黃洋

高效液相色譜法測定諾氟沙星膠囊含量結(jié)果的比較

黃洋

利用HPLC法測定諾氟沙星含量, 通過對12個廠家15個批次的藥品試驗(yàn), 結(jié)果證明HPLC 法不僅操作簡便, 而且結(jié)果精準(zhǔn)可靠。

高效液相色譜法；諾氟沙星；含量測定

諾氟沙星(C16H18FN3O3)屬于氟喹諾酮類抗菌藥, 具廣譜抗菌藥效, 特別是對需氧革蘭陰性桿菌具有非常高的抗菌活性, 如綠膿桿菌、大腸桿菌有較強(qiáng)殺菌作用, 對體外多重耐藥菌也具有非常好的抗菌活性, 而且細(xì)菌對本品也不易產(chǎn)生耐藥性。在臨床上 具有很好的應(yīng)用價值, 常用劑型主要為膠囊劑, 是治療泌尿系統(tǒng)、胃腸道系統(tǒng)細(xì)菌感染等疾病的首選藥物。截至目前, 對其含量的測量方法有很多種, 包括非水滴定法、高效液相色譜法、 紫外分光光度法、荷移分光光度法 , 本文主要介紹的是高效液相色譜法測量諾氟沙星膠囊含量, 并將不同廠家及批次的含量測定結(jié)果相比較, 為臨床用藥提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

日立L-2000型液相色譜儀, 紫外檢測器。對照品：諾氟沙星、環(huán)丙沙星、依諾沙星, 均來自中國生物制品檢定院。試藥：乙腈(色譜級), 其它試藥為分析純, 水為重蒸餾水。

2 色譜條件

色譜柱：C18, 流動相：0.025 mol/L磷酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.0)-乙腈(87：13), 本實(shí)驗(yàn)流動相中三乙胺看似作用是調(diào)節(jié)pH, 其實(shí)際最大作用是調(diào)整峰型, 因?yàn)橹Z氟沙星有含氮極性基團(tuán), 在酸性環(huán)境中容易與色譜柱中的硅羥基產(chǎn)生靜電作用而拖尾, 而三乙胺可以代替物質(zhì)與硅羥基作用,保證了物質(zhì)的峰型。檢測波長：278 nm, 柱溫：25℃, 流速1.0 ml/min, 進(jìn)樣量20 μl, 按外標(biāo)法以峰面積計算。

3 溶液制備

系統(tǒng)適用性溶液的制備：精密稱取諾氟沙星、環(huán)丙沙星、依諾沙星對照品加0.1 mol/L鹽酸溶液溶解, 用流動相稀釋制成含諾氟沙星25 μg/ml、環(huán)丙沙星5 μg/ml、依諾沙星5 μg/ml的混合溶液。諾氟沙星峰的保留時間約為9 min。諾氟沙星峰與環(huán)丙沙星峰和諾氟沙星峰與依諾沙星峰的分離度均應(yīng)大于2.0(均符合規(guī)定)。

對照品溶液的制備：取諾氟沙星對照品約25 mg, 精密稱定, 置100 ml量瓶中, 加0.1 mol/L鹽酸溶液2 ml使溶解后,用水稀釋至刻度, 搖勻, 精密量取5 ml, 置50 ml量瓶中, 用流動相稀釋至刻度, 搖勻。

供試品溶液的制備：取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物, 混合均勻, 稱取, 置500 ml量瓶中, 加0.1 mol/L鹽酸溶液10 ml使溶解后, 用水稀釋至刻度, 搖勻, 濾過, 精密量取續(xù)濾液5 ml,置50 ml量瓶中, 用流動相稀釋至刻度, 搖勻。

4 結(jié)果

表1高效液相色譜法測定各廠家諾氟沙星膠囊含量結(jié)果的比較［n (%)］

圖1 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液譜圖

圖2 對照品溶液譜圖

圖3 供試品溶液譜圖

5 討論

以上試驗(yàn)均按照2010年版藥典二部標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn), 經(jīng)過對12個廠家15個批次的藥品試驗(yàn), 結(jié)果證明HPLC 法不僅操作簡便, 而且結(jié)果精準(zhǔn)可靠, 諾氟沙星含量在(91.5%～105.8%)均符合規(guī)定, 對諾氟沙星的生產(chǎn)提供強(qiáng)有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù), 并對其質(zhì)量進(jìn)行有效控制, 為諾氟沙星的臨床使用營造良好環(huán)境。

121000 錦州市食品藥品檢驗(yàn)所