沈云玫等

摘要：采用對(duì)峙培養(yǎng)法，測(cè)定105株枇杷根際土壤真菌對(duì)生防木霉菌株P(guān)3.9的抑菌作用。結(jié)果表明，抑制率 300%～39.9% 的菌株共5個(gè)，占供試菌株的4.8%；抑制率200%～29.9%的菌株共13個(gè)，占供試菌株的124%；抑制率100%～19.9%的菌株共45個(gè)，占供試菌株的42.9%；抑制率0%～9.9%的菌株共42個(gè)，占供試菌株的400%。結(jié)果表明，所有供試枇杷根際土壤真菌菌株對(duì)P3.9生防木霉菌株的抑制率均在40%以下，829%的供試菌株抑制率在0%～19.9%之間。枇杷根際土壤真菌菌株不影響P3.9生防木霉菌株在枇杷根際土壤中的定殖能力。

關(guān)鍵詞：枇杷；根際土壤真菌；抑菌作用；生防菌；定殖能力

中圖分類(lèi)號(hào)： S482.2+92 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）04-0106-02

收稿日期：2013-08-14

基金項(xiàng)目：國(guó)家科技基礎(chǔ)工作專(zhuān)項(xiàng)（編號(hào)：2006FY120100）；紅河學(xué)院博碩項(xiàng)目（編號(hào)：XJ1B0912）；云南省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)項(xiàng)目；紅河學(xué)院碩士點(diǎn)植物保護(hù)一級(jí)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目。

作者簡(jiǎn)介：沈云玫（1980—），女，云南彌勒人，碩士研究生，講師，主要從事微生物及生態(tài)研究。E-mail：sym_biology2@126.com。

通信作者：魯海菊，博士研究生，副教授，主要從事亞熱帶植物真菌分類(lèi)和真菌病害研究。E-mail：luhaiju2011@126.com。木霉（Trichoderma spp.）是真菌類(lèi)中最有潛力的生防菌株[1]，至少對(duì)18個(gè)屬29種病原真菌表現(xiàn)出一定的拮抗作用[2]，先后成功防治水稻紋枯病[3]、人參銹腐病[4]、番茄灰霉病[5]等植物病害，特別是在土傳病害防治，如番茄枯萎病[6]防治方面，發(fā)揮出比化學(xué)農(nóng)藥更好優(yōu)勢(shì)。盡管如此，我國(guó)生物農(nóng)藥的應(yīng)用發(fā)展緩慢甚至停滯不前[7]，主要原因是防治效果不穩(wěn)定，讓生防菌株在植物根際成功定殖是解決這一難題的方向之一。植物根際中存在大量微生物，真菌是根際微生物的成員之一，與木霉同類(lèi)，在空間、營(yíng)養(yǎng)及小生境等生存環(huán)境方面，兩者極其相似。根際土壤真菌自然與外來(lái)木霉菌株發(fā)生各種競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，木霉在競(jìng)爭(zhēng)中是否獲勝，關(guān)系到木霉是否能在植物根際定殖成功。本試驗(yàn)研究1株分離自枇杷韌皮部組織中的木霉菌株P(guān)3.9是否會(huì)受到枇杷根際土壤真菌的強(qiáng)烈抑制，從而影響在枇杷根中的成功定殖。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1供試菌株枇杷根際土壤真菌：從蒙自枇杷園區(qū)采集枇杷根際土壤，常規(guī)分離[8]獲得。生防木霉菌株P(guān)3.9：從蒙自枇杷園區(qū)采集枇杷根腐病植株韌皮部，常規(guī)組織分離獲得[8]，經(jīng)對(duì)峙培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)對(duì)石榴干腐病病菌及枇杷根腐病病菌有極強(qiáng)的抑制效果。

1.1.2供試培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g、葡萄糖 16 g、瓊脂粉 20 g、蒸餾水1 000 mL。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1對(duì)峙培養(yǎng)將已分離純化的枇杷根際土壤真菌和生防木霉菌株P(guān)3.9在PDA平板培養(yǎng)基中28 ℃恒溫?cái)U(kuò)大培養(yǎng) 5 d，采用對(duì)峙培養(yǎng)法[9]，將各供試菌株在培養(yǎng)基同一半徑周?chē)么蚩灼魅≈睆綖? mm的菌絲塊，同時(shí)接種于無(wú)菌PDA平板（直徑90 mm）中，兩接種點(diǎn)相距40 mm，以不接種枇杷根際土壤真菌菌株作為對(duì)照，設(shè)3次重復(fù)，在28 ℃條件下恒溫培養(yǎng)，3 d后測(cè)定生防木霉菌株P(guān)3.9菌落直徑，計(jì)算其生長(zhǎng)抑制率。

