魏明英

（四川工商職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川都江堰611830）

紅陽獼猴桃中VC含量測(cè)定方法研究

魏明英

（四川工商職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川都江堰611830）

采用2，6－二氯靛酚法和高效液相色譜法對(duì)紅陽獼猴桃中VC含量的測(cè)定進(jìn)行了研究。結(jié)果表明2，6－二氯靛酚法測(cè)定VC時(shí)滴定終點(diǎn)難以準(zhǔn)確判斷；高效液相色譜法對(duì)VC的測(cè)定精密度高，但準(zhǔn)確度低。

紅陽獼猴桃；VC；高效液相色譜法；2，6－二氯靛酚法

紅陽獼猴桃是世界珍惜獼猴桃品種，其果實(shí)子房鮮紅色，果肉呈黃綠色，橫切面呈紅、黃、綠相間圖案，極為美觀，具有刺激食欲的價(jià)值[1-2]；營養(yǎng)豐富，品質(zhì)優(yōu)良；肉質(zhì)細(xì)嫩，汁多味濃，純甜濃香，常食紅陽獼猴桃有防癌抗癌排毒養(yǎng)顏等保健功效。紅陽獼猴桃鮮食、加工均可，是加工工藝菜肴的上等原料，也是釀制高檔果酒、果醋，生產(chǎn)果汁和其他休閑食品的絕佳原料。目前，紅陽獼猴桃的消費(fèi)以貯藏鮮食為主，果酒、果片、果汁飲料的消費(fèi)量也日益增大。VC含量豐富是紅陽獼猴桃的特色之一，對(duì)紅陽獼猴桃VC含量的測(cè)定方法還少有報(bào)道。本研究采用2，6－二氯靛酚法和高效液相色譜法對(duì)紅陽獼猴桃VC含量的進(jìn)行測(cè)定，以得到更準(zhǔn)確的測(cè)定方法，為這種特色果品的研究、加工和貯藏提供有用的資料。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

紅陽獼猴桃：由成都青牛農(nóng)業(yè)有限公司提供；甲醇，色譜純；磷酸，分析純；還原性VC分析純；其余試驗(yàn)所用試劑均為分析純。

TB-215D型精密電子天平：北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司提供；1100型高效液相色譜儀配紫外檢測(cè)器：安捷倫科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 2，6－二氯靛酚法測(cè)定還原性VC

2，6－二氯靛酚法樣品預(yù)處理方法：稱取200 g紅陽獼猴桃加200mL濃度1%的草酸溶液，倒入搗碎機(jī)中打成漿，取20 g勻漿倒入100mL容量瓶中，用濃度1%草酸溶液稀釋定容，混勻，加入白陶土10 g混勻，進(jìn)行脫色，過濾，棄去初濾液，收集濾液以2，6－二氯靛酚法測(cè)定還原性VC含量[3]。

1.2.2 高效液相色譜法[4-6]

色譜條件：色譜柱，ODSC18250mm×4.6mm×5μm，紫外檢測(cè)器波長設(shè)定為240 nm，流動(dòng)相為濃度為pH 3.0，體積分?jǐn)?shù)30%甲醇溶液，用磷酸調(diào)節(jié)pH，流速為1.0mL/min，柱溫25℃；進(jìn)樣量25μL。

VC標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：稱取VC標(biāo)準(zhǔn)樣品0.1 g，用濃度0.001mol/L的鹽酸溶液溶解，并定容至100mL，此時(shí)VC的質(zhì)量濃度為1.0mg/mL，過濾脫氣后，備用。

標(biāo)準(zhǔn)VC系列溶液配制：取質(zhì)量濃度為1.0mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液用濃度0.001mol/L鹽酸溶液分別稀釋成質(zhì)量濃度為10、20、30、40、50μg/mL的系列溶液，過濾脫氣后，備用。

樣品處理：準(zhǔn)確稱取一定量樣品，加入0.001mol/L鹽酸溶液，搗碎，離心，取上清液，經(jīng)0.45μm濾膜過濾后，按上述色譜條件進(jìn)樣25μL，平行測(cè)定5次，以外標(biāo)法定量。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 2，6－二氯靛酚法測(cè)定還原性VC

還原性VC提取液顏色為紅色，以白陶土脫色后，顏色仍為淡粉紅色，其顏色與2，6－二氯靛酚法滴定終點(diǎn)的粉紅色無顯著差異，實(shí)驗(yàn)人員難以判斷滴定終點(diǎn)，因此該方法未得到紅陽獼猴桃還原性VC的含量。

2.2 高效液相色譜法測(cè)定紅陽獼猴桃還原性VC含量

2.2.1 色譜分析條件選擇

試驗(yàn)結(jié)果表明，用紫外檢測(cè)器，波長為240 nm；以pH3.0、體積分?jǐn)?shù)為30%的甲醇溶液為流動(dòng)相，獲得的還原性VC標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖效果較其余流動(dòng)相效果好；以濃度0.001mol/L的鹽酸為溶劑，質(zhì)量濃度50μg/mL還原性VC樣標(biāo)色譜見如圖1，紅陽獼猴桃VC高效液相色譜見圖2。

