趙永旗 程洪兵 張同領(lǐng) 魯麗紅

·論著·

血竭酊的藥理作用研究

趙永旗 程洪兵 張同領(lǐng) 魯麗紅

目的研究血竭酊的藥理作用。方法采用小鼠耳郭腫脹法、大鼠腳趾腫脹法、熱板法和自由落體組織損傷模型分別觀察其抗炎、消腫、鎮(zhèn)痛和抗急性軟組織損傷作用。將動(dòng)物分為模型、陽(yáng)性藥物和血竭酊高、 低濃度組。結(jié)果與模型組比較, 血竭酊高、 低濃度組小鼠耳腫脹度顯著降低(P＜0.01), 大鼠蛋清所致腳趾腫脹度6 h顯著消除(P＜0.01), 小鼠痛閾顯著提高 (P＜0.01), 明顯降低損傷大鼠的表觀損傷積分 (P＜0.01)。結(jié)論血竭酊具有顯著的抗炎、消腫、止痛及抗急性軟組織損傷的作用。

血竭酊；抗炎；消腫；鎮(zhèn)痛；急性軟組織損傷

急性軟組織損傷是外科常見的疾病之一, 是由于外力使關(guān)節(jié)過(guò)度伸屈, 使肌腱、韌帶和關(guān)節(jié)囊等發(fā)生撕裂, 或鈍物打擊所致的肌組織、皮下組織等損傷所引起。血竭酊是本院開發(fā)的外用中藥制劑(制劑批準(zhǔn)文號(hào)：豫藥制字Z04090080,現(xiàn)已獲得專利, 專利號(hào)：ZL 2005 1 0088055.3), 具有活血化瘀,消腫止痛作用。多年來(lái)用于治療急性軟組織損傷, 取得了滿意的療效。為探明血竭酊藥理作用, 本研究選用高、 低濃度進(jìn)行藥理學(xué)實(shí)驗(yàn), 為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1儀器 IN-100B型托盤扭力天平(上海第二天平儀器廠), 打孔器, 自制圓筒沖擊器。

1.2試藥 血竭酊(河南省濮陽(yáng)市人民醫(yī)院制劑室自制, 批號(hào)110901)； 吲哚美辛搽劑(黑龍江省佳木斯晨星制藥廠,批號(hào)： 20110530)；阿司匹林(南京白敬宇制藥有限公司, 批號(hào)： 110908)；正紅花油(福建太平洋制藥有限公司, 批號(hào)：110601)；60%乙醇, 二甲苯。

1.3動(dòng)物 昆明種小鼠120只, ♀♂兼用, 體重18~22 g；Wistar大鼠40只, ♀♂兼用, 體重200~250 g；均由河南醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供, 合格證號(hào)：醫(yī)動(dòng)字第410117號(hào)。

2 方法

2.1血竭酊的制備 按處方中的藥物比例, 取適量血竭、丹參、沒(méi)藥、紅花、蘇木、川芎、茜草、羌活等11味中藥置于適宜容器中, 加60%乙醇, 常溫下密閉浸漬7 d以上,緩緩滲漉, 收集滲漉液適量(約800 ml), 將藥渣壓榨, 所得壓榨液濾過(guò)后并入滲漉液中；添加60%乙醇至1000 ml, 加入冰片使溶, 攪拌均勻, 分裝, 即得血竭酊。該制劑僅供局部敷患處使用, 嚴(yán)禁口服。作者分別制備了高、 低濃度血竭酊,每1 ml約含原藥材分別為0.4 g (40%)、0.2 g (20%)。

2.2抗炎試驗(yàn)(小鼠耳腫脹法) 參考文獻(xiàn)［1, 2］, 取小鼠40只, 雄性, 體重(20±2)g, 隨機(jī)分為4組, 每組10只, 即模型組(生理鹽水), 對(duì)照組(1.5%吲哚美辛搽劑), 血竭酊高、低濃度(40%、20%)組。將二甲苯0.05 ml涂于各組小鼠左耳前后兩面, 右耳不涂藥作為對(duì)照。致炎后30 min按10.0 ml/ kg在致炎耳處連續(xù)2次分別涂相應(yīng)藥物, 每次間隔30 min。于4 h后將小鼠頸椎脫臼處死, 剪下左右耳, 用8 mm直徑打孔器取雙耳同等部位耳片, 稱重。左右耳質(zhì)量之差為腫脹度, 按下列公式計(jì)算受試藥腫脹抑制率：腫脹抑制率＝(模型組平均腫脹度－給藥組平均腫脹度)/模型組平均腫脹度×100%。