2結(jié)果與分析

3討論

存在的真菌屬種對(duì)木霉生防菌株P(guān)3.9幾乎無(wú)影響。此結(jié)論與燕嗣皇[10]等研究結(jié)果一致。云南蒙自枇杷根腐病植株根際土壤真菌多樣性較豐富，共報(bào)道11個(gè)屬24個(gè)種[11]，其中，Absidia[12]、Acremonium[13]、Aspergillus[12]、Cladosporium[14]、Fusarium[15]、Penicillium[12]、Pythium[12]和Verticillium[16] 8個(gè)屬是植物病原真菌，其屬種對(duì)菌株P(guān)3.9的抑制率均在40%以下，反過(guò)來(lái)，菌株P(guān)3.9對(duì)其是否有抑制作用，有待進(jìn)一步研究。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[10]，較多的根際細(xì)菌對(duì)木霉生防菌產(chǎn)孢有較強(qiáng)的促進(jìn)作用，木霉在根際主要受放線菌的抑制。生防木霉菌株P(guān)3.9是否能在枇杷根際土壤中成功定殖，有待于研究枇杷根際土壤中的細(xì)菌、放線菌等微生物是否對(duì)其有較強(qiáng)的抑制作用。

參考文獻(xiàn)：

[1]潘瑋，穆常青，蔣細(xì)良，等. 木霉的孢子與土壤抑菌作用[J]. 中國(guó)生物防治，2006，22（2）：87-91.

[2]楊合同，唐文華，Ryder M. 木霉菌與植物病害的生物防治[J]. 山東科學(xué)，1999，4（4）：7-15，20.

[3]王國(guó)平，魯書(shū)玲，鄭必強(qiáng)，等. 內(nèi)生真菌紫杉木霉ZJUF0986菌株及其活性代謝產(chǎn)物防治水稻紋枯病的效果[J]. 中國(guó)生物防治，2009，25（1）：30-34.

[4]周淑香，李小宇，張連學(xué)，等. 6株木霉菌對(duì)人參銹腐病的防治效果[J]. 中國(guó)生物防治，2010，26（增刊）：69-72.

[5]朱廷恒，邢小平，孫順娣.木霉T97菌株對(duì)幾種植物病原真菌的拮抗作用機(jī)制和溫室防治試驗(yàn)[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2004，31（2）：139-144.

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[7]郭榮. 我國(guó)生物農(nóng)藥的推廣應(yīng)用現(xiàn)狀及發(fā)展策略[J]. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào)，2011，27（1）：124-127.

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[9]劉治剛. 玉米苗期根腐病生防木霉菌的篩選[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（9）：114-115.

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[12]張中義，冷懷瓊，張志銘，等. 植物病原真菌學(xué)[M]. 成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，1988：69-517.

[13]郭云忠，孫廣宇，高保衛(wèi)，等. 套袋蘋(píng)果黑點(diǎn)病病原菌鑒定及其生物學(xué)特性研究[J]. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2005，13（3）：23-26.

[14]張中義. 中國(guó)真菌志枝孢屬黑星孢屬梨孢屬[M]. 北京：科學(xué)出版社，2003，14：1-186.

[15]黃仲生，黃習(xí)軍，楊玉茹，等. 京郊黃瓜枯萎病病原菌鑒定初報(bào)[J]. 植物病理學(xué)報(bào)，1984，14（4）：249-251.

[16]張錦秀，于彥一，袁振五. 茄子黃萎?。╒erticillium dahliae）人工免疫研究初報(bào)[J]. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，1990，12（2）：128-132.

