秦 勇，李 峰

（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第一師醫(yī)院呼吸血液科，新疆阿克蘇843000）

檢測(cè)血清及支氣管肺泡灌洗液腫瘤標(biāo)志物在肺癌診斷中的價(jià)值

秦 勇，李 峰

（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第一師醫(yī)院呼吸血液科，新疆阿克蘇843000）

肺癌是一種全球性惡性腫瘤，在我國(guó)人群中發(fā)病率和病死率均較高，而且近年來(lái)其發(fā)病率和死亡率均逐年上升，已成為死亡率上升速度最快的惡性腫瘤［1－3］。因此，探尋操作快捷、成本較低、效率較高的肺癌早期診斷方法已成為一項(xiàng)重要的臨床課題。在肺癌早期，血清腫瘤標(biāo)志物的水平變化多不顯著，支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）則是更敏感的采樣標(biāo)本，本文檢測(cè)血清及BALF中細(xì)胞角蛋白19片段（CYFRA21－1）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）和鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原（SCC）等四項(xiàng)血清腫瘤標(biāo)志物在肺癌診斷中的價(jià)值進(jìn)行了觀察和分析，現(xiàn)將研究的具體情況報(bào)告如下。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2012年1月至2013年12月我院診斷收治的80例患者作為觀察組，所有納入患者均經(jīng)電子支氣管鏡肺活檢、CT引導(dǎo)下經(jīng)皮膚肺穿刺活檢、手術(shù)切除組織病理檢查等確診。其中，男53例，女27例，年齡45至76歲，平均年齡為（62.8±9.7）歲，有吸煙史患者76例，平均吸煙指數(shù)為（27.4±13.6）包年。在病理分型方面，腺癌30例，鱗癌38例，小細(xì)胞腫瘤（SCLC）12例。在TNM分期方面，Ⅰa期3例，Ⅰb期12例，Ⅱa期18例，Ⅱb期13例，Ⅲa期19例，Ⅲb期12例，Ⅳ期3例。選取同期80例良性肺部病變作為對(duì)照組，其中，2例為炎性假瘤，48例為肺炎，9例為肺結(jié)核，15例為支氣管擴(kuò)張，6例為慢性支氣管炎。納入病例均經(jīng)細(xì)菌學(xué)、影像學(xué)或病理學(xué)等檢查方法確診，排除合并其他部位腫瘤的患者。男55例，女25例，年齡41至73歲，平均（58.7 ±8.9）歲，有吸煙史患者為48例，平均吸煙指數(shù)為（22.6±9.7）包年。兩組患者在性別構(gòu)成、年齡、吸煙指數(shù)等方面的差異均無(wú)顯著性（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)標(biāo)本的提取方法 應(yīng)用EPS 3500型電子支氣管鏡（由日本Pentax公司生產(chǎn)）對(duì)兩組患者進(jìn)行支氣管鏡檢查，將支氣管鏡末端于病變所在的肺葉或支氣管開(kāi)口處緊密楔入，而后經(jīng)活檢口將200ml溫度為37℃的無(wú)菌生理鹽水分多次緩緩注入，每次注入量為30至50ml，在每次注液后，均以－19.95至－13.3kPa的負(fù)壓對(duì)BALF進(jìn)行吸取和收集，總回收量約為60至96ml。將收集的BALF過(guò)濾，去除其中的黏液部分，以每分鐘3 000r的轉(zhuǎn)速離心15min后取上清液，置于－20℃的冰箱中待測(cè)。于進(jìn)行電子支氣管鏡檢查當(dāng)天，對(duì)兩組患者采取空腹肘靜脈血，離心分離血清后置于－20℃的冰箱中待測(cè)。

1.2.2 腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)方法 應(yīng)用全自動(dòng)生化免疫分析儀（瑞士羅氏公司生產(chǎn)）采用化學(xué)發(fā)光法對(duì)兩組患者的血清和BALF標(biāo)本中的CEA、CYFRA21－1、NSE水平進(jìn)行測(cè)定（試劑盒為儀器配套試劑盒）；應(yīng)用酶標(biāo)儀（鄭州安圖斯生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)）采用酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)兩組患者的血清和BALF標(biāo)本中的SCC水平進(jìn)行測(cè)定（試劑盒為儀器配套試劑盒）。所有操作均嚴(yán)格按儀器使用說(shuō)明書(shū)執(zhí)行。

1.3 數(shù)據(jù)處理方法

所有數(shù)據(jù)應(yīng)用EXCEL建立數(shù)據(jù)庫(kù)，應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行處理，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)進(jìn)行處理，以P＜0.05為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清和BALF中腫瘤標(biāo)志物水平的比較

