亂弧菌(編號為7933)。

        1.4病例基本情況

        BS-25株的患者為寶山區(qū)淞南街道居民,女。2012年 5月1日至崇明縣參加喜宴聚餐,除此之外無其他聚餐活動和不潔飲食史,并將從酒席上帶回的剩余油爆蝦放入冰箱中冷藏,5月5日晚取出油爆蝦加熱后食用,5月6日發(fā)病。大便性狀為黃色糊狀便,無腹痛、無嘔吐、無發(fā)熱等其他癥狀。

        7933株的患者為寶山區(qū)水產(chǎn)路某小區(qū)居民,女,入院做闌尾手術(shù)。2012年7月29日采集闌尾滲出液進行實驗室病原學檢測時檢出,臨床使用頭孢類抗生素后炎癥好轉(zhuǎn)。

        3討論

        3.1霍亂弧菌的鑒別

        3.1.1菌落形態(tài)O139群霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心不明顯,與O1群霍亂弧菌黑心較明顯不同。O77群疑似霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心明顯。O139群霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上中間略有凹陷、中間藍色,邊緣透明,O77群疑似霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上菌落微凸、中間藍綠色,邊緣透明,但不明顯,菌落比較大。

        3.1.2生化結(jié)果2例霍亂弧菌利用甘露糖、蔗糖、阿拉伯糖、淀粉結(jié)果都為“-、+、-、+”,氧化酶試驗陽性。BS-25株山梨醇遲發(fā)酵,表明是流行株,有毒力,和毒力基因試驗結(jié)果符合。7933株山梨醇快發(fā)酵,表明不是流行株。

        3.1.3常規(guī)熒光定量PCR結(jié)果和毒力基因檢測兩者常規(guī)PCR檢測霍亂弧菌核酸都為陽性,這與血清凝集試驗結(jié)果符合,都屬于霍亂弧菌屬。O139群霍亂弧菌ctx、zot、ace、tcp 4種常見毒力基因的核酸檢測都為陽性,與以上流行株結(jié)果相符合。有研究發(fā)現(xiàn),霍亂流行時期的O139群霍亂弧菌感染者分離株檢測的毒力相關(guān)基因為陽性,將毒力相關(guān)基因分型用于判斷和區(qū)分O139群霍亂弧菌的流行株與非流行株也是可行的\[5\]。而O77群霍亂弧菌毒力基因檢測都為陰性,表明無毒力,與非流行株的結(jié)果相符合。

        3.1.4藥敏試驗結(jié)果BS-25株有多重耐藥的現(xiàn)象,7933株對利福平中度敏感,提示這種抗菌藥物有耐藥的趨向,對其余的抗菌藥物則均為敏感。

        3.2加強監(jiān)測,及時發(fā)現(xiàn)疫情

        雖然非O1、O139群的霍亂弧菌通常不引起嚴重的腹瀉,且未列入法定傳染病,但是這類細菌在自然界中普遍存在,有時對人們的健康也造成了一定的危害,需要引起重視。而本株O139群霍亂弧菌的檢出,說明我區(qū)仍然有霍亂發(fā)病及流行的潛在危險,而且我區(qū)地處長江入海口,海水和淡水交匯處,應做好各種水源中霍亂弧菌的監(jiān)測?;颊叽蠖嗍峭ㄟ^被污染的食品而感染,因此,必須搞好城鎮(zhèn)衛(wèi)生,加強疫情監(jiān)測。本次疫情發(fā)生后,我區(qū)疾病預防控制中心立即組織對全區(qū)醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)進行了霍亂弧菌知識及檢測的業(yè)務(wù)培訓,并加強對醫(yī)療機構(gòu)的日常指導和質(zhì)控,及時掌握流行動向。

        4參考文獻

        [1]羅朝成,謝一俊,張靜.霍亂流行態(tài)勢及我國霍亂防控中存在的問題\[J\].傳染病信息,2008,21(3):153-154.

        [2]燕勇,羅建勇,朱心強,等.霍亂及霍亂弧菌檢測技術(shù)研究進展\[J\].上海預防醫(yī)學,2012,24(8):459-462.

        [3]Singh DV, Sree Renjini Isac,Colwell RR. Development of a hexaplex PCR assay for rapid detection of virulence and regulatory genes in vibrio cholerae and vibrio mimicus\[J\]. J Clin Microbiol,2002,40(11):4321-4324.

        [4]古文鵬,伏曉慶,楊建斌,等.2011年云南省中緬邊境地區(qū)三起霍亂疫情菌株分子分型研究\[J\].中華預防醫(yī)學雜志,2012,46(6):573-574.

        [5]詹鑾峰,王曉萍,郭維植,等.霍亂弧菌毒力相關(guān)基因檢測分析\[J\].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2008,18(9):1727-1728.

        霍亂是由O1群和O139群霍亂弧菌引起的急性腸道傳染病,是發(fā)病急、傳播快、波及面廣、危害嚴重的甲類傳染病。解放前,我國的霍亂主要由O1群古典生物型引起,1961年我國廣東省首次出現(xiàn)El Tor生物型霍亂流行1993年,在新疆局部地區(qū)發(fā)生O139血清霍亂。上海市寶山區(qū)從1962年開始流行霍亂,當年本地人口病例數(shù)59人,發(fā)病率為12/10萬;1978—1981年為發(fā)病高峰期,1980年發(fā)病率最高為15/10萬;1994年有1次大爆發(fā),病例數(shù)達到109人,隔年病例數(shù)即下降至12人;1996—2004年,處于霍亂低發(fā)時期,偶有散發(fā)病例,共檢出10例陽性;2005—2011年無本地病例檢出;2012年5月檢出1株O139群霍亂弧菌。同我國近10年來的霍亂流行特點基本符合,多為小范圍的爆發(fā)流行及散發(fā),多數(shù)爆發(fā)為衛(wèi)生條件較差的聚餐活動引起,同時出現(xiàn)了以稻葉型為高發(fā)流行優(yōu)勢菌的發(fā)展趨向和低發(fā)水平時O139霍亂病例所占比例較高的特點。

