張劍等
摘要:用紫外分光光度法測(cè)定烏藥中的總生物堿含量。先用索氏提取法提取烏藥中的總生物堿,再以小檗堿為對(duì)照品,在pH值為4.5的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液中,以溴甲酚綠指示液為顯色劑,在628 nm波長(zhǎng)下利用分光光度法測(cè)定烏藥中的總生物堿含量。結(jié)果表明,小檗堿對(duì)照品在2.0~12.0 mg/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系,回歸方程為D=0.008 2C+0167 1,r=0.999 1,烏藥中的總生物堿含量為0.301 4%。本方法操作簡(jiǎn)便、迅速,測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。
關(guān)鍵詞:烏藥;總生物堿;分光光度法
中圖分類號(hào):R284.1;O657.32 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1002-1302(2014)03-0266-02
烏藥[Lindera aggregata (Sims)Kosterm]系樟科(Lauraceae)山胡椒屬(Lindera)植物,為傳統(tǒng)的理氣止痛藥[1],具有溫中散寒、理氣止痛的功效,最早記載于唐代陳藏器《本草拾遺》?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,烏藥具有廣泛的藥理活性[2-3]。烏藥根的主要有效成分為異喹啉類生物堿及呋喃倍半萜[4],其中生物堿和呋喃倍半萜及其內(nèi)酯類成分是烏藥的特征性成分[5-7],具有較強(qiáng)的專屬性,也具有一定的活性。為了確保烏藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)有具體的量化指標(biāo),根據(jù)烏藥中所含成分的特點(diǎn),本研究采用酸性染料比色法測(cè)定烏藥中的生物堿含量。
1 材料與方法
1.1 儀器與材料
主要儀器:紫外可見分光光度計(jì)(尤尼柯UV-4802);98-1-C數(shù)顯控溫電熱套(天津泰斯特);索式提取器;電子天平;三氯甲烷(AR);溴甲酚綠(AR);小檗堿標(biāo)準(zhǔn)品(成都領(lǐng)航者生物技術(shù)有限公司);pH值45的醋酸-醋酸鈉緩沖液;0.01 mol/L氫氧化鈉溶液(用乙醇溶解)。
試驗(yàn)所用中藥材烏藥樣品采自江西贛南。
1.2 試驗(yàn)方法
本研究所用試驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)[8-10]的方法并加以改進(jìn)。
1.2.1 緩沖液的配制 pH值4.5緩沖液的配制:將 0.2 mol/L 氫氧化鈉滴加至冰醋酸中,調(diào)節(jié)pH值為45,即得醋酸-醋酸鈉緩沖溶液。0.04%溴甲酚綠溶液的配制:稱取40 mg溴甲酚綠,加100 mL pH值為4.5的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液溶解,過濾。
1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 稱取2 mg干燥至恒重的小檗堿對(duì)照品于100 mL容量瓶中,用三氯甲烷定容至100 mL,搖勻。分別取1.2、2.4、3.6、4.8、6.0、7.2 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液于 20 mL 量瓶中,用三氯甲烷稀釋至10 mL,分別加入5.0 mL pH值為45的緩沖液、2.0 mL 0.04%溴甲酚綠溶液,劇烈振搖5 min后靜置30 min。取5 mL下層液體,加入1.0 mL 0.01 mol/L 氫氧化鈉乙醇溶液,搖勻后于628 nm處測(cè)吸光度。以小檗堿含量(C)為橫坐標(biāo),吸光度(D)為縱坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程。
1.2.3 空白溶液的制備 取10 mL三氯甲烷溶液于20 mL容量瓶中,分別加入5.0 mL緩沖液(pH值4.5)、2 mL 004%溴甲酚綠溶液,劇烈搖動(dòng)5 min后靜置30 min。取 5 mL 下層液,加入1.0 mL 0.01 mol/L氫氧化鈉乙醇溶液搖勻,作為空白溶液。
1.2.4 烏藥中總生物堿的提取 準(zhǔn)確稱取0.5 g烏藥,用適量氨水濕潤后密封放置30 min,索式提取2 h后將提取液置于TLC(薄層色譜),滴加碘化鉍鉀溶液至不顯色為止;回收三氯甲烷,將殘留物放冷至室溫,再用三氯甲烷溶解并定容至20 mL。分別取 0.2 mL 提取物于量瓶中,加三氯甲烷定容至10 mL,混勻作為樣品液。分別取10 mL樣品液于3個(gè)20 mL容量瓶中,再分別加入5.0 mL緩沖液(pH值4.5)和2 mL 004%溴甲酚綠溶液,劇烈搖動(dòng)5 min后靜置30 min;取5 mL下層液,加 1.0 mL 0.01 mol/L氫氧化鈉乙醇溶液,搖勻后于628 nm處測(cè)定吸光度,計(jì)算生物堿含量與回收率,回收率計(jì)算公式為:
