陳妙嬋,蔡葵
(佛山市第一人民醫(yī)院輸血科,廣東佛山528000)
·論著·
意外抗體篩查檢出抗“Mur”抗體的臨床意義
陳妙嬋,蔡葵
(佛山市第一人民醫(yī)院輸血科,廣東佛山528000)
目的 通過對“Mur”抗原的制備研究,探討意外抗體篩查檢出抗“Mur”抗體的臨床意義,為臨床選擇合適的血液,預防輸血反應(yīng),確保有效輸血及輸血安全。方法首先用含Mur抗原譜細胞篩查出抗“Mur”抗體,然后用該抗“Mur”抗體制備“Mur”抗原作為4號篩查細胞,用于輸血前的意外抗體篩查。結(jié)果8 200例抗體篩查中抗“Mur”抗體陽性68例,陽性率為0.83%。該68例患者中,33例有反復輸血史,26例有妊娠史,由于產(chǎn)生意外抗體而引起疑難配血者38例。結(jié)論意外抗體篩查檢出抗“Mur”抗體能有效提高臨床輸血安全,具有重要的臨床價值。
篩查;意外抗體;“Mur”抗原;抗“Mur”抗體
輸血前意外抗體篩查是臨床有效輸血的保障[1],目前國內(nèi)商品生產(chǎn)的意外抗體篩查的三種譜細胞普遍缺乏對低頻抗體抗“Mur”的篩檢。據(jù)有關(guān)文獻報道,Mur血型抗原在西方人群中為低頻抗原,大部份人群中抗原頻率為0.1%,但在熱帶東南亞地區(qū)卻有比較高的分布頻率,在亞洲地區(qū)患者當中,同種異體抗-Mur產(chǎn)生的頻率比較高。在我國南方人中Mur抗原頻率為2.07%;上海地區(qū)頻率為0.84%,均明顯高于白種人的<0.1%與黑種人的<0.1%[2]??埂癕ur”多為免疫產(chǎn)生的抗體,可以引起嚴重的溶血性輸血反應(yīng)[3],因此,檢出抗“Mur”抗體在我國特別是南方地區(qū)的臨床輸血安全有重要的臨床意義。我院輸血科在實際工作中嘗試應(yīng)用自制“Mur”抗原聯(lián)合商品篩查譜細胞,探討意外抗體篩查檢出抗“Mur”抗體的臨床意義,現(xiàn)報道如下:
1.1 標本采集2013年1~12月我院8 200例輸血病人均按規(guī)定進行輸血前意外抗體篩查。
1.2 主要檢測試劑與儀器上海血液生物責任公司生產(chǎn)提供的三種抗體篩選細胞(不含Mur抗原),上海血液生物責任公司生產(chǎn)提供的十種譜細胞(含Mur抗原)見表1,強生公司生產(chǎn)的微珠抗人球卡和ORTHOAUTOVUE全自動血型分析儀。
1.3 檢測方法首先用含Mur抗原的十種譜細胞篩查出抗“Mur”抗體,然后用該抗“Mur”抗體制備“Mur”抗原作為4號篩查細胞,聯(lián)合三種抗體篩選細胞用于輸血前的意外抗體篩查,見表2。
1.3.1 抗“Mur”抗體的制備選取我院HIV抗體、梅毒、丙肝抗體、乙肝抗原檢測陰性,自身抗體陰性的病人血清,上海血液生物責任公司生產(chǎn)的含Mur抗原十種譜細胞進行抗“Mur”抗體檢測,然后選取抗體滴度>1:128的血清制備成抗“Mur”抗體血清。
1.3.2 4號篩查細胞(“Mur抗原”)的制備用抗“Mur”抗體血清對“O”型健康獻血員的紅細胞進行篩選,取抗原抗體反應(yīng)超過3+的紅細胞作為4號篩查細胞,聯(lián)合三種抗體篩選細胞對我院輸血病人進行輸血前的意外抗體篩查,陽性者再用上海血液生物責任公司生產(chǎn)的十種譜細胞(含“Mur抗原”)進行抗體確認,同時用試管法做鹽水法和低離子凝聚胺法進行對照實驗。
1.3.3 4號篩查細胞的保存取4號篩查細胞按1 ml加400 μ l的SAGM紅細胞保存液的比例配置,放于4℃冰箱內(nèi)保存,保存期限為篩選出的“O”型健康獻血者原血袋的有效期內(nèi)。應(yīng)用時先搖勻4號篩查細胞,取5 ml的Bliss液加50μl 4號篩查細胞配制成濃度為0.8%的懸液,制備成4號篩查細胞聯(lián)合三種抗體篩選細胞對病人進行輸血前的意外抗體篩查。
