陳常蓮 吳香杰 布和巴特爾 白金亮

(1. 內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000;2. 內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

懸鉤子木為薔薇科(Rosaceae)植物庫頁懸鉤子Rubus sachalinensis Leveille 的干燥莖枝;蒙藥名“博格日樂吉根”［1］，漢語名為珍珠干或懸鉤子木［1、2］。蒙醫(yī)藥文獻記載，味甘、苦，化味甘，治風(fēng)熱病、巴達干病、浮腫，治肺病特效，也治熱性時疫?！吨腥A人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·蒙藥分冊》記載，懸鉤子木具有解表、調(diào)元、止咳的功效;用于未熟熱，瘟疫，訌熱，感冒，肺熱咳嗽，氣喘，赫依熱［1、3］。依據(jù)蒙藥功效，本課題組經(jīng)藥理實驗證實，該藥對呼吸系統(tǒng)疾病有較好的治療作用。據(jù)文獻，該藥的水煎劑具有良好的鎮(zhèn)咳作用［4］。本實驗用不同溶劑提取，以期尋找懸鉤子木止咳的“有效部位”，為進而研究鎮(zhèn)咳祛談作用的物質(zhì)基礎(chǔ)提供藥效學(xué)依據(jù)。

1 材 料

1.1 動物: ICR 種小鼠，體重為18 ～22g，雌雄各半。購于長春市億斯實驗動物技術(shù)有限公司提供。

1.2 藥物: 蒙藥材懸鉤子木(批號: 20121015)，內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院;酚紅(批號: 20091107)，沈陽市試劑三廠;氨水、乙醇均為分析純。

1.3 儀器: HW-600 型三用恒溫水浴鍋，江蘇金壇市榮華儀器生產(chǎn)有限公司;DHG-9141N 型恒溫干燥箱，上海寶山精工電子儀器廠;酒精計，滄州市西北莊紅旗儀表廠;98 -1-B 型電子調(diào)溫電熱套，天津市泰斯特儀器有限公司;EYELA 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海愛郎儀器有限公司;FAX15 -4N電子天平，上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司;YLS -8A 多功能修咳引喘儀，準(zhǔn)北正華生物儀器設(shè)備有限公司;TG16-ws 臺式高速離心機，長沙湘儀離心機儀器有限公司;TC新世紀(jì)紫外可見分光光度計，北京普斯通用儀器有限公司;CSJ120 型粗碎機，丹東永德藥化機械制造有限公司。

2 方法與結(jié)果［5、6、7］

2.1 藥物提取: 取藥材80g，每次加10 倍量蒸餾水回流提取2 次，每次提取2h，得到水提取液Ⅰ，把水提液Ⅰ濃縮得到浸膏15.0957g;另取藥材80g，加10 倍量95%乙醇回流提取1 次，再用10 倍量75%乙醇回流提取2 次，每次提取的時間2h，將兩次的提取液合并，得到乙醇提液，濃縮得到浸膏12 g;乙醇提取的藥渣再加10 倍水量的回流提取2次，每次提取2h，得到水Ⅱ提取液，濃縮得到浸膏1.68g;把水Ⅱ提取浸膏和乙醇提取浸膏1: 1 合并，共得到四組浸膏。將得到的4 種浸膏用蒸餾水配制等生藥量(8.56g·kg-1)的藥液，備用。

2.2 小鼠氨水引咳實驗: 體重為18 ～22 小鼠50 只，雌雄各半。隨機分為5 組，每組10 只，分別為正常對照組、乙醇組、水Ⅰ組、水Ⅱ組、乙醇+水Ⅱ組等5 組，各組按生藥量高劑量(8.56g·kg-1)灌胃給藥7d，正常對照組灌胃給同劑量的生理鹽水。末次給藥半個小時后將小鼠置于多功能誘咳引喘儀內(nèi)，以恒壓將20%的氨水噴霧10s，觀察記錄各組小鼠引咳潛伏期以及小鼠2min 內(nèi)咳嗽(以腹肌強烈收縮，同時張大嘴為準(zhǔn))的次數(shù)。結(jié)果表明: 與正常組比較水Ⅰ組，乙醇組，乙醇+水Ⅱ組的咳嗽次數(shù)減少(P＜0.05，P＜0.01)，水Ⅱ組的咳嗽次數(shù)無沒有明顯變化(P＞0.05);與水Ⅰ組比較乙醇組和乙醇+水Ⅱ組的咳嗽次多數(shù)(P＜0.01，P＜0.05)，說明水Ⅰ組、乙醇組和乙醇+水Ⅱ組的鎮(zhèn)咳效果好。與正常組比較，水Ⅰ組、乙醇+水Ⅱ組的咳嗽潛伏期延長(P＜0.05)，說明以上兩組有延長潛伏期的作用。