3 結(jié)論
本研究采用酸性染料比色法測(cè)定烏藥中的總生物堿含量,其原理是生物堿鹽的陽離子與酸性染料的陰離子定量結(jié)合生成有色的絡(luò)合物,可以定量地被某種有機(jī)溶劑萃取,因此通過測(cè)定萃取液的吸光度可以測(cè)定藥材中總生物堿含量。在本試驗(yàn)中采用的生物堿的酸性染料為溴甲酚綠。同時(shí)考察了本方法的線性范圍、穩(wěn)定性、精密度、回收率,結(jié)果表明本方法符合紫外可見分光光度法的測(cè)試條件,可以作為烏藥中總生物堿含量的測(cè)試方法。
生物堿大多具有復(fù)雜的環(huán)狀結(jié)構(gòu),具有顯著的生物活性,是烏藥中重要的有效成分。本試驗(yàn)測(cè)得烏藥中總生物堿含量為0.301 4%(n=3)。本試驗(yàn)建立的烏藥中總生物堿含量的測(cè)試方法可以為烏藥種源質(zhì)量的篩選提供試驗(yàn)方法和參考依據(jù)。
參考文獻(xiàn):
[1]肖培根. 新編中藥志[M]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2002:230.
[2]國家藥典委員會(huì). 中華人民共和國藥典:一部[S]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:53.
[3]中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所.中藥志:第二冊(cè)[M]. 北京:人民衛(wèi)生出版社,1981:926.
[4]程顯隆,魏 鋒,馮玉飛,等. RP-HPLC法測(cè)定烏藥中烏藥醚內(nèi)酯和烏藥內(nèi)酯的含量[J]. 藥物分析雜志,2003,23(3):225-227.
[5]許海丹,顧霞敏,葉文國. 烏藥化學(xué)成分的分布特性研究[J]. 時(shí)珍國醫(yī)國藥,2010,21(1):100-101.
[6]Han Z,Zheng Y,Chen N,et al. Simultaneous determination of four alkaloids in Lindera aggregata by ultra-high-pressure liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A,2008,1212(1/2):76-81.
[7]Gan L S,Yao W,Mo J X,et al. Alkaloids from Lindera aggregata[J]. Natural Product Communications,2009,4(1):43-46.
[8]蔣愛芳,楊義芳,黃文武. 酸性染料比色法測(cè)定總生物堿的研究進(jìn)展[J]. 中草藥,2006,37(增刊):359-362.
[9]蔡大可,李 耿,彭紹忠,等. 酸性染料比色法測(cè)定痹痛消膏中烏頭生物堿的含量[J]. 中藥新藥與臨床藥理,2007,18(1):57-59.
[10]敖茂宏,劉 海,吳明開. 酸性染料比色法測(cè)定不同產(chǎn)地流蘇石斛中總生物堿的含量[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(10):282-283.endprint
摘要:用紫外分光光度法測(cè)定烏藥中的總生物堿含量。先用索氏提取法提取烏藥中的總生物堿,再以小檗堿為對(duì)照品,在pH值為4.5的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液中,以溴甲酚綠指示液為顯色劑,在628 nm波長(zhǎng)下利用分光光度法測(cè)定烏藥中的總生物堿含量。結(jié)果表明,小檗堿對(duì)照品在2.0~12.0 mg/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系,回歸方程為D=0.008 2C+0167 1,r=0.999 1,烏藥中的總生物堿含量為0.301 4%。本方法操作簡(jiǎn)便、迅速,測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。
關(guān)鍵詞:烏藥;總生物堿;分光光度法
中圖分類號(hào):R284.1;O657.32 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1002-1302(2014)03-0266-02