1.3.4 意外抗體篩查向微珠抗人球卡加入用Bliss液配制成濃度為0.8%的四種篩查細胞50μl,然后加患者血清50 μl,用孵育儀37℃孵育15 min后,專用卡式離心機1 050 r/min離心5 min,肉眼判斷結(jié)果,紅細胞沉于底部者為陰性,懸浮于微珠表面或中斷者為陽性。同時作對照試驗:用患者自身血清加自身紅細胞做自身對照,以排除自身抗體造成的假陽性干擾,若自身抗體為陽性者的血清,用自身紅細胞吸收自身血清直至自身抗體陰性,然后再做意外抗體篩查。
8 200例進行輸血前意外抗體篩查的患者當中,68例為單一4號篩查細胞陽性,4例自身抗體陽性,經(jīng)自身紅細胞吸收試驗后再做意外抗體篩查為陰性,4號篩查細胞聯(lián)合其他篩查細胞陽性者5例。經(jīng)上海血液生物責任公司生產(chǎn)提供的十種譜細胞(含Mur抗原)進行抗體鑒定,68例患者血清均符合抗“Mur”抗體反應(yīng)格局,4號篩查細胞聯(lián)合其他篩查細胞陽性者5例患者血清,經(jīng)鑒定3例為抗-E抗體,1例為抗-Ce抗體,1例為抗-s抗體。68例患者血清與紅細胞分別用鹽水法和抗人球法進行對照實驗,其中29例鹽水法和抗人球法均陽性,39例僅為抗人球法陽性,表明29例患者抗“Mur”抗體含IgM型抗體,見表1、表2。
表1 十種譜細胞(含Mur抗原)反應(yīng)格局
表2 三種譜細胞加4號篩查細胞反應(yīng)格局
8 200例輸血前意外抗體篩查的患者中抗“Mur”抗體陽性68例,陽性率為0.83%,以IgG型抗體為主。在68例抗“Mur”抗體陽性的患者中,33例有反復輸血史,26例有妊娠史,由于意外抗體而引起疑難配血的有38例。
本文應(yīng)用自制4號篩查細胞聯(lián)合另外三種篩查細胞,對我院8 200例患者進行輸血前意外抗體篩查,再用含Mur抗原的譜細胞進行抗體鑒定,68例單一4號篩查細胞陽性鑒定為抗“Mur”抗體,4號篩查細胞聯(lián)合其他篩查細胞陽性5例,經(jīng)抗體鑒定3例為抗-E抗體,1例為抗-Ce抗體,1例為抗-s抗體,結(jié)果符合率達93%。8 200例意外抗體篩查抗“Mur”抗體68例,陽性率為0.83%。
由于反復輸血容易產(chǎn)生意外抗體而引起遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng),由于反復妊娠會導致流產(chǎn)和新生兒溶血病。輸血前進行意外抗體篩查是輸血安全的重要手段。《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》第十七條規(guī)定輸血前必須做意外抗體篩查,因此,輸血前篩查出患者是否存在血型意外抗體非常重要。在中國人群中紅細胞血型意外抗體出現(xiàn)最多的是Rh血型系統(tǒng),其次就是Miltenberger血型系統(tǒng)[4]。研究顯示,“Mur”抗原在亞洲人群中具有較高的分布頻率(5%~10%),泰國人為9.7%,我國香港和臺灣地區(qū)人群分別為6.28%和7.3%[5],鄧詩楨等報道番禺地區(qū)抗-“Mur”頻率為0.21%[6],說明“Mur”抗原有較高的分布頻率,抗-“Mur”發(fā)生率也有較高的比例,因此“Mur”抗原對于我國的臨床輸血有一定的臨床意義,應(yīng)當并已經(jīng)越來越受到臨床的重視。因此,在輸血前篩查項目中增加Miltenberger血型系統(tǒng)抗體對中國人群是十分必要的。
我院68例抗“Mur”抗體陽性的患者中,其中33例有反復輸血史,26例有妊娠史,由于產(chǎn)生意外抗體而引起疑難配血的有38例。由此可見意外抗體篩查檢出抗“Mur”抗體,能有效提高臨床輸血安全,具有重要的臨床價值。但由于實驗條件制約,自制篩查細胞的其他抗原存在不確定性,只能作為輸血相容性實驗檢測的借鑒與篩檢,不能作為確證試驗,目前在符合國家要求,可檢出低頻抗“Mur”抗體的商品化篩查細胞試劑推出市場前,能有效篩檢出我院輸血患者的抗“Mur”意外抗體,暫時彌補目前國內(nèi)意外抗體篩查細胞的不足,為日后推出包含“Mur”抗原的商品化篩查譜細胞生產(chǎn),提供有價值臨床參考數(shù)據(jù)。
