徐 玥，孫國平

（安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，安徽 合肥 230022）

血清胸苷激酶1在食管鱗癌中的應(yīng)用價(jià)值

徐 玥，孫國平

（安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，安徽 合肥 230022）

目的 探討血清胸苷激酶1（thymidine kinase 1，TK1）在食管鱗癌患者中的檢測水平及臨床意義。方法 利用免疫增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法共檢測100例食管鱗癌患者及60例健康成人血清 TK1（S-TK1）水平，40例患者術(shù)前及術(shù)后 TK1的變化，及100例患者血清TK1與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。結(jié)果 食管鱗癌組S-TK1陽性率（P＜0.01）及TK1值（P＜0.001）明顯高于健康對照組；術(shù)后組S-TK1陽性率（P＜0.01）及 TK1值（P＜0.001）均較術(shù)前組有所降低。TNMⅢ+Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者 S-TK1水平分別較Ⅰ+Ⅱ期（P＜0.05）、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P＜0.05）高。結(jié)論 血清S-TK1檢測在食管鱗癌患者的診斷、指導(dǎo)治療、判斷預(yù)后中均具有重要臨床意義。

胸苷激酶1；食管癌；腫瘤標(biāo)志物

食管癌發(fā)病率居中國各類惡性腫瘤第5位，死亡率居第4位。在我國，尤以食管鱗癌為主，食管鱗癌已成為我國衛(wèi)生部確定的十大特色腫瘤之一。隨著淋巴結(jié)清掃范圍擴(kuò)大、胸腔鏡技術(shù)應(yīng)用及放化療等綜合治療手段日益更新，食管癌患者生存率及生活質(zhì)量有所提高，但遠(yuǎn)期效果仍不盡如人意［1］。因此需要尋找更有效、更精確的早期篩查食管癌的方法，提高早期診斷率，進(jìn)而改善患者預(yù)后，延長生存期。TK1（胸苷激酶1）是一種與 DNA合成和修復(fù)密切相關(guān)的酶，在惡性腫瘤患者中，血清TK1（S-TK1）大于95%的活性是來自惡性細(xì)胞。因此，S-TK1是腫瘤細(xì)胞增殖的良好指標(biāo)［2］。

本實(shí)驗(yàn)利用免疫增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法共檢測100例食管鱗癌患者及60例健康成人血清 TK1，隨機(jī)抽取40例食管癌患者，隨訪其術(shù)后1個(gè)月血清 TK1。研究食管鱗癌患者與健康成人血清 TK1表達(dá)的差異，術(shù)前及術(shù)后 TK1的變化，及其與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本收集 食管鱗癌病例共100份，均來自安徽醫(yī)科大學(xué)2013年 3—9月經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)患者。其中男性 68例，女性32例，年齡為 37～79歲。健康對照組共60例，均來自我院健康志愿者，其中男性 40例，女性20例，年齡 22 ～60歲。健康志愿者排除心、肺、肝、腎等重要疾病及腫瘤病史，排除明顯增殖性疾病，如乳腺增生、前列腺增生、脂肪肝等，出血性外傷，女性排除生理期。所有樣本均為受檢者知情同意后采集。

1.2 方法 于清晨空腹采集受檢者靜脈血 2～4 mL（EDTA抗凝管），在3 h內(nèi)3 000 r·min-1離心 10 min，取上層血漿300～400 μL，轉(zhuǎn)移至EP管中，標(biāo)號(hào)并置于 -20℃冰箱保存?zhèn)錂z。采用深圳華瑞同康技術(shù)有限公司所提供的試劑盒及CIS-1型化學(xué)發(fā)光數(shù)字成像分析儀，利用免疫增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法檢測 TK1。TK1＞2 pmol·L-1判斷為陽性結(jié)果。

1.3 數(shù)據(jù)分析 使用 SPSS19.0軟件，所測數(shù)據(jù)計(jì)量資料采用均數(shù) ±標(biāo)準(zhǔn)差表示，均先行正態(tài)性檢驗(yàn)。正態(tài)資料的兩兩比較采用獨(dú)立樣本或配對樣本 t檢驗(yàn)，非正態(tài)資料則行秩和檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用常規(guī)或配對 χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 食管鱗癌組和健康對照組 S-TK1值的差異 食管鱗癌組 S-TK1陽性者73例，陽性率為 73%；健康對照組陽性者6例，陽性率為10%，食管癌組S-TK1陽性率明顯高于健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

2.2 術(shù)前組和術(shù)后組 S-TK1值的比較 在上述 100例食管鱗癌患者中隨機(jī)抽取 40例，統(tǒng)計(jì)其術(shù)前及術(shù)后 S-TK1陽性率見表 2，術(shù)后組 S-TK1陽性率（χ2＝19.36＞χ2（0.01，1）＝6.63，P＜0.01）明顯低于術(shù)前組。而術(shù)后組 S-TK1值（d± Sd＝1.27±1.55，P＜0.001）也較術(shù)前組有所降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