烏藥[Lindera aggregata (Sims)Kosterm]系樟科(Lauraceae)山胡椒屬(Lindera)植物,為傳統(tǒng)的理氣止痛藥[1],具有溫中散寒、理氣止痛的功效,最早記載于唐代陳藏器《本草拾遺》?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,烏藥具有廣泛的藥理活性[2-3]。烏藥根的主要有效成分為異喹啉類生物堿及呋喃倍半萜[4],其中生物堿和呋喃倍半萜及其內(nèi)酯類成分是烏藥的特征性成分[5-7],具有較強(qiáng)的專屬性,也具有一定的活性。為了確保烏藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)有具體的量化指標(biāo),根據(jù)烏藥中所含成分的特點(diǎn),本研究采用酸性染料比色法測(cè)定烏藥中的生物堿含量。
1 材料與方法
1.1 儀器與材料
主要儀器:紫外可見分光光度計(jì)(尤尼柯UV-4802);98-1-C數(shù)顯控溫電熱套(天津泰斯特);索式提取器;電子天平;三氯甲烷(AR);溴甲酚綠(AR);小檗堿標(biāo)準(zhǔn)品(成都領(lǐng)航者生物技術(shù)有限公司);pH值45的醋酸-醋酸鈉緩沖液;0.01 mol/L氫氧化鈉溶液(用乙醇溶解)。
試驗(yàn)所用中藥材烏藥樣品采自江西贛南。
1.2 試驗(yàn)方法
本研究所用試驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)[8-10]的方法并加以改進(jìn)。
1.2.1 緩沖液的配制 pH值4.5緩沖液的配制:將 0.2 mol/L 氫氧化鈉滴加至冰醋酸中,調(diào)節(jié)pH值為45,即得醋酸-醋酸鈉緩沖溶液。0.04%溴甲酚綠溶液的配制:稱取40 mg溴甲酚綠,加100 mL pH值為4.5的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液溶解,過濾。
1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 稱取2 mg干燥至恒重的小檗堿對(duì)照品于100 mL容量瓶中,用三氯甲烷定容至100 mL,搖勻。分別取1.2、2.4、3.6、4.8、6.0、7.2 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液于 20 mL 量瓶中,用三氯甲烷稀釋至10 mL,分別加入5.0 mL pH值為45的緩沖液、2.0 mL 0.04%溴甲酚綠溶液,劇烈振搖5 min后靜置30 min。取5 mL下層液體,加入1.0 mL 0.01 mol/L 氫氧化鈉乙醇溶液,搖勻后于628 nm處測(cè)吸光度。以小檗堿含量(C)為橫坐標(biāo),吸光度(D)為縱坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程。
1.2.3 空白溶液的制備 取10 mL三氯甲烷溶液于20 mL容量瓶中,分別加入5.0 mL緩沖液(pH值4.5)、2 mL 004%溴甲酚綠溶液,劇烈搖動(dòng)5 min后靜置30 min。取 5 mL 下層液,加入1.0 mL 0.01 mol/L氫氧化鈉乙醇溶液搖勻,作為空白溶液。
1.2.4 烏藥中總生物堿的提取 準(zhǔn)確稱取0.5 g烏藥,用適量氨水濕潤后密封放置30 min,索式提取2 h后將提取液置于TLC(薄層色譜),滴加碘化鉍鉀溶液至不顯色為止;回收三氯甲烷,將殘留物放冷至室溫,再用三氯甲烷溶解并定容至20 mL。分別取 0.2 mL 提取物于量瓶中,加三氯甲烷定容至10 mL,混勻作為樣品液。分別取10 mL樣品液于3個(gè)20 mL容量瓶中,再分別加入5.0 mL緩沖液(pH值4.5)和2 mL 004%溴甲酚綠溶液,劇烈搖動(dòng)5 min后靜置30 min;取5 mL下層液,加 1.0 mL 0.01 mol/L氫氧化鈉乙醇溶液,搖勻后于628 nm處測(cè)定吸光度,計(jì)算生物堿含量與回收率,回收率計(jì)算公式為:
3 結(jié)論
本研究采用酸性染料比色法測(cè)定烏藥中的總生物堿含量,其原理是生物堿鹽的陽離子與酸性染料的陰離子定量結(jié)合生成有色的絡(luò)合物,可以定量地被某種有機(jī)溶劑萃取,因此通過測(cè)定萃取液的吸光度可以測(cè)定藥材中總生物堿含量。在本試驗(yàn)中采用的生物堿的酸性染料為溴甲酚綠。同時(shí)考察了本方法的線性范圍、穩(wěn)定性、精密度、回收率,結(jié)果表明本方法符合紫外可見分光光度法的測(cè)試條件,可以作為烏藥中總生物堿含量的測(cè)試方法。
生物堿大多具有復(fù)雜的環(huán)狀結(jié)構(gòu),具有顯著的生物活性,是烏藥中重要的有效成分。本試驗(yàn)測(cè)得烏藥中總生物堿含量為0.301 4%(n=3)。本試驗(yàn)建立的烏藥中總生物堿含量的測(cè)試方法可以為烏藥種源質(zhì)量的篩選提供試驗(yàn)方法和參考依據(jù)。
參考文獻(xiàn):
[1]肖培根. 新編中藥志[M]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2002:230.
[2]國家藥典委員會(huì). 中華人民共和國藥典:一部[S]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:53.
