王紅民 張小紅

MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表達(dá)及其與肺癌轉(zhuǎn)移和預(yù)后關(guān)系的研究

王紅民 張小紅

目的 探討基質(zhì)金屬蛋白酶 -2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶 -9(MMP-9)在肺癌中的表達(dá)水平及其與肺癌轉(zhuǎn)移、肺癌預(yù)后的相關(guān)聯(lián)系。方法 對 80 例非小細(xì)胞肺癌患者和 20 例肺良性病變患者進(jìn)行 LSAB 法檢測其 MMP-2 和 MMP-9 的表達(dá)水平 , 并檢測其在腺癌、鱗癌和腺鱗混合癌中的表達(dá)水平以及在不同分化程度腫瘤中的表達(dá)水平 , 將檢測的數(shù)據(jù)進(jìn)行對比 , 分析 MMP-2 和 MMP-9 的表達(dá)水平與肺癌轉(zhuǎn)移和預(yù)后的相關(guān)聯(lián)系。結(jié)果 MMP-2、MMP-9 在鱗癌中的表達(dá)水平最高 , 而表達(dá)水平較低的腺癌和腺鱗混合癌之間差異不大 , MMP-2 與 MMP-9 在不同分化程度的腫瘤中表達(dá)水平差異不大 , MMP-2、MMP-9 在肺癌預(yù)后方面的表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)。結(jié)論 MMP-2 與 MMP-3 在肺癌中的表達(dá)水平與肺癌的轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系 , 同時可能成為檢測肺癌預(yù)后的重要指標(biāo)。

基質(zhì)金屬蛋白酶 -2 ；基質(zhì)金屬蛋白酶 -9 ；肺癌的轉(zhuǎn)移 ；預(yù)后

肺癌是常見的惡性腫瘤之一［1］。是具有發(fā)病率高和死亡率增長快的癌癥疾病 , 嚴(yán)重的威脅著人們的健康和生命［2］。目前對于肺癌的治療療效不明顯 , 主要原因是肺癌具有癌瘤侵襲和轉(zhuǎn)移等特點 , 同時發(fā)病過程中往往有伴隨癥的發(fā)生 ,作者對于發(fā)病以及癌瘤轉(zhuǎn)移的根本了解不深刻 , 所以治療難以起到療效。本次研究就本院的 80例非小細(xì)胞肺癌患者和 20 例肺良性病變患者開展研究 , 通過對其中兩種基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)水平檢測及對比來證實研究的正確性 , 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資 料 本院 在 2013年 1月 ~2014年 1月 收治的肺癌患者中 , 選擇具有可比性的 80例非小細(xì)胞肺癌患者以及 20例肺良性病變患者 , 其中男 52例 , 女 48例 , 平均年齡(54±9)歲 , 所有患者均確診為肺癌患者 , 其中腺癌患者有 41例 , 鱗癌患者有 44例 , 腺鱗混合癌患者有 15例 ；分化程度方面低分化癌患者有 46例 , 中分化癌患者有 40例 , 高分化癌患者有 14例。

1. 2 主要試劑 基質(zhì)金屬蛋白酶 -2兔抗人多克隆抗體 , 基質(zhì)金屬蛋白酶 -9兔抗人多克隆抗體 , 生物素化羊抗兔抗體 ,過氧化物酶-鏈親和素復(fù)合物。

1. 3 方法 對肺癌患者采用 LSAB法進(jìn)行檢測 , 先經(jīng)過 3%的過氧化氫阻斷內(nèi)源性過氧化酶 20 min, 接著在微波爐中行抗原修復(fù) , 時間約為 15 min, 隨后依次加入 1:20的正常羊血清 , MMP-2加入 1:100的一抗、1:200的二抗和 1:200的三抗 , MMP-9加 入 1:50的 一 抗、1:200的 二 抗 和 1：200的 三 抗 ,隨后在恒溫箱中孵育 30 min, 溫度調(diào)至 37℃ , 最后進(jìn)行 PBS沖洗在 DAB-H2O2顯色和蘇木素復(fù)染 , 制成切片 , 在 400鏡下觀察每張切片的 5~10個視野 , 每個視野計數(shù) 100~200個腫瘤細(xì)胞 , 共計 1000個細(xì)胞 , 在計算出每張切片的陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)作為該切片上的表達(dá)水平。

1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用 SPSS15.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差 ( x-±s)表示 , 采用 t檢驗 ；計數(shù)資料采用χ2檢驗 , P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表達(dá)水平及其與肺癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系 MMP-2、MMP-9在鱗癌中的表達(dá)水平最高 , 而表達(dá)水平較低的腺癌和腺鱗混合癌之間差異不大 , 且 MMP-2與 MMP-9在不同分化程度的腫瘤中表達(dá)水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P＞0.05), 見表1。

