郭明全等

摘要：以四川省13個植煙縣159份烤煙樣品有機(jī)酸含量為研究對象，采用多重比較、聚類分析、灰色關(guān)聯(lián)度分析等方法，研究了不同部位、品種、海拔高度與煙葉有機(jī)酸含量之間的關(guān)系，結(jié)果表明：四川省煙葉有機(jī)酸各指標(biāo)變異系數(shù)均較大，異檸檬酸變異系數(shù)最大，不飽和脂肪的變異系數(shù)相對較小，蘋果酸在有機(jī)酸中所占比例最大；不同部位煙葉非揮發(fā)性有機(jī)酸含量表現(xiàn)為中部<上部<下部，飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、有機(jī)酸總量，隨著部位的上升逐漸下降；不同品種烤煙非揮發(fā)酸、高級脂肪酸、有機(jī)酸總量表現(xiàn)為云煙97>紅大>云煙87>云煙85；植煙海拔高度與二十酸的關(guān)聯(lián)度最大，煙葉有機(jī)酸含量表現(xiàn)為低海拔>高海拔>中海拔，丙二酸、油酸、亞麻酸在高、中、低海拔間差異達(dá)到1%水平的極顯著差異，乙二酸、富馬酸隨海拔高度的升高呈先升高再降低趨勢，丙二酸、Y-戊酮酸含量隨海拔升高逐漸降低，其他有機(jī)酸指標(biāo)與植煙海拔高度變化規(guī)律不顯著。

關(guān)鍵詞：烤煙；品種；海拔；非揮發(fā)酸；高級脂肪酸

中圖分類號： S572.01；TS41+1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）03-0280-03

煙草中的有機(jī)酸主要是指除氨基酸以外的有機(jī)酸[1]，其種類繁多，含量差異大，大部分與堿金屬或有機(jī)堿結(jié)合成鹽或以酯類的形式存在[2]。煙葉中有機(jī)酸含量為12%～16%，其中非揮發(fā)性有機(jī)酸占煙葉重量的5%～10%。煙草中有機(jī)酸的種類和含量直接影響著卷煙的吸味品質(zhì)。非揮發(fā)性有機(jī)酸以草酸、蘋果酸及檸檬酸為主，對抽吸品質(zhì)有重要影響，它們能與生物堿結(jié)合成鹽，調(diào)節(jié)煙氣pH值，在燃燒過程中，有機(jī)酸分解產(chǎn)生的酸陛片段可調(diào)節(jié)煙氣中質(zhì)子化和游離態(tài)煙堿的比例，從而極大地影響煙葉的勁頭和吃味[3-5]。本研究通過對四川省不同部位、海拔、品種煙葉的有機(jī)酸含量進(jìn)行分析評價，以期找出影響有機(jī)酸含量的因素，為煙葉生產(chǎn)和工業(yè)葉組配方使用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

2012年，在四川省涼山州寧南縣、德昌縣、普格縣、會理縣、會東縣、鹽源縣、冕寧縣、喜德縣、西昌縣、越西縣，攀枝花市米易縣、仁和縣，瀘州市敘永縣13個植煙縣的53個監(jiān)測點(diǎn)，分上（14～16葉位）、中（8～12葉位）、下（4～6葉位）3個部位抽取初烤煙葉樣品共計(jì)159份，每份樣品1.5 kg。其中各部位紅大品種煙葉樣品12份，云煙85品種煙葉樣品20份，云煙87品種煙葉樣品12份，云煙97品種煙葉樣品9份。海拔高度變化在1 101～2 400 m之間。

1.2 測定方法

分別稱取過40目煙末1 g放入干凈的100 mL反應(yīng)瓶中，加入500 μL內(nèi)標(biāo)（月桂酸）和25 mL硫酸甲醇溶液，搖勻，置于60 ℃水浴鍋中回流2 h進(jìn)行甲酯化反應(yīng)，然后用濾紙過濾到盛50 mL蒸餾水的分液漏斗中，二氯甲烷萃取3次，每次15 mL，合并萃取液。萃取液經(jīng)無水硫酸鈉干燥后，直接取10 μL進(jìn)行GC/MS分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理分析采用SPSS 19.0和DPS 6.05統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 四川省煙葉有機(jī)酸含量的總體分布狀況