[3]中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所.中藥志:第二冊(cè)[M]. 北京:人民衛(wèi)生出版社,1981:926.
[4]程顯隆,魏 鋒,馮玉飛,等. RP-HPLC法測(cè)定烏藥中烏藥醚內(nèi)酯和烏藥內(nèi)酯的含量[J]. 藥物分析雜志,2003,23(3):225-227.
[5]許海丹,顧霞敏,葉文國. 烏藥化學(xué)成分的分布特性研究[J]. 時(shí)珍國醫(yī)國藥,2010,21(1):100-101.
[6]Han Z,Zheng Y,Chen N,et al. Simultaneous determination of four alkaloids in Lindera aggregata by ultra-high-pressure liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A,2008,1212(1/2):76-81.
[7]Gan L S,Yao W,Mo J X,et al. Alkaloids from Lindera aggregata[J]. Natural Product Communications,2009,4(1):43-46.
[8]蔣愛芳,楊義芳,黃文武. 酸性染料比色法測(cè)定總生物堿的研究進(jìn)展[J]. 中草藥,2006,37(增刊):359-362.
[9]蔡大可,李 耿,彭紹忠,等. 酸性染料比色法測(cè)定痹痛消膏中烏頭生物堿的含量[J]. 中藥新藥與臨床藥理,2007,18(1):57-59.
[10]敖茂宏,劉 海,吳明開. 酸性染料比色法測(cè)定不同產(chǎn)地流蘇石斛中總生物堿的含量[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(10):282-283.endprint
摘要:用紫外分光光度法測(cè)定烏藥中的總生物堿含量。先用索氏提取法提取烏藥中的總生物堿,再以小檗堿為對(duì)照品,在pH值為4.5的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液中,以溴甲酚綠指示液為顯色劑,在628 nm波長(zhǎng)下利用分光光度法測(cè)定烏藥中的總生物堿含量。結(jié)果表明,小檗堿對(duì)照品在2.0~12.0 mg/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系,回歸方程為D=0.008 2C+0167 1,r=0.999 1,烏藥中的總生物堿含量為0.301 4%。本方法操作簡(jiǎn)便、迅速,測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。
關(guān)鍵詞:烏藥;總生物堿;分光光度法
中圖分類號(hào):R284.1;O657.32 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1002-1302(2014)03-0266-02
烏藥[Lindera aggregata (Sims)Kosterm]系樟科(Lauraceae)山胡椒屬(Lindera)植物,為傳統(tǒng)的理氣止痛藥[1],具有溫中散寒、理氣止痛的功效,最早記載于唐代陳藏器《本草拾遺》?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,烏藥具有廣泛的藥理活性[2-3]。烏藥根的主要有效成分為異喹啉類生物堿及呋喃倍半萜[4],其中生物堿和呋喃倍半萜及其內(nèi)酯類成分是烏藥的特征性成分[5-7],具有較強(qiáng)的專屬性,也具有一定的活性。為了確保烏藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)有具體的量化指標(biāo),根據(jù)烏藥中所含成分的特點(diǎn),本研究采用酸性染料比色法測(cè)定烏藥中的生物堿含量。
1 材料與方法
1.1 儀器與材料
主要儀器:紫外可見分光光度計(jì)(尤尼柯UV-4802);98-1-C數(shù)顯控溫電熱套(天津泰斯特);索式提取器;電子天平;三氯甲烷(AR);溴甲酚綠(AR);小檗堿標(biāo)準(zhǔn)品(成都領(lǐng)航者生物技術(shù)有限公司);pH值45的醋酸-醋酸鈉緩沖液;0.01 mol/L氫氧化鈉溶液(用乙醇溶解)。
試驗(yàn)所用中藥材烏藥樣品采自江西贛南。
1.2 試驗(yàn)方法
本研究所用試驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)[8-10]的方法并加以改進(jìn)。
1.2.1 緩沖液的配制 pH值4.5緩沖液的配制:將 0.2 mol/L 氫氧化鈉滴加至冰醋酸中,調(diào)節(jié)pH值為45,即得醋酸-醋酸鈉緩沖溶液。0.04%溴甲酚綠溶液的配制:稱取40 mg溴甲酚綠,加100 mL pH值為4.5的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液溶解,過濾。
