楊 平，曾蔚欣，孫路路

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院，北京100038)

雙波長分光光度法用于氯霉素并水楊酸體系的含量測定研究*

楊 平，曾蔚欣，孫路路

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院，北京100038)

目的:改進復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素的含量測定方法。方法:采用雙波長紫外分光光度法測定氯霉素的含量，且不需進行額外的樣品處理過程。結(jié)果:氯霉素測定的線性范圍為2.5～20 μg/ml(r=0.999 9);低、中、高濃度的回收率分別為99.25%、100.87%和98.81%。結(jié)論:雙波長紫外分光光度法用于測定復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素的含量，與現(xiàn)行的重氮滴定法比較，方法準(zhǔn)確，簡便易行，適用于醫(yī)院制劑的快檢要求。

雙波長紫外分光光度法，氯霉素，含量測定

復(fù)方氯霉素洗劑是醫(yī)院制劑品種，可止癢、殺菌、消炎，用于治療脂溢性伴毛囊型皮炎，其中氯霉素的含量測定方法在《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》［1］中規(guī)定為重氮滴定法，其樣品的處理需煮沸15 min，過濾，過程煩瑣，且使用淀粉碘化鉀試紙指示滴定終點，結(jié)果受人為因素及試紙質(zhì)量的影響較大，終點不易掌握。由于處方中還含有水楊酸，具有紫外吸收，影響氯霉素的測定，故有文獻(xiàn)報道用HPLC法進行測定［2，3］。由于醫(yī)院制劑的檢驗需要快速、準(zhǔn)確，本文經(jīng)反復(fù)驗證，采用雙波長分光光度法，消除水楊酸對氯霉素測定的干擾，且不需額外的樣品處理過程，快速簡便，質(zhì)量可控。

1 儀器與試藥

1.1 儀器HP8453型紫外可見分光光度計，惠普公司;GB 630型分析天平。

1.2 試藥氯霉素(梯希愛化成工業(yè)發(fā)展有限公司，批號Q2X7D－GE);水楊酸(分析純);復(fù)方氯霉素洗劑(本院自制，批號20120826、20121106、20121207、20120709、20130106);水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液的制備氯霉素儲備液:精密稱取氯霉素0.25 g于100 ml量瓶中，加乙醇20 ml溶解，加水至刻度，搖勻，得到濃度為2.5 mg/ml的溶液，再取該溶液10 ml于100 ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，得到濃度為0.25 mg/ml的儲備液。水楊酸儲備液:精密稱取水楊酸0.5 g于100 ml量瓶中，加乙醇20 ml溶解，加水至刻度，搖勻，得到濃度為5.0 mg/ml的溶液，再取該溶液10 ml于100 ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，得到濃度為0.5 mg/ml的儲備液。

2.2 對照品溶液的制備精密量取各2 ml儲備溶液，置50 ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。氯霉素及水楊酸濃度分別為10 μg/ml和20 μg/ml。

2.3 陰性對照液的配制取處方量的其他成分(含薄荷腦、甘油)，制成100 ml的溶液，備用。

2.4 測定條件的確定取陰性對照液1 ml，置100 ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，作為空白對照液，在200～600 nm波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果顯示其在此波長范圍內(nèi)無吸收。分別取氯霉素對照品溶液(含氯霉素10 μg/ml)及水楊酸對照品溶液(含水楊酸20 μg/ml)，在200～600 nm波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果氯霉素在278 nm波長處有最大吸收，故選擇278 nm為氯霉素的測定波長。水楊酸對照品溶液在278 nm處的吸收度為0.226 1，依據(jù)水楊酸的紫外吸收曲線，尋找與278 nm處吸收度最接近的波長為312 nm處，其吸收值為0.229 9，故選擇312 nm為測定氯霉素的參比波長，見圖1。

2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取5份水楊酸儲備液2 ml，分別置于50 ml的量瓶中，再依次精密加入氯霉素標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液0.5、1、2、3和4 ml，加純化水至刻度，搖勻。分別在278 nm及312 nm處測定A1及A2，以ΔA= A1－A2對濃度(C)作線性回歸，得到回歸方程為:ΔA= 0.019 2 C－0.012 5(R2=0.999 8)，線性范圍為2.5～20 μg/ml。