2.3 S-TK1值和 TNM分期與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系 TNMⅠ

+Ⅱ期 S-TK1值與Ⅲ+Ⅳ期相比較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組S-TK1水平較無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表1 各組 S-TK1值比較

表2 40例食管癌患者術(shù)前與術(shù)后 S-TK1陽性例數(shù)比較

表3 TNM分期與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與 S-TK1關(guān)系

3 討論

TK1是嘧啶補(bǔ)救途徑中的一種細(xì)胞周期依賴性酶，并可催化一磷酸胸苷磷酸化，生成脫氧胸苷的三磷酸鹽 dTTP （deoxy-thymidine-tri-phosphate）［3］。TK有兩種形式：一種是胞漿形式（TK1），另一種是線粒體形式（TK2）［4］。TK1在非增殖細(xì)胞中水平很低，但在增殖細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期中，從 G1晚期到 S晚期或G2早期顯著增加，在有絲分裂期消失［2，5］，這可能是因?yàn)槟[瘤細(xì)胞多在G2／S期死亡，而正常細(xì)胞多在 G1期死亡［6］。這使得 TK1成為細(xì)胞增殖和腫瘤生長的重要標(biāo)志。S-TK1活性已被用來監(jiān)測腫瘤轉(zhuǎn)移的程度，并判斷急、慢性白血病，肺癌、胃癌，膀胱癌和腎癌，乳腺癌和宮頸癌、惡性黑色素瘤等疾病的預(yù)后［7-8］。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示食管癌患者 S-TK1水平及陽性率均較健康對照組明顯升高，這與腫瘤負(fù)荷，造成細(xì)胞增殖旺盛有關(guān)。而術(shù)后1個(gè)月患者 S-TK1水平及陽性率較術(shù)前明顯降低，考慮為腫瘤負(fù)荷降低，細(xì)胞增殖率亦較術(shù)前有所降低導(dǎo)致。另外，TNM分期較晚，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者 S-TK1水平較高，推測也與細(xì)胞增殖密切相關(guān)。

過去的研究表明TK1水平可評估手術(shù)及放化療療效，監(jiān)測腫瘤局部及遠(yuǎn)處復(fù)發(fā)，因此在患者放化療過程中可進(jìn)行跟蹤檢測，以判斷放化療有效性，提高治療效率［9-10］。有研究證實(shí) S-TK1可預(yù)測乳腺癌患者無進(jìn)展生存期（progression-free survival，PFS），并且是總生存期（overall survival，OS）的獨(dú)立預(yù)后因素，顯示出S-TK1在判斷腫瘤患者預(yù)后方面的重要意義［11］。另外 TK1不具有器官特異性，已有相關(guān)報(bào)道指出，TK1結(jié)合器官或組織特異性的腫瘤標(biāo)志物，或者聯(lián)合3′-脫氧-3′-18F-氟代胸苷3′-deoxy-3′-［18F］-fluorothymidine（18F-FLT）PET／CT顯像共同監(jiān)測腫瘤疾病，可提高診斷的敏感性和特異性［12-14］，這為在體檢中進(jìn)行腫瘤的篩查提供了更便利的手段。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)由于觀察樣本量及隨訪時(shí)間的限制，對于 S-TK1作為血清腫瘤標(biāo)志物在全身多種腫瘤的診斷、療效評估、判斷預(yù)后、監(jiān)測復(fù)發(fā)等方面的應(yīng)用前景有待于進(jìn)一步研究拓展。

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Application value of thymidine kinase 1 in esophageal squamous cell carcinoma

XU Yue，SUN Guo-ping
（Department of Oncology，The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University，Hefei，Anhui 230022，China）

Objective To investigate the level and clinical significance of serum TK1 in patients with esophageal squamous cell carcinoma.Methods A hundred samples collected from esophageal cancer patients and 60 samples from healthy adults were measured for the level of serum TK1 by immune enhanced chemiluminescence method.Then the 40 patients’serum TK1 were compared before and after operation.Finally，we analyzed the correlation between the level of serum TK1 from 100 patients and the TNM stages，as well as lymph node metastasis.Results The positive rate（P＜0.01）and the level of TK1（P＜0.001）from esophageal cancer guoup and pre -operation group were higher than that from healthy group and post operation group，respectively.The level of TK1 fromⅢ+Ⅳstages and lymph node metastasis ones were also higher than that fromⅠ+Ⅱstages（P＜0.05）and lymph node metastasis-free ones（P＜0.05）.Conclusions Serum TK1 testing shows critical clinical significance in diagnosis，treatment and prognostic judgment of esophageal squamous cell carcinoma patients.

thymidine kinase 1（TK1）；esophageal cancer；tumor markers

10.3969／j.issn.1009-6469.2014.05.052

2013-11-29，

2013-12-28）

孫國平，男，主任醫(yī)師，博士生導(dǎo)師，研究方向：腫瘤個(gè)體化治療，E-mail：sunguoping＠ahmu.edu.cn