1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 稱取2 mg干燥至恒重的小檗堿對(duì)照品于100 mL容量瓶中,用三氯甲烷定容至100 mL,搖勻。分別取1.2、2.4、3.6、4.8、6.0、7.2 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液于 20 mL 量瓶中,用三氯甲烷稀釋至10 mL,分別加入5.0 mL pH值為45的緩沖液、2.0 mL 0.04%溴甲酚綠溶液,劇烈振搖5 min后靜置30 min。取5 mL下層液體,加入1.0 mL 0.01 mol/L 氫氧化鈉乙醇溶液,搖勻后于628 nm處測(cè)吸光度。以小檗堿含量(C)為橫坐標(biāo),吸光度(D)為縱坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程。
1.2.3 空白溶液的制備 取10 mL三氯甲烷溶液于20 mL容量瓶中,分別加入5.0 mL緩沖液(pH值4.5)、2 mL 004%溴甲酚綠溶液,劇烈搖動(dòng)5 min后靜置30 min。取 5 mL 下層液,加入1.0 mL 0.01 mol/L氫氧化鈉乙醇溶液搖勻,作為空白溶液。
1.2.4 烏藥中總生物堿的提取 準(zhǔn)確稱取0.5 g烏藥,用適量氨水濕潤后密封放置30 min,索式提取2 h后將提取液置于TLC(薄層色譜),滴加碘化鉍鉀溶液至不顯色為止;回收三氯甲烷,將殘留物放冷至室溫,再用三氯甲烷溶解并定容至20 mL。分別取 0.2 mL 提取物于量瓶中,加三氯甲烷定容至10 mL,混勻作為樣品液。分別取10 mL樣品液于3個(gè)20 mL容量瓶中,再分別加入5.0 mL緩沖液(pH值4.5)和2 mL 004%溴甲酚綠溶液,劇烈搖動(dòng)5 min后靜置30 min;取5 mL下層液,加 1.0 mL 0.01 mol/L氫氧化鈉乙醇溶液,搖勻后于628 nm處測(cè)定吸光度,計(jì)算生物堿含量與回收率,回收率計(jì)算公式為:
3 結(jié)論
本研究采用酸性染料比色法測(cè)定烏藥中的總生物堿含量,其原理是生物堿鹽的陽離子與酸性染料的陰離子定量結(jié)合生成有色的絡(luò)合物,可以定量地被某種有機(jī)溶劑萃取,因此通過測(cè)定萃取液的吸光度可以測(cè)定藥材中總生物堿含量。在本試驗(yàn)中采用的生物堿的酸性染料為溴甲酚綠。同時(shí)考察了本方法的線性范圍、穩(wěn)定性、精密度、回收率,結(jié)果表明本方法符合紫外可見分光光度法的測(cè)試條件,可以作為烏藥中總生物堿含量的測(cè)試方法。
生物堿大多具有復(fù)雜的環(huán)狀結(jié)構(gòu),具有顯著的生物活性,是烏藥中重要的有效成分。本試驗(yàn)測(cè)得烏藥中總生物堿含量為0.301 4%(n=3)。本試驗(yàn)建立的烏藥中總生物堿含量的測(cè)試方法可以為烏藥種源質(zhì)量的篩選提供試驗(yàn)方法和參考依據(jù)。
參考文獻(xiàn):
[1]肖培根. 新編中藥志[M]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2002:230.
[2]國家藥典委員會(huì). 中華人民共和國藥典:一部[S]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:53.
[3]中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所.中藥志:第二冊(cè)[M]. 北京:人民衛(wèi)生出版社,1981:926.
[4]程顯隆,魏 鋒,馮玉飛,等. RP-HPLC法測(cè)定烏藥中烏藥醚內(nèi)酯和烏藥內(nèi)酯的含量[J]. 藥物分析雜志,2003,23(3):225-227.
[5]許海丹,顧霞敏,葉文國. 烏藥化學(xué)成分的分布特性研究[J]. 時(shí)珍國醫(yī)國藥,2010,21(1):100-101.
[6]Han Z,Zheng Y,Chen N,et al. Simultaneous determination of four alkaloids in Lindera aggregata by ultra-high-pressure liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A,2008,1212(1/2):76-81.
[7]Gan L S,Yao W,Mo J X,et al. Alkaloids from Lindera aggregata[J]. Natural Product Communications,2009,4(1):43-46.
[8]蔣愛芳,楊義芳,黃文武. 酸性染料比色法測(cè)定總生物堿的研究進(jìn)展[J]. 中草藥,2006,37(增刊):359-362.
[9]蔡大可,李 耿,彭紹忠,等. 酸性染料比色法測(cè)定痹痛消膏中烏頭生物堿的含量[J]. 中藥新藥與臨床藥理,2007,18(1):57-59.
[10]敖茂宏,劉 海,吳明開. 酸性染料比色法測(cè)定不同產(chǎn)地流蘇石斛中總生物堿的含量[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(10):282-283.endprint