        1材料與方法

        1.1樣品來源

        2012年5月,于淞南社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心腸道門診腹瀉病人肛拭樣品中,檢測到1株O139群霍亂弧菌(編號為BS-25);2012年7月,華山醫(yī)院寶山分院送檢鑒定1株未知群的霍亂弧菌(編號為7933)。

        1.4病例基本情況

        BS-25株的患者為寶山區(qū)淞南街道居民,女。2012年 5月1日至崇明縣參加喜宴聚餐,除此之外無其他聚餐活動和不潔飲食史,并將從酒席上帶回的剩余油爆蝦放入冰箱中冷藏,5月5日晚取出油爆蝦加熱后食用,5月6日發(fā)病。大便性狀為黃色糊狀便,無腹痛、無嘔吐、無發(fā)熱等其他癥狀。

        7933株的患者為寶山區(qū)水產(chǎn)路某小區(qū)居民,女,入院做闌尾手術(shù)。2012年7月29日采集闌尾滲出液進行實驗室病原學檢測時檢出,臨床使用頭孢類抗生素后炎癥好轉(zhuǎn)。

        3討論

        3.1霍亂弧菌的鑒別

        3.1.1菌落形態(tài)O139群霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心不明顯,與O1群霍亂弧菌黑心較明顯不同。O77群疑似霍亂弧菌在雙洗平板上半透明、扁平、黑心明顯。O139群霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上中間略有凹陷、中間藍色,邊緣透明,O77群疑似霍亂弧菌在弧菌顯色培養(yǎng)基上菌落微凸、中間藍綠色,邊緣透明,但不明顯,菌落比較大。

        3.1.2生化結(jié)果2例霍亂弧菌利用甘露糖、蔗糖、阿拉伯糖、淀粉結(jié)果都為“-、+、-、+”,氧化酶試驗陽性。BS-25株山梨醇遲發(fā)酵,表明是流行株,有毒力,和毒力基因試驗結(jié)果符合。7933株山梨醇快發(fā)酵,表明不是流行株。

        3.1.3常規(guī)熒光定量PCR結(jié)果和毒力基因檢測兩者常規(guī)PCR檢測霍亂弧菌核酸都為陽性,這與血清凝集試驗結(jié)果符合,都屬于霍亂弧菌屬。O139群霍亂弧菌ctx、zot、ace、tcp 4種常見毒力基因的核酸檢測都為陽性,與以上流行株結(jié)果相符合。有研究發(fā)現(xiàn),霍亂流行時期的O139群霍亂弧菌感染者分離株檢測的毒力相關(guān)基因為陽性,將毒力相關(guān)基因分型用于判斷和區(qū)分O139群霍亂弧菌的流行株與非流行株也是可行的\[5\]。而O77群霍亂弧菌毒力基因檢測都為陰性,表明無毒力,與非流行株的結(jié)果相符合。

        3.1.4藥敏試驗結(jié)果BS-25株有多重耐藥的現(xiàn)象,7933株對利福平中度敏感,提示這種抗菌藥物有耐藥的趨向,對其余的抗菌藥物則均為敏感。

        3.2加強監(jiān)測,及時發(fā)現(xiàn)疫情

        雖然非O1、O139群的霍亂弧菌通常不引起嚴重的腹瀉,且未列入法定傳染病,但是這類細菌在自然界中普遍存在,有時對人們的健康也造成了一定的危害,需要引起重視。而本株O139群霍亂弧菌的檢出,說明我區(qū)仍然有霍亂發(fā)病及流行的潛在危險,而且我區(qū)地處長江入??冢K偷粎R處,應做好各種水源中霍亂弧菌的監(jiān)測?;颊叽蠖嗍峭ㄟ^被污染的食品而感染,因此,必須搞好城鎮(zhèn)衛(wèi)生,加強疫情監(jiān)測。本次疫情發(fā)生后,我區(qū)疾病預防控制中心立即組織對全區(qū)醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)進行了霍亂弧菌知識及檢測的業(yè)務(wù)培訓,并加強對醫(yī)療機構(gòu)的日常指導和質(zhì)控,及時掌握流行動向。

        4參考文獻

        [1]羅朝成,謝一俊,張靜.霍亂流行態(tài)勢及我國霍亂防控中存在的問題\[J\].傳染病信息,2008,21(3):153-154.

        [2]燕勇,羅建勇,朱心強,等.霍亂及霍亂弧菌檢測技術(shù)研究進展\[J\].上海預防醫(yī)學,2012,24(8):459-462.

        [3]Singh DV, Sree Renjini Isac,Colwell RR. Development of a hexaplex PCR assay for rapid detection of virulence and regulatory genes in vibrio cholerae and vibrio mimicus\[J\]. J Clin Microbiol,2002,40(11):4321-4324.

        [4]古文鵬,伏曉慶,楊建斌,等.2011年云南省中緬邊境地區(qū)三起霍亂疫情菌株分子分型研究\[J\].中華預防醫(yī)學雜志,2012,46(6):573-574.

        [5]詹鑾峰,王曉萍,郭維植,等.霍亂弧菌毒力相關(guān)基因檢測分析\[J\].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2008,18(9):1727-1728.

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