由表1可知，蘋果酸的含量最高，占總有機(jī)酸總量的3410%。四川省煙葉有機(jī)酸含量變異系數(shù)均較大，有機(jī)酸含量不穩(wěn)定，其中異檸檬酸的變異系數(shù)最大，其次為Y-戊酮酸。不飽和脂肪酸亞油酸、油酸和亞麻酸的變異系數(shù)較小，相對穩(wěn)定。整體上非揮發(fā)酸的變異系數(shù)普遍偏大。各個有計(jì)算的偏度系數(shù)均大于零，為正向偏態(tài)峰，其中十四酸、十七酸、二十酸、異檸檬酸具有較大的正值，表明該4類有機(jī)酸分布具有右側(cè)較長尾部。蘋果酸、2，4-庚二烯酸、檸檬酸的峰度系數(shù)小于零，數(shù)據(jù)相對分散；其余有機(jī)酸峰度系數(shù)大于零，數(shù)據(jù)分布相對集中。其中富馬酸、異檸檬酸、十四酸、14-甲基十六酸、十七酸、二十酸的峰度系數(shù)值均較大，表明這幾類有機(jī)酸有比正態(tài)分布更長的尾部。

有機(jī)酸對煙葉品質(zhì)有重要的影響，其含量高低與品種關(guān)系密切。本試驗(yàn)的4個品種中所檢測出的有機(jī)酸組分相同，但各組分的含量差異異較大。不同品種間非揮發(fā)性有機(jī)酸、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、有機(jī)酸總量中，云煙97的含量均最高，云煙85最小。由于云煙85和云煙87均是紅大和G28雜交后所得，兩品種親緣關(guān)系相同，品種間有機(jī)酸差異不顯著[9-10]。各品種有機(jī)酸含量的高低差異使煙葉呈現(xiàn)出不同的香氣風(fēng)格，因此，在葉組配方中可根據(jù)需要合理擇用。

灰色關(guān)聯(lián)分析表明，植煙海拔高度與煙葉有機(jī)酸各項(xiàng)指標(biāo)的灰色關(guān)聯(lián)值均較大，說明植煙海拔高度對煙葉有機(jī)酸含量的影響較大，其中在植煙海拔高度與二十酸關(guān)聯(lián)度最大，總量次之，Y-戊酮酸最小。不同海拔高度的煙葉有機(jī)酸總含量表現(xiàn)為低海拔>高海拔>中海拔，中海拔區(qū)（1 500～1 800 m）的總有機(jī)酸含量相對較低，這與王樹會等的研究結(jié)果[11]不同，可能于當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件在一定程度上影響煙葉有機(jī)酸的含量。就單個指標(biāo)而言，Y-戊酮酸、14-甲基十六酸低海拔與高、中海拔存在1%水平的極顯著差異，高、中、低海拔間的丙二酸、油酸和亞麻酸差異達(dá)到1%水平的極顯著差異；十八酸在高海拔與中、低海拔間達(dá)到5%水平的顯著差異，有機(jī)酸總量低海拔與中、高海拔間達(dá)到5%水平的顯著性差異。乙二酸、富馬酸隨海拔高度升高，呈先升高再降低趨勢，丙二酸、Y-戊酮酸在不同植煙海拔間的分布規(guī)律為低海拔>中海拔>高海拔。其他有機(jī)酸指標(biāo)與植煙海拔高度變化不規(guī)律不顯著。

以往對煙葉有機(jī)酸的研究主要集中在栽培措施、肥料、烘烤調(diào)制等方面，在此基礎(chǔ)上，本研究以四川省13個植煙縣烤煙樣品為材料，綜合分析了四川省烤煙有機(jī)酸含量在不同部位、品種、海拔間的分布特征，深入研究了這3種因素對四川省煙葉有機(jī)酸含量的影響。而有機(jī)酸含量差異分析的分子基礎(chǔ)研究，有待作為下一步研究的重點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]煙草化學(xué)與分析編寫組. 煙草化學(xué)與分析[M]. 北京：中國財(cái)政經(jīng)濟(jì)出版社，1992.

[2]史宏志，劉國順. 煙草香味學(xué)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2000.

[3]王利杰，盧 紅.煙草有機(jī)酸研究進(jìn)展[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35（3）：142-144.