摘要：采用對(duì)峙培養(yǎng)法，測(cè)定105株枇杷根際土壤真菌對(duì)生防木霉菌株P(guān)3.9的抑菌作用。結(jié)果表明，抑制率 300%～39.9% 的菌株共5個(gè)，占供試菌株的4.8%；抑制率200%～29.9%的菌株共13個(gè)，占供試菌株的124%；抑制率100%～19.9%的菌株共45個(gè)，占供試菌株的42.9%；抑制率0%～9.9%的菌株共42個(gè)，占供試菌株的400%。結(jié)果表明，所有供試枇杷根際土壤真菌菌株對(duì)P3.9生防木霉菌株的抑制率均在40%以下，829%的供試菌株抑制率在0%～19.9%之間。枇杷根際土壤真菌菌株不影響P3.9生防木霉菌株在枇杷根際土壤中的定殖能力。

關(guān)鍵詞：枇杷；根際土壤真菌；抑菌作用；生防菌；定殖能力

中圖分類(lèi)號(hào)： S482.2+92 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）04-0106-02

收稿日期：2013-08-14

基金項(xiàng)目：國(guó)家科技基礎(chǔ)工作專(zhuān)項(xiàng)（編號(hào)：2006FY120100）；紅河學(xué)院博碩項(xiàng)目（編號(hào)：XJ1B0912）；云南省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)項(xiàng)目；紅河學(xué)院碩士點(diǎn)植物保護(hù)一級(jí)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目。

作者簡(jiǎn)介：沈云玫（1980—），女，云南彌勒人，碩士研究生，講師，主要從事微生物及生態(tài)研究。E-mail：sym_biology2@126.com。

通信作者：魯海菊，博士研究生，副教授，主要從事亞熱帶植物真菌分類(lèi)和真菌病害研究。E-mail：luhaiju2011@126.com。木霉（Trichoderma spp.）是真菌類(lèi)中最有潛力的生防菌株[1]，至少對(duì)18個(gè)屬29種病原真菌表現(xiàn)出一定的拮抗作用[2]，先后成功防治水稻紋枯病[3]、人參銹腐病[4]、番茄灰霉病[5]等植物病害，特別是在土傳病害防治，如番茄枯萎病[6]防治方面，發(fā)揮出比化學(xué)農(nóng)藥更好優(yōu)勢(shì)。盡管如此，我國(guó)生物農(nóng)藥的應(yīng)用發(fā)展緩慢甚至停滯不前[7]，主要原因是防治效果不穩(wěn)定，讓生防菌株在植物根際成功定殖是解決這一難題的方向之一。植物根際中存在大量微生物，真菌是根際微生物的成員之一，與木霉同類(lèi)，在空間、營(yíng)養(yǎng)及小生境等生存環(huán)境方面，兩者極其相似。根際土壤真菌自然與外來(lái)木霉菌株發(fā)生各種競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，木霉在競(jìng)爭(zhēng)中是否獲勝，關(guān)系到木霉是否能在植物根際定殖成功。本試驗(yàn)研究1株分離自枇杷韌皮部組織中的木霉菌株P(guān)3.9是否會(huì)受到枇杷根際土壤真菌的強(qiáng)烈抑制，從而影響在枇杷根中的成功定殖。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1供試菌株枇杷根際土壤真菌：從蒙自枇杷園區(qū)采集枇杷根際土壤，常規(guī)分離[8]獲得。生防木霉菌株P(guān)3.9：從蒙自枇杷園區(qū)采集枇杷根腐病植株韌皮部，常規(guī)組織分離獲得[8]，經(jīng)對(duì)峙培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)對(duì)石榴干腐病病菌及枇杷根腐病病菌有極強(qiáng)的抑制效果。

1.1.2供試培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g、葡萄糖 16 g、瓊脂粉 20 g、蒸餾水1 000 mL。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1對(duì)峙培養(yǎng)將已分離純化的枇杷根際土壤真菌和生防木霉菌株P(guān)3.9在PDA平板培養(yǎng)基中28 ℃恒溫?cái)U(kuò)大培養(yǎng) 5 d，采用對(duì)峙培養(yǎng)法[9]，將各供試菌株在培養(yǎng)基同一半徑周?chē)么蚩灼魅≈睆綖? mm的菌絲塊，同時(shí)接種于無(wú)菌PDA平板（直徑90 mm）中，兩接種點(diǎn)相距40 mm，以不接種枇杷根際土壤真菌菌株作為對(duì)照，設(shè)3次重復(fù)，在28 ℃條件下恒溫培養(yǎng)，3 d后測(cè)定生防木霉菌株P(guān)3.9菌落直徑，計(jì)算其生長(zhǎng)抑制率。

