汪楠楠，周建理，楊青山

（安徽中醫(yī)藥大學(xué)，現(xiàn)代中藥安徽省重點實驗室，安徽 合肥 230031）

市售金銀花及其混偽品的微性狀鑒別

汪楠楠，周建理，楊青山

（安徽中醫(yī)藥大學(xué)，現(xiàn)代中藥安徽省重點實驗室，安徽 合肥 230031）

目的 對市場上銷售的金銀花藥材的真?zhèn)渭皳诫s情況進行微性狀鑒別分析。方法 采用中藥微性狀鑒定法對市場上銷售的金銀花進行真假混偽鑒別。結(jié)果 微性狀鑒別法可以準(zhǔn)確的鑒別出金銀花的真假及摻偽情況。結(jié)論 通過微性狀鑒別法，可以清楚地看出金銀花各部位的微性狀特征，為金銀花的質(zhì)量評價和金銀花與山銀花的區(qū)分提供直接依據(jù)。

金銀花；混偽品；微性狀鑒別

金銀花又名雙花，為忍冬科植物忍冬 Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或帶初開的花［1］，具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱之功效，用于癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風(fēng)熱感冒、溫?zé)岚l(fā)病。其用途極為廣泛，不僅是臨床上常用的一味中藥，也是北方許多地區(qū)作夏季茶飲的材料之一。山銀花的來源為忍冬科的不同植物，與金銀花的原植物是近緣種，性狀特征與金銀花相似，當(dāng)金銀花價格升高時，部分商家常以山銀花充當(dāng)金銀花進行銷售，謀取利潤。此外，由于金銀花表面的毛茸眾多，很容易吸附細小粉狀物質(zhì)，據(jù)了解一些不法商販常會在其中摻入一些雜質(zhì)，如明礬、鹽、滑石粉和石膏粉等異物以達到增重的目的。這些摻入雜質(zhì)的金銀花，其外觀、水分和灰分測定以及含量測定均不符合規(guī)定。傳統(tǒng)的鑒別方法鑒定金銀花的摻雜情況主要有手試、水試和理化鑒別，但有時往往較難準(zhǔn)確鑒別。對山銀花與金銀花的鑒定，目前常有的方法有性狀鑒別、顯微鑒別等。如徐鴻［2］等對 10種忍冬屬金銀花正品及其混淆品的花進行了性狀比較，并歸納了他們在花冠色澤、花冠被毛、花冠長度、萼筒、萼齒何花柱等上的區(qū)別。李正穎［3］對金銀花及 6個忍冬偽品的花的性狀鑒別和顯微鑒別做了詳細的介紹。耿世嘉［4］等利用光學(xué)顯微鏡及電子顯微鏡觀察金銀花及4種山銀花來源植物，并以它們的上下表皮，保衛(wèi)細胞長度、氣孔類型、氣孔指數(shù)上的差別為分種依據(jù)，以此區(qū)別并鑒定金銀花及山銀花。朱雅東［5］等使用掃描電鏡和光學(xué)顯微鏡對忍冬屬植物的花粉粒大小，萌發(fā)溝的形狀大小，花粉表面飾紋的區(qū)別進行了研究。另外，林永強［6］等利用高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測法（HPLC-ELSD）定性鑒別方法，對金銀花與山銀花及其制劑進行了區(qū)分鑒別研究。

為進一步對金銀花及其混偽品進行準(zhǔn)確鑒別，本文采用微性狀鑒定法，對市場上抽取的 20個批次的金銀花進行微性狀觀察和圖片拍攝，以對市售金銀花的真?zhèn)蝺?yōu)劣情況進行分析鑒別。中藥微性狀鑒定法是一種近年提出的鑒別方法，指借助儀器觀察中藥材的表面（包括斷面）肉眼不易察覺的細微性狀特征并以此作為鑒定依據(jù)。此種方法儀器簡單，鑒定快速，且有圖片可給出佐證。目前這種方法已在豨薟草［7］、葶藶子［8］和紫蘇子［9］等藥材及其混偽品的鑒別上進行了應(yīng)用，且鑒別結(jié)果清晰準(zhǔn)確。

1 儀器與材料

1.1 儀器 XSZ-G型生物顯微鏡、500萬像素電子攝像目鏡（MC-D500U，鳳凰光學(xué)集團）、電腦、鳳凰顯微圖像處理分析軟件（Phmias 2008 Cs ver3.0 Demo），PhotoshopCS4軟件程序、鑷子、載玻片、光源。

1.2 材料 市場銷售的金銀花藥材樣品 20批次，由安徽省藥檢所和亳州市藥檢所提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 方法

2.1.1 金銀花藥材的初步鑒定 分別將20批次的金銀花藥材選取適量，放在 XSZ-G型生物顯微鏡下觀察其花蕾表面，篩選出表面含有較多雜質(zhì)及異物的批次。