[4]劉百戰(zhàn)，徐 亮，胡便霞，等. 卷煙中非揮發(fā)性有機(jī)酸及某些高級脂肪酸的分析[J]. 煙草科技，2000（1）：25-27.

[5]劉百戰(zhàn)，徐 亮，詹建波，等. 云南烤煙中非揮發(fā)性有機(jī)酸和某些高級脂肪酸的分析[J]. 中國煙草科學(xué)，1999（2）：28-31.

[6]Davis D L. Waxes and lipids in leaf and their relationship to smoking quality and aroma[J]. Recent Adv Tobacco Science，1976，2：80-106.

[7]Kallianos A G. Phenolics and acids in leaf and their relationship to smoking quality and aroma[J]. Recent Advances in Tobacco Science，1976，2：61-79.

[8]武雪萍，劉國順，彭華偉，等. 有機(jī)、無機(jī)肥不同配比對烤煙中有機(jī)酸的影響[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2003，18（1）：97-99.

[9]李永平，王穎寬，馬文廣，等. 烤煙新品種云煙87的選育及特征特性[J]. 中國煙草科學(xué)，2001，22（4）：38-42.

[10]譚彩蘭，李永平，王穎寬，等. 烤煙新品種云煙85的選育及其特征特性[J]. 中國煙草科學(xué)，1997（1）：8-11.

[11]王樹會，李天福，邵 巖，等. 不同烤煙品種及海拔對煙葉中有機(jī)酸的影響[J]. 西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2006，28（1）：127-130.endprint

摘要：以四川省13個植煙縣159份烤煙樣品有機(jī)酸含量為研究對象，采用多重比較、聚類分析、灰色關(guān)聯(lián)度分析等方法，研究了不同部位、品種、海拔高度與煙葉有機(jī)酸含量之間的關(guān)系，結(jié)果表明：四川省煙葉有機(jī)酸各指標(biāo)變異系數(shù)均較大，異檸檬酸變異系數(shù)最大，不飽和脂肪的變異系數(shù)相對較小，蘋果酸在有機(jī)酸中所占比例最大；不同部位煙葉非揮發(fā)性有機(jī)酸含量表現(xiàn)為中部<上部<下部，飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、有機(jī)酸總量，隨著部位的上升逐漸下降；不同品種烤煙非揮發(fā)酸、高級脂肪酸、有機(jī)酸總量表現(xiàn)為云煙97>紅大>云煙87>云煙85；植煙海拔高度與二十酸的關(guān)聯(lián)度最大，煙葉有機(jī)酸含量表現(xiàn)為低海拔>高海拔>中海拔，丙二酸、油酸、亞麻酸在高、中、低海拔間差異達(dá)到1%水平的極顯著差異，乙二酸、富馬酸隨海拔高度的升高呈先升高再降低趨勢，丙二酸、Y-戊酮酸含量隨海拔升高逐漸降低，其他有機(jī)酸指標(biāo)與植煙海拔高度變化規(guī)律不顯著。

關(guān)鍵詞：烤煙；品種；海拔；非揮發(fā)酸；高級脂肪酸

中圖分類號： S572.01；TS41+1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）03-0280-03

煙草中的有機(jī)酸主要是指除氨基酸以外的有機(jī)酸[1]，其種類繁多，含量差異大，大部分與堿金屬或有機(jī)堿結(jié)合成鹽或以酯類的形式存在[2]。煙葉中有機(jī)酸含量為12%～16%，其中非揮發(fā)性有機(jī)酸占煙葉重量的5%～10%。煙草中有機(jī)酸的種類和含量直接影響著卷煙的吸味品質(zhì)。非揮發(fā)性有機(jī)酸以草酸、蘋果酸及檸檬酸為主，對抽吸品質(zhì)有重要影響，它們能與生物堿結(jié)合成鹽，調(diào)節(jié)煙氣pH值，在燃燒過程中，有機(jī)酸分解產(chǎn)生的酸陛片段可調(diào)節(jié)煙氣中質(zhì)子化和游離態(tài)煙堿的比例，從而極大地影響煙葉的勁頭和吃味[3-5]。本研究通過對四川省不同部位、海拔、品種煙葉的有機(jī)酸含量進(jìn)行分析評價，以期找出影響有機(jī)酸含量的因素，為煙葉生產(chǎn)和工業(yè)葉組配方使用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

