孫靜陽(yáng)* 胡 波 裴笑月 呂 申

（大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，遼寧 大連 116021）

P53、C-erbB-2蛋白在結(jié)、直腸癌中表達(dá)的意義

孫靜陽(yáng)* 胡 波 裴笑月 呂 申

（大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，遼寧 大連 116021）

目的 回顧性分析P53、C-erbB-2蛋白的表達(dá)與CRC（結(jié)、直腸癌）臨床病理特征的關(guān)系，探討其用于評(píng)估CRC生物學(xué)行為及預(yù)后的可行性。方法 手術(shù)切術(shù)標(biāo)本270例，免疫組化檢測(cè)P53、C-erbB-2蛋白的表達(dá)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 P53蛋白陽(yáng)性率為63.33%（171/270），陽(yáng)性檢測(cè)率歲腫瘤直徑增加而降低，對(duì)比分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。C-erbB-2蛋白表達(dá)率為5.19%（14/270）。P53與C-erbB-2蛋白的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)關(guān)系（P＞0.05）。結(jié)論 突變型P53可能主要在腫瘤的初期階段發(fā)揮促進(jìn)腫瘤形成的作用；CRC中僅有少數(shù)表達(dá)C-erbB-2蛋白；P53與C-erbB-2蛋白的異常表達(dá)是相互獨(dú)立的分子事件。

P53；C-erbB-2；結(jié)、直腸癌；免疫組化

大腸癌又稱結(jié)、直腸癌（CRC），是較為常見(jiàn)一種的消化道惡性腫瘤。它的發(fā)病率和病死率在世界范圍內(nèi)常年居高不下。本研究通過(guò)大樣本量回顧性分析P53、C-erbB-2蛋白在CRC中的表達(dá)，探討這兩種蛋白用于評(píng)估CRC生物學(xué)行為及預(yù)后的可行性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集月2011年1月至12月在大連大學(xué)附屬新華醫(yī)院手術(shù)做切除手術(shù)后，且病理診斷為CRC（結(jié)、直腸癌）標(biāo)本270份為研究對(duì)象。男150例，女120例。年齡35～89歲，平均年齡63.08歲，＜40歲5例，40～70歲180例，＞70歲85例。發(fā)生在直腸192例；遠(yuǎn)端結(jié)腸（乙狀結(jié)腸和降結(jié)腸）47例；近端結(jié)腸31例。大體形態(tài)：潰瘍型和隆起型分別為221例和49例。病理組織學(xué)分級(jí)：分化較好220例（包括高分化、中分化腺癌），分化較差50例。腫物直徑：≤2 cm組17例；＞2 cm、≤5 cm組163例；＞5 cm組90例。浸潤(rùn)深度：累及臨近器官或浸透腸壁漿膜層21例；侵及腸壁全層190例；侵及肌層54例；侵及黏膜下層5例。淋巴結(jié)狀況：淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、無(wú)轉(zhuǎn)移133例和137例。

1.2 免疫組化SP法

1.2.1 試劑及來(lái)源

試劑均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司，主要有：P-gp單克隆抗體、C-erbB-2單克隆抗體和突變型P53單克隆抗體。

1.2.2 染色結(jié)果的判定

P53蛋白只要在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)，依據(jù)細(xì)胞著色程度和陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)所占比例將其依次分成五級(jí)：陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞數(shù)低于10%，細(xì)胞無(wú)明顯著色，記為“-”；陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)水平在10%～25%之間，著色呈現(xiàn)淡黃色，記為“+”；陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)水平在25%～50%之間，細(xì)胞著色黃色，記為“++”；陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)水平在50%～75%，細(xì)胞著色呈現(xiàn)棕黃色或黃色，記為“+++”；陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)水平在75%以上，且細(xì)胞著色呈現(xiàn)為棕黃色粗顆粒狀，記為“++++”。其余蛋白表達(dá)依次同上。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0對(duì)上述數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 P53蛋白表達(dá)情況

研究發(fā)現(xiàn)P53蛋白表達(dá)檢測(cè)為陰性和陽(yáng)性患者數(shù)依次為99例（36.67%）和171例（63.33%）；可以發(fā)現(xiàn)P53蛋白陽(yáng)性檢測(cè)率隨著腫瘤直徑的增加而依次遞減；依據(jù)腫物直徑分組進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；然而隨著腫瘤直徑的增加，其“-”表達(dá)率依次增加，而“++++”依次遞減，這說(shuō)明腫瘤直徑越小，P53蛋白表達(dá)越豐富，強(qiáng)度越大，而隨著腫瘤直徑的增加，其表達(dá)強(qiáng)度會(huì)逐漸降低；但A組和B組、B組C組在該指標(biāo)對(duì)比上，均無(wú)明顯差異（P＞0.05）；而A組和C組對(duì)比具有顯著行差異（P＜0.05）。詳細(xì)見(jiàn)表1。