2.1.2 金銀花藥材樣品的制片 分別選取適量各批次的金銀花樣品，用溫水泡軟展開壓平，分別剪取金銀花的花萼，花蕾，花冠喉部和花藥置于載玻片上并用白乳膠固定。同時將篩選出的含雜質(zhì)較多的金銀花樣品選取適量置于載玻片上，用白乳膠固定。

2.2.3 微性狀觀察拍攝 將 XSZ-G型生物顯微鏡物鏡對準(zhǔn)篩選出含雜質(zhì)摻偽的金銀花樣品花蕾表面，以及要拍攝的各批次金銀花藥材的各個部位，打開電腦軟件，將500萬像素電子目鏡的 USB接口與電腦連接，調(diào)節(jié)光源強弱，使電腦上顯示的圖片顏色與觀察到的金銀花顏色一致。調(diào)節(jié)顯微鏡微調(diào)旋鈕，拍攝不同景深條件下的一系列圖片。

2.2.4 合成圖片 使用景深合成技術(shù)［10］將不同景深的微性狀圖片進行合成，得到金銀花各部位表面特征和金銀花摻偽品的微性狀鑒別特征圖片。

2.2 結(jié)果 經(jīng)過觀察拍攝，發(fā)現(xiàn) 20個批次的金銀花樣品中，有2個批次含有較多摻雜物，6個批次為山銀花充偽品。

圖1中，A-1、A-2分別為金銀花和山銀花花萼4倍鏡下微性狀鑒別特征圖。從圖中可看到金銀花和山銀花花萼萼片的邊緣均有緣毛。金銀花萼片邊緣緣毛較長，大都長于0.2 mm。山銀花萼片邊緣緣毛較短，大都短于0.1 mm，最長不超過0.2 mm。

圖2中，B-1、B-2分別為金銀花和山銀花花蕾表面4倍鏡下微性狀鑒別特征圖。從 B-1圖中可看到金銀花花蕾表面呈黃棕色，表面凹凸不平，有大量的腺毛以及厚壁的非腺毛存在，腺毛頂端有黃色至黃褐色圓球狀腺頭；而 B圖中山銀花花蕾表面綠黃色，較為光滑，幾乎無腺毛和非腺毛的存在。

圖1 金銀花與山銀花花萼4倍鏡下觀察圖

圖2 金銀花與山銀花花蕾表面4倍鏡下觀察圖

圖3 金銀花與山銀花花冠喉部4倍鏡下觀察圖

圖4 金銀花與山銀花花粉粒10倍鏡下觀察圖

圖5 兩個批次金銀花摻雜品花蕾4倍鏡下觀察圖

圖3中，C-1、C-2分別為金銀花和山銀花花冠喉部4倍鏡下微性狀特征圖。金銀花和山銀花花冠喉部及以下部位表面均具有大量的非腺毛，而喉部以上部位的非腺毛非常稀少。從C-1圖中可看到金銀花花冠喉部的非腺毛較長，相互交錯纏繞。C-2中山銀花花冠喉部的非腺毛則較短，最長不超過0.4 mm。

圖4中，D-1、D-2分別為金銀花和山銀花花藥10倍鏡下微性狀特征圖，可以清楚的看到花粉粒的表面特征。兩者的花粉粒均為黃色，類圓形，某些不成熟的花粉?？沙尸F(xiàn)類三角形和類多邊形。直徑約0.05 mm，花粉粒外壁表面可見細密斷刺及圓形細顆粒狀雕紋。金銀花與山銀花的花藥與花粉粒的微性狀特征無明顯區(qū)別。

圖5中 E-1、E-2為兩個批次的金銀花摻雜品。從E-1圖中可以看出金銀花表面有大量白色結(jié)晶狀物質(zhì)，較密實的覆蓋在腺毛與非腺毛之中。從 E-2圖中可看出金銀花表面同樣有粉樣摻雜物，摻雜物中存在黑色顆粒狀雜質(zhì)，散在的分布在腺毛與非腺毛當(dāng)中。

3 討論

金銀花是一味常用中藥，應(yīng)用特別廣泛，各版《中華人民共和國藥典》規(guī)定的金銀花的來源也在不斷的變化。1963年版《中華人民共和國藥典》首次收載金銀花，植物來源也僅有忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.一種。在 2005年版藥典以前的各部藥典中，金銀花的植物來源增加到了四種，直到2005年版《中華人民共和國藥典》將金銀花分列為金銀花和山銀花。目前的2010年版《中華人民共和國藥典》規(guī)定金銀花的來源為忍冬科植物忍冬 Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或帶初開的花；而山銀花的來源較多，為灰氈毛忍冬 Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.、紅腺忍冬 Lonicera hypoglauca Miq.、華南忍冬Lonicera confuse DC.或黃褐毛忍冬Lonicera fulvotomentosa Hsu et S.C.Cheng的干燥花蕾或帶初開的花。山銀花因與金銀花在原植物來源上不同，有效成分也不同，金銀花的有效成分以木犀草苷為主，山銀花則以綠原酸為主，因此它們?nèi)胨幒笮Ч灿胁顒e。但山銀花的野生資源相對較多，且在外觀性狀上與金銀花不易區(qū)分，許多不法商販在出售時用山銀花代替金銀花，不是專業(yè)的中藥從業(yè)人員很難對其進行準(zhǔn)確鑒別。