2012年，在四川省涼山州寧南縣、德昌縣、普格縣、會理縣、會東縣、鹽源縣、冕寧縣、喜德縣、西昌縣、越西縣，攀枝花市米易縣、仁和縣，瀘州市敘永縣13個植煙縣的53個監(jiān)測點(diǎn)，分上（14～16葉位）、中（8～12葉位）、下（4～6葉位）3個部位抽取初烤煙葉樣品共計(jì)159份，每份樣品1.5 kg。其中各部位紅大品種煙葉樣品12份，云煙85品種煙葉樣品20份，云煙87品種煙葉樣品12份，云煙97品種煙葉樣品9份。海拔高度變化在1 101～2 400 m之間。

1.2 測定方法

分別稱取過40目煙末1 g放入干凈的100 mL反應(yīng)瓶中，加入500 μL內(nèi)標(biāo)（月桂酸）和25 mL硫酸甲醇溶液，搖勻，置于60 ℃水浴鍋中回流2 h進(jìn)行甲酯化反應(yīng)，然后用濾紙過濾到盛50 mL蒸餾水的分液漏斗中，二氯甲烷萃取3次，每次15 mL，合并萃取液。萃取液經(jīng)無水硫酸鈉干燥后，直接取10 μL進(jìn)行GC/MS分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理分析采用SPSS 19.0和DPS 6.05統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 四川省煙葉有機(jī)酸含量的總體分布狀況

由表1可知，蘋果酸的含量最高，占總有機(jī)酸總量的3410%。四川省煙葉有機(jī)酸含量變異系數(shù)均較大，有機(jī)酸含量不穩(wěn)定，其中異檸檬酸的變異系數(shù)最大，其次為Y-戊酮酸。不飽和脂肪酸亞油酸、油酸和亞麻酸的變異系數(shù)較小，相對穩(wěn)定。整體上非揮發(fā)酸的變異系數(shù)普遍偏大。各個有計(jì)算的偏度系數(shù)均大于零，為正向偏態(tài)峰，其中十四酸、十七酸、二十酸、異檸檬酸具有較大的正值，表明該4類有機(jī)酸分布具有右側(cè)較長尾部。蘋果酸、2，4-庚二烯酸、檸檬酸的峰度系數(shù)小于零，數(shù)據(jù)相對分散；其余有機(jī)酸峰度系數(shù)大于零，數(shù)據(jù)分布相對集中。其中富馬酸、異檸檬酸、十四酸、14-甲基十六酸、十七酸、二十酸的峰度系數(shù)值均較大，表明這幾類有機(jī)酸有比正態(tài)分布更長的尾部。

有機(jī)酸對煙葉品質(zhì)有重要的影響，其含量高低與品種關(guān)系密切。本試驗(yàn)的4個品種中所檢測出的有機(jī)酸組分相同，但各組分的含量差異異較大。不同品種間非揮發(fā)性有機(jī)酸、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、有機(jī)酸總量中，云煙97的含量均最高，云煙85最小。由于云煙85和云煙87均是紅大和G28雜交后所得，兩品種親緣關(guān)系相同，品種間有機(jī)酸差異不顯著[9-10]。各品種有機(jī)酸含量的高低差異使煙葉呈現(xiàn)出不同的香氣風(fēng)格，因此，在葉組配方中可根據(jù)需要合理擇用。

灰色關(guān)聯(lián)分析表明，植煙海拔高度與煙葉有機(jī)酸各項(xiàng)指標(biāo)的灰色關(guān)聯(lián)值均較大，說明植煙海拔高度對煙葉有機(jī)酸含量的影響較大，其中在植煙海拔高度與二十酸關(guān)聯(lián)度最大，總量次之，Y-戊酮酸最小。不同海拔高度的煙葉有機(jī)酸總含量表現(xiàn)為低海拔>高海拔>中海拔，中海拔區(qū)（1 500～1 800 m）的總有機(jī)酸含量相對較低，這與王樹會等的研究結(jié)果[11]不同，可能于當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件在一定程度上影響煙葉有機(jī)酸的含量。就單個指標(biāo)而言，Y-戊酮酸、14-甲基十六酸低海拔與高、中海拔存在1%水平的極顯著差異，高、中、低海拔間的丙二酸、油酸和亞麻酸差異達(dá)到1%水平的極顯著差異；十八酸在高海拔與中、低海拔間達(dá)到5%水平的顯著差異，有機(jī)酸總量低海拔與中、高海拔間達(dá)到5%水平的顯著性差異。乙二酸、富馬酸隨海拔高度升高，呈先升高再降低趨勢，丙二酸、Y-戊酮酸在不同植煙海拔間的分布規(guī)律為低海拔>中海拔>高海拔。其他有機(jī)酸指標(biāo)與植煙海拔高度變化不規(guī)律不顯著。