2結(jié)果與分析

3討論

存在的真菌屬種對(duì)木霉生防菌株P(guān)3.9幾乎無(wú)影響。此結(jié)論與燕嗣皇[10]等研究結(jié)果一致。云南蒙自枇杷根腐病植株根際土壤真菌多樣性較豐富，共報(bào)道11個(gè)屬24個(gè)種[11]，其中，Absidia[12]、Acremonium[13]、Aspergillus[12]、Cladosporium[14]、Fusarium[15]、Penicillium[12]、Pythium[12]和Verticillium[16] 8個(gè)屬是植物病原真菌，其屬種對(duì)菌株P(guān)3.9的抑制率均在40%以下，反過(guò)來(lái)，菌株P(guān)3.9對(duì)其是否有抑制作用，有待進(jìn)一步研究。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[10]，較多的根際細(xì)菌對(duì)木霉生防菌產(chǎn)孢有較強(qiáng)的促進(jìn)作用，木霉在根際主要受放線菌的抑制。生防木霉菌株P(guān)3.9是否能在枇杷根際土壤中成功定殖，有待于研究枇杷根際土壤中的細(xì)菌、放線菌等微生物是否對(duì)其有較強(qiáng)的抑制作用。

參考文獻(xiàn)：

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[5]朱廷恒，邢小平，孫順娣.木霉T97菌株對(duì)幾種植物病原真菌的拮抗作用機(jī)制和溫室防治試驗(yàn)[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2004，31（2）：139-144.

[6]田連生，王偉華，石萬(wàn)龍，等. 木霉對(duì)尖鐮孢菌的拮抗機(jī)制及生防效果研究[J]. 植物保護(hù)，2001，27（4）：47-48.

[7]郭榮. 我國(guó)生物農(nóng)藥的推廣應(yīng)用現(xiàn)狀及發(fā)展策略[J]. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào)，2011，27（1）：124-127.

[8]方中達(dá). 植病研究方法[M]. 3版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1998：124-125.

[9]劉治剛. 玉米苗期根腐病生防木霉菌的篩選[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（9）：114-115.

[10]燕嗣皇，吳石平，陸德清，等. 木霉生防菌對(duì)根際微生物的影響與互作[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2005，18（1）：40-46.

[11]楊若鵬，鄭肖蘭，田學(xué)軍，等. 云南蒙自枇杷根腐病植株根際土壤真菌多樣性研究[J]. 2012，32（12）：70-74.

[12]張中義，冷懷瓊，張志銘，等. 植物病原真菌學(xué)[M]. 成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，1988：69-517.

[13]郭云忠，孫廣宇，高保衛(wèi)，等. 套袋蘋(píng)果黑點(diǎn)病病原菌鑒定及其生物學(xué)特性研究[J]. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2005，13（3）：23-26.

[14]張中義. 中國(guó)真菌志枝孢屬黑星孢屬梨孢屬[M]. 北京：科學(xué)出版社，2003，14：1-186.

[15]黃仲生，黃習(xí)軍，楊玉茹，等. 京郊黃瓜枯萎病病原菌鑒定初報(bào)[J]. 植物病理學(xué)報(bào)，1984，14（4）：249-251.

[16]張錦秀，于彥一，袁振五. 茄子黃萎?。╒erticillium dahliae）人工免疫研究初報(bào)[J]. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，1990，12（2）：128-132.

摘要：采用對(duì)峙培養(yǎng)法，測(cè)定105株枇杷根際土壤真菌對(duì)生防木霉菌株P(guān)3.9的抑菌作用。結(jié)果表明，抑制率 300%～39.9% 的菌株共5個(gè)，占供試菌株的4.8%；抑制率200%～29.9%的菌株共13個(gè)，占供試菌株的124%；抑制率100%～19.9%的菌株共45個(gè)，占供試菌株的42.9%；抑制率0%～9.9%的菌株共42個(gè)，占供試菌株的400%。結(jié)果表明，所有供試枇杷根際土壤真菌菌株對(duì)P3.9生防木霉菌株的抑制率均在40%以下，829%的供試菌株抑制率在0%～19.9%之間。枇杷根際土壤真菌菌株不影響P3.9生防木霉菌株在枇杷根際土壤中的定殖能力。

關(guān)鍵詞：枇杷；根際土壤真菌；抑菌作用；生防菌；定殖能力

中圖分類(lèi)號(hào)： S482.2+92 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）04-0106-02

收稿日期：2013-08-14

基金項(xiàng)目：國(guó)家科技基礎(chǔ)工作專(zhuān)項(xiàng)（編號(hào)：2006FY120100）；紅河學(xué)院博碩項(xiàng)目（編號(hào)：XJ1B0912）；云南省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)項(xiàng)目；紅河學(xué)院碩士點(diǎn)植物保護(hù)一級(jí)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目。