表1 懸鉤子木對小鼠氨水引咳次數(shù)與潛伏期的影響(±s)

2.3 小鼠氣管酚紅實驗: 體重為18 ～22 小鼠50 只，雌雄各半。隨機分為5 組，每組10 只，分別為正常對照組、水Ⅰ組、乙醇組、水Ⅱ組、乙醇+水Ⅱ組等5 組，各組按生藥量高劑量(8.56g·kg-1)灌胃給藥7d，正常對照組灌胃給同劑量的生理鹽水。末次給藥30min 后腹腔注射2%酚紅生理鹽水溶液(0.1mL·10g-1)，25min 后脫臼處死，將小鼠仰位固定于手術(shù)板上剪開頸正中皮膚，分別剪下自甲狀軟骨至氣管分支處等長的一段氣管，放入3mL 生理鹽水的離心管中，加入5%碳酸氫鈉溶液0.1mL，離心(4000/min ，5min )取上清液。用分光光度計波長于546 nm 處測OD 值。結(jié)果表明，與正常組比較水Ⅰ組和乙醇組的吸光度測定值明顯升高(P＜0.05，P＜0.01)，說明以上兩個組有祛痰作用。與水Ⅰ組比較水Ⅱ組和乙醇+水Ⅱ組的吸光度小(P＜0.05，P＜0.01)，與乙醇組比較水Ⅱ組和乙醇+水Ⅱ組的吸光度沒明顯變化(P＞0.05)證明水Ⅰ組的祛痰效果最好。

表2 懸鉤子木不同提取物的祛痰作用的比較(±s)

3 討 論

3.1 蒙藥“湯劑”是把藥材粉碎混勻的粗粉，成人每次用量3 ～5g，加水250mL 微火煮至剩余1/3 水量，傾取湯液內(nèi)服。本實驗對懸鉤子木不同提取溶劑的研究結(jié)果顯示，懸鉤子木水提物的止咳作用最為明顯，驗證了傳統(tǒng)水煎用法的合理性。

3.2 本實驗進一步證實，懸鉤子木各種提取法中水提取物的鎮(zhèn)咳、祛痰的效果最好。本實驗為尋找懸鉤子木止咳、祛痰的“有效部位”及作用的物質(zhì)基礎(chǔ)提供藥效學(xué)依據(jù)。

［1］中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn).蒙藥分冊〔S〕.1998，42 -43.

［2］內(nèi)蒙古衛(wèi)生廳.內(nèi)蒙古蒙成藥標(biāo)準(zhǔn)〔S〕.赤峰: 內(nèi)蒙古科技出版社，1984: 252.

［3］羅布桑. 蒙藥學(xué)〔M〕. 呼和浩特: 內(nèi)蒙古人民出版社，2006: 205.

［4］吳香杰，布和巴特爾，扎蘇娜. 蒙藥材庫頁懸鉤子和毛接骨木抗炎鎮(zhèn)咳作用的藥理學(xué)研究〔J〕.內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(蒙醫(yī)藥學(xué))，2012，(22)1: 28.

［5］王海青，石靜麗，田軍. 浙貝止咳顆粒鎮(zhèn)咳祛痰及抗菌作用研究〔J〕.中國實驗方劑學(xué)雜志，2011，(17)16: 207-210.

［6］侯仙明，張凱.肉桂鎮(zhèn)咳祛痰及平喘作用的藥效學(xué)研究〔J〕.時珍國醫(yī)國藥，2009，(20)4: 831 -832.

［7］陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)［M］. 北京: 人民衛(wèi)生出版社，2000: 238 -244.