以往對煙葉有機(jī)酸的研究主要集中在栽培措施、肥料、烘烤調(diào)制等方面，在此基礎(chǔ)上，本研究以四川省13個植煙縣烤煙樣品為材料，綜合分析了四川省烤煙有機(jī)酸含量在不同部位、品種、海拔間的分布特征，深入研究了這3種因素對四川省煙葉有機(jī)酸含量的影響。而有機(jī)酸含量差異分析的分子基礎(chǔ)研究，有待作為下一步研究的重點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]煙草化學(xué)與分析編寫組. 煙草化學(xué)與分析[M]. 北京：中國財(cái)政經(jīng)濟(jì)出版社，1992.

[2]史宏志，劉國順. 煙草香味學(xué)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2000.

[3]王利杰，盧 紅.煙草有機(jī)酸研究進(jìn)展[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35（3）：142-144.

[4]劉百戰(zhàn)，徐 亮，胡便霞，等. 卷煙中非揮發(fā)性有機(jī)酸及某些高級脂肪酸的分析[J]. 煙草科技，2000（1）：25-27.

[5]劉百戰(zhàn)，徐 亮，詹建波，等. 云南烤煙中非揮發(fā)性有機(jī)酸和某些高級脂肪酸的分析[J]. 中國煙草科學(xué)，1999（2）：28-31.

[6]Davis D L. Waxes and lipids in leaf and their relationship to smoking quality and aroma[J]. Recent Adv Tobacco Science，1976，2：80-106.

[7]Kallianos A G. Phenolics and acids in leaf and their relationship to smoking quality and aroma[J]. Recent Advances in Tobacco Science，1976，2：61-79.

[8]武雪萍，劉國順，彭華偉，等. 有機(jī)、無機(jī)肥不同配比對烤煙中有機(jī)酸的影響[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2003，18（1）：97-99.

[9]李永平，王穎寬，馬文廣，等. 烤煙新品種云煙87的選育及特征特性[J]. 中國煙草科學(xué)，2001，22（4）：38-42.

[10]譚彩蘭，李永平，王穎寬，等. 烤煙新品種云煙85的選育及其特征特性[J]. 中國煙草科學(xué)，1997（1）：8-11.

[11]王樹會，李天福，邵 巖，等. 不同烤煙品種及海拔對煙葉中有機(jī)酸的影響[J]. 西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2006，28（1）：127-130.endprint

摘要：以四川省13個植煙縣159份烤煙樣品有機(jī)酸含量為研究對象，采用多重比較、聚類分析、灰色關(guān)聯(lián)度分析等方法，研究了不同部位、品種、海拔高度與煙葉有機(jī)酸含量之間的關(guān)系，結(jié)果表明：四川省煙葉有機(jī)酸各指標(biāo)變異系數(shù)均較大，異檸檬酸變異系數(shù)最大，不飽和脂肪的變異系數(shù)相對較小，蘋果酸在有機(jī)酸中所占比例最大；不同部位煙葉非揮發(fā)性有機(jī)酸含量表現(xiàn)為中部<上部<下部，飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、有機(jī)酸總量，隨著部位的上升逐漸下降；不同品種烤煙非揮發(fā)酸、高級脂肪酸、有機(jī)酸總量表現(xiàn)為云煙97>紅大>云煙87>云煙85；植煙海拔高度與二十酸的關(guān)聯(lián)度最大，煙葉有機(jī)酸含量表現(xiàn)為低海拔>高海拔>中海拔，丙二酸、油酸、亞麻酸在高、中、低海拔間差異達(dá)到1%水平的極顯著差異，乙二酸、富馬酸隨海拔高度的升高呈先升高再降低趨勢，丙二酸、Y-戊酮酸含量隨海拔升高逐漸降低，其他有機(jī)酸指標(biāo)與植煙海拔高度變化規(guī)律不顯著。