2.3消腫作用(大鼠腳趾腫脹法) 參考文獻(xiàn)［3］, 取大鼠40只, 分組與藥物濃度同“2.2”項(xiàng)。各組大鼠于實(shí)驗(yàn)前按毛細(xì)血管放大測(cè)量法測(cè)定大鼠左后腳趾正常體積(cm3)。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天, 各組大鼠分別于左后腳兩面涂相應(yīng)藥物0.1 ml/只腳, 涂藥2次, 間隔1 h；末次給藥后往左后腳注射蛋清0.1 ml/只腳。各組大鼠分別于注射蛋清后1、2、4、6 h測(cè)定左后腳體積,以各大鼠注射蛋清前后腳趾體積差值為腫脹度。

2.4鎮(zhèn)痛作用(熱板法) 參考文獻(xiàn)［1］, 取♀小鼠置于金屬熱板(55℃), 以舔后腳為疼痛反應(yīng)指標(biāo), 共測(cè)2次, 每次不超過(guò)30 s舔腳者為入選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物, 小鼠舔腳平均時(shí)間為給藥前痛閾值。選取合格小鼠40只, 隨機(jī)分為4組, 即模型組(生理鹽水)、阿司匹林組(1.1%, 30 ml/kg)和血竭酊高、低濃度(40%、20%)組。其中阿司匹林為陽(yáng)性藥物對(duì)照, 按人體動(dòng)物等效劑量推算, 應(yīng)為1.1%濃度, 30 ml/kg。阿司匹林灌胃給藥,而血竭酊組仍按后腳涂藥, 共給藥3次, 每次給藥間隔1 h,末次給藥0.5 h后開始測(cè)定痛閾值, 與給藥前痛閾值比較。

2.5小鼠軟組織損傷修復(fù)試驗(yàn)(自由落體組織損傷模型)參閱文獻(xiàn)［4］, 選用昆明種小鼠40只, 雌雄各半, 體重(24±2) g, 用厚紙制成內(nèi)徑略大于200 g砝碼的圓筒, 長(zhǎng)30 cm。將小鼠后右足置于桌面, 足掌向上, 圓筒置于足掌面, 然后用砝碼從圓筒頂端直落擊下, 造成足部軟組織損傷模型。然后將小鼠按性別、體重、損傷程度隨機(jī)分為4組, 每組10只, 即陰性對(duì)照組［(即模型組(生理鹽水)］、陰性對(duì)照組(正紅花油)和血竭酊高、低濃度 (40%、20%)組。分別用皮尺測(cè)量各組損傷前及損傷后1 d的踝關(guān)節(jié)周長(zhǎng)作為損傷測(cè)量值, 之后給予相應(yīng)的藥物治療, 血竭酊高、低濃度組均給予血竭酊外搽；陽(yáng)性對(duì)照組外搽正紅花油, 陰性對(duì)照組僅給予生理鹽水外搽,各組均每天搽藥2次, 連續(xù)給藥5 d, 末次給藥后1 h分別用皮尺測(cè)量各組每天搽藥后的周長(zhǎng), 比較各組藥物的消腫作用。

2.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 采用t檢驗(yàn), P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1血竭酊的抗炎作用 “抗炎試驗(yàn)(小鼠期中脹法)”,與模型組比較, 血竭酊高、 低濃度組腫脹抑制率顯著增高(P＜0.01), 且呈劑量依賴性。結(jié)果表明, 血竭酊能顯降低小鼠耳廓腫脹度。見表1。

3.2血竭酊的消腫作用 “消腫作用(大鼠腳趾腫脹法)”, 與模型組比較, 血竭酊高、 低濃度組腫脹度顯著減少 (P＜0.01)。結(jié)果表明, 血竭酊有明顯的消腫作用。見表2。

3.3血竭酊的鎮(zhèn)痛作用 “鎮(zhèn)痛作用(熱板法)”, 與模型組比較, 血竭酊高、低濃度組給藥前后痛閾值差顯著增加(P＜0.01)。結(jié)果表明, 血竭酊有明顯的鎮(zhèn)痛作用。見表3。

3.4血竭酊對(duì)小鼠軟組織損傷的影響 “小鼠軟組織損傷修復(fù)實(shí)驗(yàn)(自由落體組織損傷模型)”, 抗軟組織損傷試驗(yàn)結(jié)果表明, 血竭酊高濃度組在搽藥后2 d即表現(xiàn)出明顯的抗軟組織損傷的作用, 其療效延續(xù)至藥后5 d。血竭酊低濃度組僅藥后2 d顯示出明顯的作用, 藥后4、5 d血竭酊高濃度組療效均明顯優(yōu)于血竭酊低濃度組和陽(yáng)性對(duì)照組, 結(jié)果表明血竭酊具有保護(hù)軟組織損傷的作, 且呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。見表4。

表1 血竭酊的抗炎作用( x-±s)

表2 血竭酊的消腫作用( x-±s)

表3 血竭酊的鎮(zhèn)痛作用( x-±s)

表4 血竭酊對(duì)小鼠軟組織損傷的影響( x-±s, cm)