本文采用微性狀鑒別法對20個批次的金銀花藥材進行鑒別，鑒定結(jié)果清晰準(zhǔn)確。在 20批次的樣品中，有6個批次的為山銀花。經(jīng)鑒定 6個批次山銀花的植物來源均為灰氈毛忍冬Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.。金銀花的主要微性狀鑒別部位主要在其花萼萼片邊，花蕾表面，花冠喉部。金銀花的花萼萼片的緣毛，花冠喉部大量的非腺毛均明顯長于山銀花。金銀花花蕾表面存在大量的腺毛和非腺毛，且腺毛頂端有黃色至黃褐色圓球狀腺頭，而山銀花花蕾表面很少有腺毛和非腺毛的存在。

此外，近年來由于金銀花藥材的價格居高不下，在金銀花中摻入雜物的情況也較為嚴(yán)重，一般摻入量都很大。20個批次的樣品中，有2個批次的金銀花發(fā)現(xiàn)含有摻雜物，摻入雜質(zhì)為明礬、鹽、滑石粉和石膏粉等異物，摻雜較多的雜質(zhì)會影響金銀花的療效，甚至改變藥性及作用。采用微性狀鑒別法可以很直觀的看出有無摻雜和摻雜量的摻雜程度，能夠有效地檢出并反映金銀花的摻雜現(xiàn)象，這在基層醫(yī)藥單位對金銀花質(zhì)量的快速鑒定中具有很重要的意義，非常適合于在基層單位推廣使用。

［1］ 國家藥典委員會.中國藥典：一部［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：205-206.

［2］ 徐 鴻，劉曉芳，鄧?yán)^華.金銀花與其幾種易混淆藥材的性狀快速鑒別［J］.新疆中醫(yī)藥，2010，28（5）：40-42.

［3］ 李正穎.金銀花的真?zhèn)舞b別［J］.中國民族民間醫(yī)藥，2010，19 （8）：50-51.

［4］ 耿世幕，趙 最，姚飛平，等.金銀花與山銀花原植物葉表皮特征的比較研究［J］.中草藥，2006，37（12）：1869-1872.

［5］ 朱雅東，濮祖茂，徐國鈞，等.中藥金銀花花粉形態(tài)的研究［J］.中國藥科大學(xué)學(xué)報，1987，18（2）：81-88.

［6］ 林永強，王淑華，徐麗華，等.金銀花與山銀花的鑒別方法研究［J］.藥學(xué)研究，2013，32（2）：69-71.

［7］ 高飛燕，周建理.中藥豨薟草的微性狀鑒別［J］.中國中藥雜志，2013，38（3）：331-333.

［8］ 曹海燕，周建理，楊青山.葶藶子及其混偽品的微性狀鑒別［J］.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2012，26（4）：98-99.

［9］ 王雪利，周建理，楊青山.紫蘇子及其混偽品的微性狀對比鑒別［J］.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2013，27（1）：78-80.

［10］周建理，楊青山，曹海燕，等.景深合成技術(shù)在植物光學(xué)微形態(tài)研究上的應(yīng)用［J］.生物學(xué)通報，2011，46（9）：57-58，插頁1.

Micro-macroscopical identification of Lonicerae Japonicae Flos and its adulterants on the market

WANG Nan-nan，ZHOU Jian-li，YANG Qing-shan
（Anhui University of Chinese Medicine，Anhui Key Laboratory of Modern Chinese Medicine Hefei，Anhui 230031，China）

Objective To indentify Lonicerae Japonicae Flos and its adulterants sale on the market.Methods We used traditional Chinese medicine micro-macroscopical identification to identify Lonicerae Japonicae Flos and its adulterants sale on the market.Results Micro-macroscopical identification could clearly indentify Lonicerae Japonicae Flos and its counterfeits.Conclusions Micro-macroscopical identification can clearly observe the surface features of Lonicerae Japonicae Flos，which provides direct evidence for quality evaluation for Lonicerae Japonicae Flos and distinguishing between Lonicerae Japonicae Flos and Lonicerae Flos.

Lonicerae Japonicae Flos；adulterants；micro-morphological identification

10.3969／j.issn.1009-6469.2014.03.013

2013-10-14，

2013-11-28）

國家自然科學(xué)基金項目（No 81303177）

周建理，男，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：中藥鑒定和中藥資源研究，E-mail：jlzhou55＠sina.com