關(guān)鍵詞：烤煙；品種；海拔；非揮發(fā)酸；高級脂肪酸

中圖分類號： S572.01；TS41+1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）03-0280-03

煙草中的有機(jī)酸主要是指除氨基酸以外的有機(jī)酸[1]，其種類繁多，含量差異大，大部分與堿金屬或有機(jī)堿結(jié)合成鹽或以酯類的形式存在[2]。煙葉中有機(jī)酸含量為12%～16%，其中非揮發(fā)性有機(jī)酸占煙葉重量的5%～10%。煙草中有機(jī)酸的種類和含量直接影響著卷煙的吸味品質(zhì)。非揮發(fā)性有機(jī)酸以草酸、蘋果酸及檸檬酸為主，對抽吸品質(zhì)有重要影響，它們能與生物堿結(jié)合成鹽，調(diào)節(jié)煙氣pH值，在燃燒過程中，有機(jī)酸分解產(chǎn)生的酸陛片段可調(diào)節(jié)煙氣中質(zhì)子化和游離態(tài)煙堿的比例，從而極大地影響煙葉的勁頭和吃味[3-5]。本研究通過對四川省不同部位、海拔、品種煙葉的有機(jī)酸含量進(jìn)行分析評價，以期找出影響有機(jī)酸含量的因素，為煙葉生產(chǎn)和工業(yè)葉組配方使用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

2012年，在四川省涼山州寧南縣、德昌縣、普格縣、會理縣、會東縣、鹽源縣、冕寧縣、喜德縣、西昌縣、越西縣，攀枝花市米易縣、仁和縣，瀘州市敘永縣13個植煙縣的53個監(jiān)測點(diǎn)，分上（14～16葉位）、中（8～12葉位）、下（4～6葉位）3個部位抽取初烤煙葉樣品共計(jì)159份，每份樣品1.5 kg。其中各部位紅大品種煙葉樣品12份，云煙85品種煙葉樣品20份，云煙87品種煙葉樣品12份，云煙97品種煙葉樣品9份。海拔高度變化在1 101～2 400 m之間。

1.2 測定方法

分別稱取過40目煙末1 g放入干凈的100 mL反應(yīng)瓶中，加入500 μL內(nèi)標(biāo)（月桂酸）和25 mL硫酸甲醇溶液，搖勻，置于60 ℃水浴鍋中回流2 h進(jìn)行甲酯化反應(yīng)，然后用濾紙過濾到盛50 mL蒸餾水的分液漏斗中，二氯甲烷萃取3次，每次15 mL，合并萃取液。萃取液經(jīng)無水硫酸鈉干燥后，直接取10 μL進(jìn)行GC/MS分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理分析采用SPSS 19.0和DPS 6.05統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 四川省煙葉有機(jī)酸含量的總體分布狀況

由表1可知，蘋果酸的含量最高，占總有機(jī)酸總量的3410%。四川省煙葉有機(jī)酸含量變異系數(shù)均較大，有機(jī)酸含量不穩(wěn)定，其中異檸檬酸的變異系數(shù)最大，其次為Y-戊酮酸。不飽和脂肪酸亞油酸、油酸和亞麻酸的變異系數(shù)較小，相對穩(wěn)定。整體上非揮發(fā)酸的變異系數(shù)普遍偏大。各個有計(jì)算的偏度系數(shù)均大于零，為正向偏態(tài)峰，其中十四酸、十七酸、二十酸、異檸檬酸具有較大的正值，表明該4類有機(jī)酸分布具有右側(cè)較長尾部。蘋果酸、2，4-庚二烯酸、檸檬酸的峰度系數(shù)小于零，數(shù)據(jù)相對分散；其余有機(jī)酸峰度系數(shù)大于零，數(shù)據(jù)分布相對集中。其中富馬酸、異檸檬酸、十四酸、14-甲基十六酸、十七酸、二十酸的峰度系數(shù)值均較大，表明這幾類有機(jī)酸有比正態(tài)分布更長的尾部。