[1]于笑難,周雪瑩,蘭炯采.輸血前3項試驗在疑難配血工作中的應(yīng)用[J].中國輸血雜志,2013,26(1):5-6.
[2]黃秀瓊,陳麗瓊,鈕榮祥,等.云南怒族稀有血型MNSs系統(tǒng)-(Mur)抗原抽樣調(diào)查分析[J].大理學院商報,2004,(01):39-40.
[3]閆文強,周金安,劉慧芳.抗-Mur1例及抗-S1例[J]臨床血液學雜志,2011,24(2):122-123.
[4]劉達莊,朱自嚴,Byrne P,等.低頻率抗體抗-“Mur”引起的溶血性輸血反應(yīng)[J]中國輸血雜志,2000,(01):8-10.
[5]劉忠,孫愛農(nóng),譚方圓,等.“Mur”血型分子診斷方法的建立與應(yīng)用[J].中國輸血雜志,2009,(10):793-795.
[6]鄧詩楨,嚴康峰,謝敬文.番禺地區(qū)“Mur”抗原與抗-“Mur”頻率調(diào)查[J].中國輸血雜志,2010,23(3):218.
Clinical significance of unexpected antibody screening with detection of anti-Mur antibody.
CHEN Miao-chan, CAI Kui.Blood Transfusion Department,the First People's Hospital of Foshan,Foshan 528000,Guangdong,CHINA
ObjectiveTo investigate the clinical significance of unexpected antibody screening with detection of anti-Mur antibody by preparation of Mur antigen,for the purpose of selecting the appropriate blood for clinical transfusion,preventing the transfusion reaction and assuring the safety and efficiency in clinical transfusion.MethodsFirst,with panel cells containing Mur antigen,we screened out anti-Mur antibody.Then,we prepared the Mur antigen as new sieve cells used in unexpected blood screening before transfusion.ResultsTotally 68(0.83%) samples were positive among 8 200 samples by antibody screen test.Of the 68 cases,33 cases had a history of repeated transfusion,26 cases had a history of pregnancy and 38 cases had difficulty of blood matching because of the unexpected antibody.ConclusionScreening of unexpected antibody(anti-Mur)could effectively improve the safety of clinical transfusion,which is of great clinical value.
Screening;Unexpected antibody;Mur antigen;anti-Mur antibody
R446.11
A
1003—6350(2014)21—3186—03
10.3969/j.issn.1003-6350.2014.21.1249
2014-02-28)
陳妙嬋。E-mail:cmchan1048@163.com