經(jīng)檢測(cè)，兩組患者BALF標(biāo)本中CEA、CYFRA21－1、NSE、SCC的水平均顯著高于血清標(biāo)本（P＜0.05），而且觀察組患者BALF和血清標(biāo)本中的上述腫瘤標(biāo)志物水平均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），具體結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 不同臨床分期肺癌患者血清和BALF中腫瘤標(biāo)志物水平的比較

經(jīng)檢測(cè)，不同臨床分期患者的BALF標(biāo)本中CEA、CYFRA21－1、NSE、SCC的水平均顯著高于血清標(biāo)本（P＜0.05），臨床分期為Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的患者的血清和BALF標(biāo)本中的CEA、CYFRA21－1、NSE水平均顯著高于臨床分期為Ⅰ期的患者（P＜0.05），其血清標(biāo)本中的SCC水平與臨床分期為Ⅰ期的患者的差異無(wú)顯著性（P＞0.05），其BALF標(biāo)本中的SCC水平顯著高于臨床分期為Ⅰ期的患者（P＜0.05），具體結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 兩組患者血清和BALF中腫瘤標(biāo)志物水平的比較

表2 不同臨床分期患者血清和BALF中腫瘤標(biāo)志物水平的比較

2.3 不同病理分型肺癌患者血清和BALF中腫瘤標(biāo)志物水平的比較

經(jīng)檢測(cè)，不同病理分型患者的BALF標(biāo)本中CEA、CYFRA21－1、NSE、SCC的水平均顯著高于血清標(biāo)本（P＜0.05），腺癌患者血清和BALF標(biāo)本中的CEA水平均顯著高于鱗癌患者或SCLC患者（P＜0.05），而且SCLC患者的BALF標(biāo)本中的CEA水平顯著高于鱗癌患者（P＜0.05）；鱗癌患者血清標(biāo)本中的CYFRA21－1水平顯著高于腺癌患者或SCLC患者（P＜0.05），而腺癌與鱗癌患者BALF標(biāo)本中CYFRA21－1水平的差異無(wú)顯著性（P＞0.05）且均高于SCLC患者（P＜0.05）；SCLC患者血清和BALF標(biāo)本中的NSE水平均顯著高于腺癌患者或鱗癌患者（P＜0.05），而且鱗癌患者BALF標(biāo)本中的NSE水平顯著高于腺癌患者（P＜0.05）；鱗癌患者血清和BALF標(biāo)本中的SCC水平均顯著高于腺癌患者或SCLC患者（P＜0.05），而腺癌與SCLC患者的差異無(wú)顯著性（P＞0.05），具體結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 不同病理分型肺癌患者血清和BALF中腫瘤標(biāo)志物水平的比較

3 討論

肺癌是多發(fā)于老年人群的惡性腫瘤，該病初起病情隱匿、進(jìn)展快速、血行或淋巴轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)較高，嚴(yán)重威脅著患者的身心健康，其導(dǎo)致的死亡病例也在逐年增加。循證醫(yī)學(xué)研究成果證實(shí)，吸煙和被動(dòng)吸煙、慢性肺部疾病、腫瘤家族史等因素均可增加肺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，其中，吸煙的危險(xiǎn)度最高［4］。由于肺癌的早期診斷難度較高，因此，肺癌患者的預(yù)后情況多不理想。