圖1 氯霉素及水楊酸的紫外吸收圖

2.6 回收率試驗精密量取9份水楊酸儲備液2 ml，分別置于50 ml的量瓶中，再依次精密加入氯霉素儲備液1.6、2和2.4 ml，加純化水至刻度，搖勻，每一濃度進行3樣本分析。分別在278 nm及312 nm處測定A1、A2，計算ΔA，按“2.5”項下的回歸方程計算氯霉素的含量。結(jié)果平均回收率為99.64%，RSD為1.27%，見表1。

表1 氯霉素回收率測定結(jié)果

2.7 兩種方法測定氯霉素含量的比較按“2.2”項下方法準(zhǔn)確量取5個批號的樣品，按照重氮滴定法及雙波長法分別進行含量測定，兩種方法測得結(jié)果間無顯著性差異，見表2。

表2 兩種方法樣品含量測定結(jié)果比較

3 討論

目前復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素的含量測定方法是《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》收載的重氮滴定法。操作比較煩瑣費時，其樣品的處理需煮沸15 min，過濾;且用碘化鉀淀粉試紙劃痕判斷終點受試紙質(zhì)量及環(huán)境溫度的影響較大;同時終點的判斷更與操作人員的視覺及經(jīng)驗有關(guān)，容易產(chǎn)生較大誤差。應(yīng)用雙波長紫外分光光度法可消除水楊酸對氯霉素測定的干擾［4］，本文的改進之處在于水楊酸的測定仍采用中和滴定法，經(jīng)典，準(zhǔn)確，快速;氯霉素的測定采用雙波長法，方法學(xué)研究結(jié)果符合含量測定的要求，其在更廣的范圍內(nèi)(2.5～20 g/ml)具有較好的線性。在具體測定中僅需精密量取5 ml復(fù)方氯霉素洗劑，置100 ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，再取該溶液1 ml，置50 ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，作為供試品溶液。以水為空白，在278 nm及312 nm處測定A1及A2，ΔA=A1－A2計算，將結(jié)果代入回歸方程，計算即得氯霉素的濃度。該方法的最大優(yōu)點在于大大節(jié)省了測定的時間成本，結(jié)果受人為及環(huán)境因素影響很小。本文通過測定5批樣品將雙波長法與滴定法測定的結(jié)果進行了比較及統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果顯示，兩種方法測得的結(jié)果間無顯著性差異。可見雙波長法不但快速，并且準(zhǔn)確，結(jié)果重現(xiàn)性好，適合醫(yī)院制劑的快檢要求。

1中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局.中國醫(yī)院制劑規(guī)范(二版)［Z］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，1996:103

2楊輝，崔愛瑛.HPLC法測定復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素和水楊酸的含量［J］.解放軍藥學(xué)學(xué)報，2007，23(6):470－472

3馮碧敏，陳麗娟，張昊.HPLC法測定復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素和水楊酸的含量［J］.瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2005，28(4):363－364

4管玫，李開蘭，謝智遠(yuǎn).雙波長分光光度法測定復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素及水楊酸的含量［J］.華西藥學(xué)雜志，1992，7(2):116－118

Determination of chloramphenicol in compound chloramphenicol lotion by dual wavelength UV spectrophotometry

Yang Ping，Zeng Weixin，Sun Lulu
(Beijing Tiantan Hospital Affiliated to Capital Medical University，Beijing 100038)

Objective:To Improve the method of determination of chloramphenicol in compound chloramphenicol lotion.Methods:Dual wavelength UV spectrophotometry was used to directly determine the chloramphenicol without any additional processing.Results:The linear range is 2.5～20 μg/ml(r=0.999 9)，the recovery of chloramphenicol from the high，medium and low levels of chloramphenicol solution was 99.25%，100.87%and 98.81%，respectively.Conclusions:The method of dual wavelength UV spectrophotometry for the determination of chloramphenicol in compound chloramphenicol lotion is accurate，simple and suitable for hospital preparations.

dual wavelength UV spectrophotometry，chloramphenicol，content determination

R927.11

A

1006-5687(2014)01-0022-03

2013-11-20

首都衛(wèi)生發(fā)展科研專項(No.2011－2008－01)