2. 2 MMP-2、MMP-9在 肺 癌 中 的 表 達(dá) 水 平 與 預(yù) 后 的 關(guān) 系MMP-2、MMP-9在肺癌預(yù)后方面的表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05), 與預(yù)后有著密切的相關(guān)性。見表2。

表1 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表達(dá)水平及其與肺癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系

表1 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表達(dá)水平及其與肺癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系

注 ：兩組比較 ,aP<0.05,bP>0.05

MMP-2(%)PMMP-9(%)P非小細(xì)胞肺癌 8061.3±16.9a<0.0566.1±19.2a<0.05肺良性病變 2016.8±10.2 17.2±9.6腺癌 4156.2±13.6a<0.0563.5±15.5a<0.05鱗癌 4465.4±18.1 73.7±19.3腺鱗混合癌 1555.8±12.9 62.1±16.6低分化癌 4661.2±14.3b>0.0570.4±15.7b>0.05中分化癌 4056.8±15.4 68.3±16.1高分化癌 1455.3±17.1 67.8±17.4項目 例數(shù)

表2 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表達(dá)水平與預(yù)后的關(guān)系

3 討論

惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移是一個及其復(fù)雜的過程［3］。肺癌細(xì)胞突破細(xì)胞處基質(zhì)和毛細(xì)血管基底膜 , 隨后侵入到相鄰的淋巴系統(tǒng)或者進(jìn)入血循環(huán) , 隨后通過毛細(xì)血管在進(jìn)入其他處的組織或者器官里并著床生成腫瘤血管 , 這就完成了肺癌轉(zhuǎn)移。近些年的研究表明 , 肺癌的轉(zhuǎn)移是一個極其復(fù)雜的多基因調(diào)控的多階段、多步驟過程并且基質(zhì)金屬蛋白酶是肺癌轉(zhuǎn)移中最重要的蛋白酶［4］。本次研究通過 MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表達(dá)水平檢測及其與肺癌轉(zhuǎn)移和預(yù)后的關(guān)系分析,發(fā)現(xiàn) MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表達(dá)水平明顯比在肺良性病變中的表達(dá)水平高 , 同時 MMP-2、MMP-9 在鱗癌中的表達(dá)水平最高 , 而表達(dá)水平較低的腺癌和腺鱗混合癌之間差異不大 , 且 MMP-2 與 MMP-9 在不同分化程度的腫瘤中表達(dá)水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P＞0.05), 同時 MMP-2、MMP-9 在肺癌預(yù)后方面的表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)。與薛洋等［5］的 MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表達(dá)及其與肺癌轉(zhuǎn)移和預(yù)后關(guān)系的研究結(jié)果基本一致。結(jié)合以往的研究 , MMP-2與 MMP-3 在肺癌中的表達(dá)水平檢測肺癌轉(zhuǎn)移和預(yù)后都有重要意義。

［1］蔡銘 ,翁鳶 ,王志強(qiáng) ,等 .基質(zhì)金屬蛋白酶在早期肺癌中的表達(dá) .中華實驗外科雜志 , 2010,27(5):612-613.

［2］李莉 ,劉少揚 ,江大瓊 .基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑在腫瘤發(fā)展和治療中的作用 .腫瘤防治研究 , 2004,31(2):321-323.

［3］李濤 ,曾昭沖 ,王魯 ,等 .放射后肺癌細(xì)胞 MMP-2 表達(dá)、活性的變化及其對侵襲性的影響 .中華實驗外科雜志 , 2007, 24(12): 1525-1527.

［4］梅 同 華 ,羅 彬 ,馬 英 .肺 癌 患 者 肺 組 織 MMP-2、MMP-7 和TIMP-2 表 達(dá) 及 意 義 .第 三 軍 醫(yī) 大 學(xué) 學(xué) 報 , 2004,26(16):1491-1493.

［5］薛 洋 ,周 清 華 ,張 尚 福 ,等 .MMP-2、MMP-9 在 肺 癌 中 的 表達(dá)及其與肺癌轉(zhuǎn)移和預(yù)后關(guān)系的研究 .華西醫(yī)學(xué) , 2008, 23(2): 225-226.

2014-04-16］

450052 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科 /河南省高等學(xué)校臨床醫(yī)學(xué)重點學(xué)科開放實驗室 (王紅民 )；鄭州大學(xué)附屬鄭州中心醫(yī)院 /鄭州市中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科 (張小紅 )