CEA早在1965年就被人們所發(fā)現(xiàn)，是最早應(yīng)用于臨床的腫瘤標(biāo)志物之一。CEA來(lái)源于人體內(nèi)胚層上皮組織，是一種多糖蛋白復(fù)合物，分子量約為200kD，是一種非器官特異性腫瘤相關(guān)抗原，正常人血清CEA水平極低，CEA水平的異常上升對(duì)多種腫瘤的發(fā)生和生長(zhǎng)具有指示作用，對(duì)于腺癌的發(fā)生具有良好的標(biāo)志作用且在鱗癌和SCLC組織中也有一定程度的表達(dá)。NSE是一種主要表達(dá)于神經(jīng)元軸突細(xì)胞質(zhì)和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中的神經(jīng)特異性蛋白質(zhì)［5］，分子量為78kD，可參與酵解過(guò)程，能夠催化磷酸甘油轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇丙酮，在臨床上通常作為神經(jīng)母細(xì)胞瘤的腫瘤標(biāo)志物，對(duì)于SCLC也具有較好的指示作用，可用于SCLC與非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）的輔助鑒別診斷。CYFRA21－1是一種表達(dá)于單層上皮細(xì)胞的酸性多肽，分子量為40kD，在血清內(nèi)含量極低，主要表達(dá)于肺癌、食管癌等上皮起源的腫瘤細(xì)胞胞漿，當(dāng)機(jī)體內(nèi)有腫瘤組織生長(zhǎng)并發(fā)生壞死或溶解時(shí)，激活的蛋白酶會(huì)促進(jìn)細(xì)胞角蛋白19降解，釋放大量CYFRA 21－1，使其血清水平急劇上升，CYFRA21－1在近十幾年中被認(rèn)為是對(duì)NSCLC特別是鱗癌的診斷靈敏度和特異性均較高的血清腫瘤標(biāo)志物，但其對(duì)腺癌和SCLC的診斷價(jià)值仍須進(jìn)一步的研究予以證實(shí)［6，7］。SCC是在1977年從宮頸鱗癌組織中分離獲得的抗原物質(zhì)，分子量為42至48kD，具有較好的特異性，也是最早被應(yīng)用于鱗癌診斷的腫瘤標(biāo)志物。SCC廣泛表達(dá)于特定的正常組織和惡性上皮細(xì)胞中，目前已被廣泛應(yīng)用于宮頸、頭頸部、食管、肺和氣管、泌尿生殖道和肛管部位的鱗癌的診斷、病情監(jiān)測(cè)、療效評(píng)價(jià)、預(yù)后評(píng)估等方面［8］，早期肺癌患者的血清SCC很少出現(xiàn)顯著的上升，因此SCC不能被用于腫瘤的篩查，但是SCC的升高幅度與腫瘤的惡性程度具有密切的關(guān)系，SCC的顯著升高往往提示病情出現(xiàn)了惡化或復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)上升，因此，SCC常作為病情監(jiān)控和預(yù)后評(píng)價(jià)的腫瘤標(biāo)志物。本研究結(jié)果顯示，兩組患者BALF標(biāo)本中CEA、CYFRA21－1、NSE、SCC的水平均顯著高于血清標(biāo)本（P＜0.05），而且觀察組患者BALF和血清標(biāo)本中的上述腫瘤標(biāo)志物水平均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），說(shuō)明上述四種腫瘤標(biāo)志物能夠提示體內(nèi)有肺癌的發(fā)生，可作為肺癌與良性肺部疾病鑒別診斷的輔助指標(biāo)；臨床分期為Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的患者的血清和BALF標(biāo)本中的CEA、CYFRA21－1、NSE水平均顯著高于臨床分期為Ⅰ期的患者（P＜0.05），其血清標(biāo)本中的SCC水平與臨床分期為Ⅰ期的患者的差異無(wú)顯著性（P＞0.05），其BALF標(biāo)本中的SCC水平顯著高于臨床分期為Ⅰ期的患者（P＜0.05），說(shuō)明CEA、CYFRA21－1、NSE等三種腫瘤標(biāo)志物的血清水平可敏感地反映患者病情，但SCC水平則敏感度較差，而B(niǎo)ALF標(biāo)本中的SCC水平變化幅度更大，可作為病情監(jiān)控的依據(jù)；不同病理分型患者的BALF標(biāo)本中CEA、CYFRA21－1、NSE、SCC的水平均顯著高于血清標(biāo)本（P＜0.05），腺癌患者血清和BALF標(biāo)本中的CEA水平均顯著高于鱗癌患者或SCLC患者（P＜0.05），而且SCLC患者的BALF標(biāo)本中的CEA水平顯著高于鱗癌患者（P＜0.05）；鱗癌患者血清標(biāo)本中的CYFRA21－1水平顯著高于腺癌患者或SCLC患者（P＜0.05），而腺癌與鱗癌患者BALF標(biāo)本中CYFRA21－1水平的差異無(wú)顯著性（P＞0.05）且均高于SCLC患者（P＜0.05）；SCLC患者血清和BALF標(biāo)本中的NSE水平均顯著高于腺癌患者或鱗癌患者（P＜0.05），而且鱗癌患者BALF標(biāo)本中的NSE水平顯著高于腺癌患者（P＜0.05）；鱗癌患者血清和BALF標(biāo)本中的SCC水平均顯著高于腺癌患者或SCLC患者（P＜0.05），而腺癌與SCLC患者的差異無(wú)顯著性（P＞0.05），說(shuō)明在肺癌組織分型診斷方面，BALF標(biāo)本中CEA、CYFRA21－1、NSE等腫瘤標(biāo)志物的變化幅度大于血清標(biāo)本，可更加敏感性地反映腫瘤的組織分型情況，兩種標(biāo)本中的SCC對(duì)腫瘤分型的指示作用基本相當(dāng)。

綜上所述，應(yīng)用BALF標(biāo)本中的CEA、CYFRA 21－1、NSE、SCC等腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)對(duì)肺癌的早期診斷具有積極的臨床意義，其在病理分型診斷、病情監(jiān)控和預(yù)后判斷等方面的價(jià)值高于血清學(xué)檢測(cè)。

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秦勇（1971－）男，新疆阿克蘇人，本科學(xué)歷，副主任醫(yī)師，研究方向：呼吸領(lǐng)域相關(guān)疾病。

2013－09－22）

1007－4287（2014）10－1677－04