宋超 趙靜 嵇紹干

目前, 奧沙利鉑仍是推薦應(yīng)用的一線胃腸道腫瘤化療藥物, 但是, 奧沙利鉑可導(dǎo)致嚴(yán)重的外周神經(jīng)病變和痛覺(jué)過(guò)敏現(xiàn)象, 在很大程度上限制了鉑類(lèi)化療藥的應(yīng)用［1］。遺憾的是,目前鎮(zhèn)痛藥物并不能有效緩解化療藥物導(dǎo)致的疼痛性神經(jīng)病變［2］。本文旨在尋找能安全有效緩解化療后疼痛的藥物。在前期篩選中, 作者發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)中藥黃芩的活性提取物黃芩苷可能有效。黃芩苷具有抗炎、抗氧化、鎮(zhèn)靜以及抗腦損傷等多種有益的作用［3,4］, 并且還能顯著緩解神經(jīng)損傷導(dǎo)致的難治性神經(jīng)病理性疼痛［5］。黃芩苷能否緩解奧沙利鉑導(dǎo)致的痛覺(jué)過(guò)敏？將在下文中詳細(xì)探討。

1 材料與方法

1.1 材料 成年健康雄性SD大鼠(徐州醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心), 體重180～220 g, 清潔級(jí), 12 h明暗交替飼養(yǎng), 自由進(jìn)食進(jìn)水。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前, 至少適應(yīng)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)條件1周。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器來(lái)源 奧沙利鉑購(gòu)自南京制藥廠有限公司(批號(hào)20100703)；黃芩苷, 純度95%, 購(gòu)自南京澤朗植提技術(shù)有限公司；7-NI購(gòu)自美國(guó)sigma公司；熱敏測(cè)痛儀購(gòu)自美國(guó)harvard公司。

1.3 奧沙利鉑誘導(dǎo)的疼痛模型建立 參考國(guó)外學(xué)者的實(shí)驗(yàn)方法［6］, 奧沙利鉑溶解于5%的葡萄糖水中, 現(xiàn)用現(xiàn)配。給大鼠奧沙利鉑4 mg·kg-1腹腔注射, 每周連續(xù)注射2 d, 間隔5 d, 共3個(gè)周期。建立化療藥物誘導(dǎo)的疼痛模型。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為四組, 模型對(duì)照組(奧沙利鉑, 腹腔注射4.0 mg·kg-1), 黃芩苷治療組(在注射奧沙利鉑前, 鞘內(nèi)注射黃芩苷 40 μg ·10 μl-1), 7-NI治療組 (在注射奧沙利鉑前 , 鞘內(nèi)注射7-NI 40 μg·10 μl-1)和空白對(duì)照組(僅接受與注射奧沙利鉑同等體積的5%葡萄糖水)。

1.4 熱痛覺(jué)過(guò)敏測(cè)定 按照文獻(xiàn)方法測(cè)定各組大鼠熱刺激縮足反射閾值 (thermal withdrawal threshold, TWT)［7］。各組大鼠在接受奧沙利鉑和/或黃芪苷等處理后的第7、14、21天時(shí), 用熱敏儀刺激大鼠后足, 記錄后足抬起時(shí)的讀數(shù)值,每只大鼠接受刺激5次, 每次間隔>10 min, 記錄后4次測(cè)定的平均值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用SPSS15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析, 計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn), 組間差異比較采用單因素方差分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)取α=0.05。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 黃芩苷可以模擬nNOS抑制劑7-NI的作用 顯著減輕奧沙利鉑誘導(dǎo)的熱痛覺(jué)過(guò)敏行為學(xué)顯示, 與注射奧沙利鉑之前相比, 奧沙利鉑注射后第7、14、21天, 大鼠對(duì)于熱刺激縮足的反應(yīng)閾值顯著縮短(P<0.01), 說(shuō)明長(zhǎng)期應(yīng)用奧沙利鉑,可以誘發(fā)大鼠熱痛覺(jué)過(guò)敏的現(xiàn)象。黃芩苷治療組與相應(yīng)天數(shù)的模型對(duì)照組比較, 熱痛覺(jué)過(guò)敏的現(xiàn)象顯著減輕(P<0.01或P<0.05), 并且與7-NI的治療作用相類(lèi)似, 見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠熱刺激縮足反射閾值比較( ±s)

表1 各組大鼠熱刺激縮足反射閾值比較( ±s)

注：a與自身基礎(chǔ)值比較, P< 0.01, b與模型對(duì)照組比較, P< 0.05, c與模型對(duì)照組比較, P< 0.01

基礎(chǔ)值 第7天 第14天 第21天空白對(duì)照組 12.61±2.41 12.42±1.85 11.54±2.64 11.60±1.47模型對(duì)照組 11.82±2.25 7.46±3.11a 5.74±2.11a 5.21±1.26a黃芩苷治療組 12.24±2.97 9.41±1.32b 8.79±3.11c 7.12±1.14c 7-NI治療組 11.94±1.46 9.22±2.54b 8.43±2.13c 7.45±0.89c

3 討論

鉑類(lèi)化療藥物導(dǎo)致痛覺(jué)過(guò)敏的現(xiàn)象是其臨床常見(jiàn)的副作用之一, 患者通常痛苦不堪。本文發(fā)現(xiàn), 黃芩苷能夠抑制奧沙利鉑導(dǎo)致的熱痛覺(jué)過(guò)敏, 提示黃芪苷可能對(duì)于奧沙利鉑導(dǎo)致的CIPN具有很好的治療作用。作者仍想知道的是黃芩苷抑制奧沙利鉑導(dǎo)致的熱學(xué)痛覺(jué)過(guò)敏的機(jī)制。

研究發(fā)現(xiàn), 化療藥物導(dǎo)致脊髓水平一氧化氮水平升高,nNOS和cGMP蛋白水平升高, 可能是導(dǎo)致痛覺(jué)過(guò)敏產(chǎn)生的重要因素［8］, 并且在疼痛信號(hào)的初級(jí)整合中心——脊髓部位給予nNOS的抑制劑7-NI, 可以減輕長(zhǎng)春新堿誘導(dǎo)的外周神經(jīng)疼痛的癥狀［9］。這說(shuō)明, 脊髓NO可能促進(jìn)了化療藥物神經(jīng)病理性疼痛的產(chǎn)生。本文發(fā)現(xiàn), 黃芩苷可模擬7-NI的作用,抑制奧沙利鉑導(dǎo)致的熱痛覺(jué)過(guò)敏。這說(shuō)明, 黃芩苷可能通過(guò)抑制脊髓NO的合成從而減輕了CIPN的程度。鑒于黃芩苷的安全性和有效性, 這一研究成果可能對(duì)于臨床緩解鉑類(lèi)化療使用患者的痛苦具有一定的臨床實(shí)用價(jià)值。

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