2.2 C-erbB-2蛋白表達(dá)及與P53之間的關(guān)系

檢測(cè)發(fā)現(xiàn)C-erbB-2蛋白表達(dá)為“+”（陽(yáng)性）和“-”（陰性）的人數(shù)依次為而14和256例，所占比例依次為5.19%和94.81%；通過(guò)對(duì)該蛋白表白和P53蛋白表達(dá)二者之間的關(guān)系進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，二者之間并無(wú)明顯的相關(guān)性，兩變量關(guān)聯(lián)性分析檢驗(yàn)P值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，詳細(xì)見(jiàn)表2。

3 討 論

表1 不同直徑腫瘤中P53蛋白表達(dá)強(qiáng)度的分布（例）

表2 P53與C-erbB-2蛋白在CRC中表達(dá)的關(guān)系

3.1 P53蛋白表達(dá)與CRC臨床病理特征的關(guān)系

有研究顯示CRC中P53蛋白的表達(dá)率在26%～67%[1]，本組研究結(jié)果顯示為63.33%，這該報(bào)道內(nèi)容基本相符。P53蛋白在CRC中的表達(dá)和預(yù)后的關(guān)系較為復(fù)雜；有學(xué)者認(rèn)為P53蛋白表達(dá)和腫瘤細(xì)胞分化的輕重程度有直接聯(lián)系；而有研究報(bào)道認(rèn)為其與腫瘤細(xì)胞的分化程度、浸潤(rùn)深度及直徑并無(wú)明顯聯(lián)系，可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)[2]，目前為止尚未定論。從人體生理的角度上看，CRC的發(fā)生及變化是多種因素相互作用的結(jié)果，但突變型P53蛋白是否能作為獨(dú)立指標(biāo)來(lái)評(píng)估生物學(xué)行為及預(yù)后還有待研究進(jìn)行佐證；本研究發(fā)現(xiàn)隨著腫瘤直徑的增大，P53蛋白表達(dá)陽(yáng)性檢測(cè)率下降，表達(dá)強(qiáng)度減弱，A組和C組之間對(duì)比差異性非常明顯，也就是說(shuō)該蛋白表達(dá)強(qiáng)度會(huì)隨著腫瘤的生長(zhǎng)而減弱。由此可見(jiàn)，在腫瘤病變初期，突變型P53的作用性會(huì)增強(qiáng)，而隨著腫瘤直徑變大，P53的作用性逐漸減弱；同樣在組織分化相對(duì)較好的組織中，檢測(cè)出的P53蛋白表達(dá)程度明顯高于組織分化較差者，這意味著P53蛋白的表達(dá)對(duì)腫瘤良好分化有著積極的作用。腫瘤的大小雖然與患者病癥的預(yù)后有著緊密的相關(guān)性，但并不具備特異性，且該相關(guān)性并不足以證明P53可以作為預(yù)后的判斷指標(biāo)。

3.2 C-erbB-2蛋白表達(dá)與CRC臨床病理特征的關(guān)系

本實(shí)驗(yàn)中C-erbB-2蛋白在CRC中的表達(dá)部位和乳腺癌并不相同，其主要位于細(xì)胞質(zhì)，另外少部分存在于細(xì)胞膜，這和李強(qiáng)等人研究結(jié)果基本保持一致。同時(shí)C-erbB-2蛋白在CRC中的陽(yáng)性率各研究報(bào)道差異較大。造成此差異可能與所用試劑、判定標(biāo)準(zhǔn)及研究樣本量不同等因素有關(guān)[3]。本組實(shí)驗(yàn)C-erbB-2蛋白陽(yáng)性率為5.19%，同時(shí)C-erbB-2蛋白在CRC中陽(yáng)性率低并與臨床病理特征均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性，因此本試驗(yàn)認(rèn)為C-erbB-2蛋白不能單獨(dú)作為反映CRC生物學(xué)行為及預(yù)后的標(biāo)志物。同時(shí)本實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)P53與C-erbB-2蛋白在CRC的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有協(xié)同作用，因此認(rèn)為聯(lián)合檢測(cè)P53、C-erbB-2蛋白的表達(dá)，才可能對(duì)判斷CRC的惡性生物學(xué)行為有所幫助。

[1] 陳東.Cyclin G1和P53在大腸癌中的表達(dá)及意義[D].長(zhǎng)沙:中南大學(xué),2009.

[2] 侯慧,肖明明,任秋華,等.結(jié)直腸癌中p53蛋白和Ki67的表達(dá)及臨床意義[J].實(shí)用腫瘤學(xué)雜志,2008,22(5):424-426.

[3] 李強(qiáng),秦華東,鄒朝霞.PTTG與P53在大腸癌組織中的表達(dá)[J].哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2008,42(1):50-52.

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：1671-8194（2014）05-0168-02

*通訊作者：E-mail:sunjy8336@sina.com