4 討論

急性軟組織損傷指人體運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)、皮膚以下骨骼之外的組織所發(fā)生的一系列急性挫傷或(和)裂傷, 其主要表現(xiàn)為損傷局部疼痛、腫脹、有觸痛, 皮膚青紫和活動(dòng)受限。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為“, 氣傷痛、形傷腫”, 治宜活血化瘀, 消腫止痛之法。其治療多以局部消炎止痛為主, 一般采用冷熱敷、藥物、物理等方法。

血竭酊由血竭、冰片、丹參、沒(méi)藥、紅花、蘇木、雞血藤、川芎、降香、赤芍、茜草、羌活等藥組成, 具有活血化瘀、消腫止痛作用。方中血竭具降低肌肉毛細(xì)血管通透性, 明顯的抗血小板聚集等作用。丹參、川芎均具改善微循環(huán), 抑制血小板聚集, 保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞, 抑制毛細(xì)血管通透性。雞血藤, 紅花, 蘇木也均有抗炎, 抑制血小板聚集作用。冰片、赤芍、紅花、羌活有鎮(zhèn)痛、抗炎作用。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)二甲苯引起的小鼠耳腫、蛋清引起的大鼠足腫、熱板所致小鼠疼痛及自由落體組織損傷模型實(shí)驗(yàn), 觀察血竭酊的抗炎、消腫、鎮(zhèn)痛及抗急性軟組織損傷作用。結(jié)果表明, 血竭酊對(duì)二甲苯引起的小鼠耳腫, 有明顯的抗炎作用；對(duì)蛋清引起的大鼠足腫, 有明顯的消腫效果；熱板所致小鼠疼痛試驗(yàn), 能提高模型小鼠給藥前后痛閾值差；自由落體組織損傷模型實(shí)驗(yàn), 顯示良好的退腫作用。提示血竭酊具有明顯的抗炎、消腫及鎮(zhèn)痛及促進(jìn)損傷軟組織修復(fù)等作用, 為該藥臨床治療跌打損傷、軟組織損傷等癥提供了依據(jù)。

在本實(shí)驗(yàn)中有的觀察指標(biāo)出現(xiàn)小劑量組具有顯著的藥效作用, 而大劑量組經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理無(wú)顯著意義。這可能和中藥所含活性成分的復(fù)雜性和中藥作用機(jī)制的復(fù)雜性有關(guān), 具體機(jī)制有待進(jìn)一步闡明。本實(shí)驗(yàn)只對(duì)血竭酊的消腫止痛作用及抗急性軟組織損傷作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn), 而對(duì)血竭酊的活血化瘀作用的具體機(jī)制還有待于進(jìn)行進(jìn)一步研究。

［1］ 徐叔云, 卞如謙, 陳修, 等.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué).北京:人民衛(wèi)生出版社, 2002:885, 916.

［2］ 周遠(yuǎn)大, 江舟, 何海霞, 等.野馬追對(duì)大、小鼠實(shí)驗(yàn)性高脂血癥的防治作用.中國(guó)藥房, 2007, 18(3):178.

［3］ 趙辨.臨床皮膚病學(xué).第2版.南京:江蘇科學(xué)技術(shù)出版社, 1990:479.

［4］ 潘洪平, 陳英, 荊樹漢, 等.復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑抗軟組織損傷及抗炎止痛的實(shí)驗(yàn)研究.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志, 2007, 27(7): 861.

Study on pharmacological action of Xuejieding Tinctures

ZHAO Yong-qi, CHENG Hong-bing, ZHANG Tong-ling et al.Puyang People's Hospital, Puyang 457000, China

Objective To investigate pharmacological action of Xuejieding Tinctures.MethodsAntiinflammation, effects swelling relief, analgesic and acute soft tissue injury disease of Xuejieding Tinctures were determined by mice ear swelling method, rat toe swelling method, hot plate method and freely falling mass damages models, respectively.The experiments were divided into 4 groups, i.e.normal saline control group, positive drug group and Xuejieding Tinctures high and low concentration groups.ResultsXuejieding Tinctures containing 40% or 20% crude drug decreased the mice ear swelling (P＜0.01)；Xuejieding Tinctures also relived rat toe swelling induced by egg white at the end of 6 hours(P＜0.01)；the pain threshold value of mice were elevated(P＜0.01).the acute soft tissue injury in rats were resisted(P＜0.01).ConclusionXuejieding Tinctures has significant antiinflammation, effects swelling relief, analgesic and can release soft tissue injury.

Xuejieding Tinctures; Anti-inflammation; Swelling relief; Analgesia; Acute soft tissueinjury

457000 濮陽(yáng)市人民醫(yī)院(趙永旗 程洪兵 張同領(lǐng))；濮陽(yáng)市紅十字醫(yī)院(魯麗紅)

趙永旗 E-mail： pyzhyq@126.com