作者簡(jiǎn)介：沈云玫（1980—），女，云南彌勒人，碩士研究生，講師，主要從事微生物及生態(tài)研究。E-mail：sym_biology2@126.com。

通信作者：魯海菊，博士研究生，副教授，主要從事亞熱帶植物真菌分類(lèi)和真菌病害研究。E-mail：luhaiju2011@126.com。木霉（Trichoderma spp.）是真菌類(lèi)中最有潛力的生防菌株[1]，至少對(duì)18個(gè)屬29種病原真菌表現(xiàn)出一定的拮抗作用[2]，先后成功防治水稻紋枯病[3]、人參銹腐病[4]、番茄灰霉病[5]等植物病害，特別是在土傳病害防治，如番茄枯萎病[6]防治方面，發(fā)揮出比化學(xué)農(nóng)藥更好優(yōu)勢(shì)。盡管如此，我國(guó)生物農(nóng)藥的應(yīng)用發(fā)展緩慢甚至停滯不前[7]，主要原因是防治效果不穩(wěn)定，讓生防菌株在植物根際成功定殖是解決這一難題的方向之一。植物根際中存在大量微生物，真菌是根際微生物的成員之一，與木霉同類(lèi)，在空間、營(yíng)養(yǎng)及小生境等生存環(huán)境方面，兩者極其相似。根際土壤真菌自然與外來(lái)木霉菌株發(fā)生各種競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，木霉在競(jìng)爭(zhēng)中是否獲勝，關(guān)系到木霉是否能在植物根際定殖成功。本試驗(yàn)研究1株分離自枇杷韌皮部組織中的木霉菌株P(guān)3.9是否會(huì)受到枇杷根際土壤真菌的強(qiáng)烈抑制，從而影響在枇杷根中的成功定殖。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1供試菌株枇杷根際土壤真菌：從蒙自枇杷園區(qū)采集枇杷根際土壤，常規(guī)分離[8]獲得。生防木霉菌株P(guān)3.9：從蒙自枇杷園區(qū)采集枇杷根腐病植株韌皮部，常規(guī)組織分離獲得[8]，經(jīng)對(duì)峙培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)對(duì)石榴干腐病病菌及枇杷根腐病病菌有極強(qiáng)的抑制效果。

1.1.2供試培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g、葡萄糖 16 g、瓊脂粉 20 g、蒸餾水1 000 mL。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1對(duì)峙培養(yǎng)將已分離純化的枇杷根際土壤真菌和生防木霉菌株P(guān)3.9在PDA平板培養(yǎng)基中28 ℃恒溫?cái)U(kuò)大培養(yǎng) 5 d，采用對(duì)峙培養(yǎng)法[9]，將各供試菌株在培養(yǎng)基同一半徑周?chē)么蚩灼魅≈睆綖? mm的菌絲塊，同時(shí)接種于無(wú)菌PDA平板（直徑90 mm）中，兩接種點(diǎn)相距40 mm，以不接種枇杷根際土壤真菌菌株作為對(duì)照，設(shè)3次重復(fù)，在28 ℃條件下恒溫培養(yǎng)，3 d后測(cè)定生防木霉菌株P(guān)3.9菌落直徑，計(jì)算其生長(zhǎng)抑制率。

2結(jié)果與分析

3討論

存在的真菌屬種對(duì)木霉生防菌株P(guān)3.9幾乎無(wú)影響。此結(jié)論與燕嗣皇[10]等研究結(jié)果一致。云南蒙自枇杷根腐病植株根際土壤真菌多樣性較豐富，共報(bào)道11個(gè)屬24個(gè)種[11]，其中，Absidia[12]、Acremonium[13]、Aspergillus[12]、Cladosporium[14]、Fusarium[15]、Penicillium[12]、Pythium[12]和Verticillium[16] 8個(gè)屬是植物病原真菌，其屬種對(duì)菌株P(guān)3.9的抑制率均在40%以下，反過(guò)來(lái)，菌株P(guān)3.9對(duì)其是否有抑制作用，有待進(jìn)一步研究。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[10]，較多的根際細(xì)菌對(duì)木霉生防菌產(chǎn)孢有較強(qiáng)的促進(jìn)作用，木霉在根際主要受放線菌的抑制。生防木霉菌株P(guān)3.9是否能在枇杷根際土壤中成功定殖，有待于研究枇杷根際土壤中的細(xì)菌、放線菌等微生物是否對(duì)其有較強(qiáng)的抑制作用。

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