圖1 50μg/m L的VC標(biāo)樣色譜Fig.1 Chromatogram of VC

圖2 紅陽獼猴桃VC高效液相色譜圖Fig.2 Chromatogram of thesam ple

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

取質(zhì)量濃度為10、20、30、40、50μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別進(jìn)樣25μL液相色譜儀，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)吸收曲線。標(biāo)準(zhǔn)系列溶液濃度對(duì)峰面積結(jié)果見表1，高效液相色譜法VC的標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖3。

表1 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液質(zhì)量濃度對(duì)峰面積結(jié)果Tab le1 Resultof standard curveof VCby HPLC

2.2.3 紅陽獼猴桃VC測(cè)定

將紅陽獼猴桃VC提取液按上述色譜條件進(jìn)樣25μL，平行測(cè)定6次，以外標(biāo)法定量。紅陽獼猴桃VC測(cè)定結(jié)果見表2。

圖3 VC的標(biāo)準(zhǔn)吸收曲線Fig.3 The standard curveof VCby HPLC

表2 紅陽獼猴桃VC測(cè)定結(jié)果Table2 Resu ltof determ ination of VCin red sun kiw ifruits

2.2.4 紅陽獼猴桃VC回收率測(cè)定

紅陽獼猴桃VC高效液相色譜法回收率試驗(yàn)結(jié)果見表3。

表3 紅陽獼猴桃VC高效液相色譜法回收率試驗(yàn)結(jié)果Table3 Resultof recovery test

從回收率可以看出，高效液相色譜法測(cè)定VC時(shí)回收率較低。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)分別采用了2，6－二氯靛酚法和高效液相色譜法測(cè)量紅陽獼猴桃的VC含量，結(jié)果表明，2，6－二氯靛酚法因紅陽獼猴桃VC提取液顏色為粉紅色，采用白陶土對(duì)提取液進(jìn)行脫色處理后，提取液顏色仍為淺粉紅色，導(dǎo)致樣品提取液顏色和滴定終點(diǎn)顏色難以區(qū)分，使滴定終點(diǎn)難以準(zhǔn)確判斷；高效液相色譜法測(cè)定紅陽獼猴桃VC的結(jié)果是精密度高，但是回收率低。分析原因，由于紅陽獼猴桃是漿果，預(yù)處理超濾時(shí)速度極慢，與空氣接觸時(shí)間長，導(dǎo)致VC損失率高，使測(cè)定結(jié)果偏差大了。2，6－二氯靛酚法和高效液相色譜法在測(cè)定紅陽獼猴VC時(shí)都部分受限，無法準(zhǔn)確測(cè)定出VC的含量，但高效液相色譜法所得VC的測(cè)定條件能較準(zhǔn)確的測(cè)定非漿果類原料的VC。根據(jù)紅陽獼猴桃在采用2，6－二氯靛酚法和高效液相色譜法中呈現(xiàn)出的現(xiàn)象，可推測(cè)紅陽獼猴桃VC采用熒光分光光度法能較準(zhǔn)確地測(cè)定含量。

[1]呂巖.紅陽獼猴桃主要特點(diǎn)[J].西北園藝,2001(3):37-38

[2]珍惜品種—紅陽獼猴桃[J].世界農(nóng)業(yè),2003(2):52

[3]朱克永.食品檢測(cè)技術(shù)理化檢驗(yàn)感官檢驗(yàn)技術(shù)[M].北京:科學(xué)出版社,2011

[4]張秀梅.高效液相色譜法測(cè)定菠蘿果實(shí)維生素C含量[J].福建果樹,2007,140(1):20-22

[5]黃力,張寶川.HPLC法測(cè)定多維片中的水溶性維生素[J].中國藥事,2007,21(4):255-257

[6]王愛月,張向兵,李發(fā)生.高效液相色譜法測(cè)定食品及保健品中維生素C含量的研究[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2006,16(10):1175-1176

Determ ination of VCin Red Sun Kiw ifruit by HPLC and M ethylene Chloride Indigo Phenolic Spectrometry

WEIMing-ying

（College of Sichuan Technology and Business，Dujiangyan 611830，Sichuan，China）

Determination of VCin red sun kiwifruit by HPLC and methylene chloride Indigo phenolic spectrometry.The resultshowed thatend-pointof titration is difficult to be judge，bymethylene chloride Indigo phenolic spectrometry.The project team can't obtain The accurate result.The precision of HPLC is high，but accuracy isLow.

red sun kiwifruit；VC；HPLC；methylene chloride Indigo phenolic spectrometry

2014-03-17

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.23.031

魏明英（1979—），女（漢），副教授，碩士研究生，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程。