有機(jī)酸對煙葉品質(zhì)有重要的影響，其含量高低與品種關(guān)系密切。本試驗(yàn)的4個品種中所檢測出的有機(jī)酸組分相同，但各組分的含量差異異較大。不同品種間非揮發(fā)性有機(jī)酸、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、有機(jī)酸總量中，云煙97的含量均最高，云煙85最小。由于云煙85和云煙87均是紅大和G28雜交后所得，兩品種親緣關(guān)系相同，品種間有機(jī)酸差異不顯著[9-10]。各品種有機(jī)酸含量的高低差異使煙葉呈現(xiàn)出不同的香氣風(fēng)格，因此，在葉組配方中可根據(jù)需要合理擇用。

灰色關(guān)聯(lián)分析表明，植煙海拔高度與煙葉有機(jī)酸各項(xiàng)指標(biāo)的灰色關(guān)聯(lián)值均較大，說明植煙海拔高度對煙葉有機(jī)酸含量的影響較大，其中在植煙海拔高度與二十酸關(guān)聯(lián)度最大，總量次之，Y-戊酮酸最小。不同海拔高度的煙葉有機(jī)酸總含量表現(xiàn)為低海拔>高海拔>中海拔，中海拔區(qū)（1 500～1 800 m）的總有機(jī)酸含量相對較低，這與王樹會等的研究結(jié)果[11]不同，可能于當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件在一定程度上影響煙葉有機(jī)酸的含量。就單個指標(biāo)而言，Y-戊酮酸、14-甲基十六酸低海拔與高、中海拔存在1%水平的極顯著差異，高、中、低海拔間的丙二酸、油酸和亞麻酸差異達(dá)到1%水平的極顯著差異；十八酸在高海拔與中、低海拔間達(dá)到5%水平的顯著差異，有機(jī)酸總量低海拔與中、高海拔間達(dá)到5%水平的顯著性差異。乙二酸、富馬酸隨海拔高度升高，呈先升高再降低趨勢，丙二酸、Y-戊酮酸在不同植煙海拔間的分布規(guī)律為低海拔>中海拔>高海拔。其他有機(jī)酸指標(biāo)與植煙海拔高度變化不規(guī)律不顯著。

以往對煙葉有機(jī)酸的研究主要集中在栽培措施、肥料、烘烤調(diào)制等方面，在此基礎(chǔ)上，本研究以四川省13個植煙縣烤煙樣品為材料，綜合分析了四川省烤煙有機(jī)酸含量在不同部位、品種、海拔間的分布特征，深入研究了這3種因素對四川省煙葉有機(jī)酸含量的影響。而有機(jī)酸含量差異分析的分子基礎(chǔ)研究，有待作為下一步研究的重點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]煙草化學(xué)與分析編寫組. 煙草化學(xué)與分析[M]. 北京：中國財(cái)政經(jīng)濟(jì)出版社，1992.

[2]史宏志，劉國順. 煙草香味學(xué)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2000.

[3]王利杰，盧 紅.煙草有機(jī)酸研究進(jìn)展[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35（3）：142-144.

[4]劉百戰(zhàn)，徐 亮，胡便霞，等. 卷煙中非揮發(fā)性有機(jī)酸及某些高級脂肪酸的分析[J]. 煙草科技，2000（1）：25-27.

[5]劉百戰(zhàn)，徐 亮，詹建波，等. 云南烤煙中非揮發(fā)性有機(jī)酸和某些高級脂肪酸的分析[J]. 中國煙草科學(xué)，1999（2）：28-31.

[6]Davis D L. Waxes and lipids in leaf and their relationship to smoking quality and aroma[J]. Recent Adv Tobacco Science，1976，2：80-106.

[7]Kallianos A G. Phenolics and acids in leaf and their relationship to smoking quality and aroma[J]. Recent Advances in Tobacco Science，1976，2：61-79.

[8]武雪萍，劉國順，彭華偉，等. 有機(jī)、無機(jī)肥不同配比對烤煙中有機(jī)酸的影響[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2003，18（1）：97-99.

[9]李永平，王穎寬，馬文廣，等. 烤煙新品種云煙87的選育及特征特性[J]. 中國煙草科學(xué)，2001，22（4）：38-42.

[10]譚彩蘭，李永平，王穎寬，等. 烤煙新品種云煙85的選育及其特征特性[J]. 中國煙草科學(xué)，1997（1）：8-11.

[11]王樹會，李天福，邵 巖，等. 不同烤煙品種及海拔對煙葉中有機(jī)酸的影響[J]. 西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2006，28（1）：127-130.endprint