曹麗芬　姚黎霞　何良興等

摘要 [目的]建立快速檢測(cè)食品中蘇丹紅（蘇丹紅I、Ⅱ、Ⅲ、IV）含量的高效液相色譜法，簡(jiǎn)化樣品的前處理，降低成本，縮短儀器檢測(cè)時(shí)間。[方法] 選用Athena C18XDB 色譜柱（4.6 mm × 150.0 mm，3.5 μm），以乙腈水溶液和乙腈丙酮溶液為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，通過(guò)二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)食品中蘇丹紅。[結(jié)果] 該方法檢測(cè)線性良好，相關(guān)系數(shù)R≥0.999 1，檢出限為0.01 mg/L，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=10）為0.9%～2.0%，回收率為90%～96%。[結(jié)論] 該法具有較高的準(zhǔn)確度和精密度，適用于食品中蘇丹紅含量的測(cè)定。

關(guān)鍵詞 高效液相色譜；蘇丹紅；食品

中圖分類號(hào) S509.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2014）05-01532-02

Abstract [Objective] A analytical method was established to determine Sudan （Sudan I， Ⅱ， Ⅲ， IV） content in food by high performance liquid chromatography （HPLC） with simplified sample pretreatment， reduced cost and shorten instrument detection time. [Method] The Sudan were separated on an Athena C18XDB column （4.6 mm × 150.0 mm， 3.5 μm） by isocratic elution using acetonitrile water solution and acetonitrile acetone solution as mobile phase， and analyzed with a diodearray detector. [Result] The method showed a good linear relationship with correlation coefficient of more than 0.999 1. The limit of detection （LOD） was 0.01 mg/L， the relative standard deviation （n=10） was between 0.9%-2.0%， and the recovery rate was between 90%-96%. [Conclusion] The method has a high accuracy and precision， which is suitable for analyzing the Sudan content in food.

Key words High performance liquid chromatography （HPLC）； Sudan； Food

蘇丹紅是偶氮苯類人工色素，屬于工業(yè)染料，主要用于油、蠟、鞋等的增光著色。蘇丹紅及其代謝產(chǎn)物具有致癌性，世界衛(wèi)生組織早就明文規(guī)定禁止蘇丹紅作為食品添加劑，我國(guó)在食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)[1]中也禁止使用蘇丹紅。但由于蘇丹紅價(jià)格低廉、顏色鮮艷、不易褪色[2]，一些不法商販將其添加到食品中，極大地危害消費(fèi)者的健康。

國(guó)內(nèi)外報(bào)道的蘇丹紅檢測(cè)方法主要有氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[3]、高效液相色譜法[4-6]、液相色譜-質(zhì)譜法[7-8]、薄層層析法[9]等，有些由于儀器和試劑昂貴難以普及。目前我國(guó)檢測(cè)蘇丹紅（蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、IV）的國(guó)標(biāo)方法為GB/T19681-2005[10]，該方法為高效液相色譜法，需用氧化鋁過(guò)柱，并經(jīng)過(guò)多次濃縮提取，重復(fù)性和回收率都不太理想，同時(shí)該方法采用梯度洗脫，檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng)。筆者在該方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化，以期建立一套快速準(zhǔn)確的食品中蘇丹紅的分析方法，便于在實(shí)際工作中應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 材料

主要儀器：Agilent 1200 高效液相色譜儀配有四元泵、DAD 紫外檢測(cè)器和自動(dòng)進(jìn)樣器，安捷倫科技有限公司；KQ5200 超聲波清洗儀，昆山市超聲儀器有限公司；ML204/02 分析天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；

CT14RD 臺(tái)式低速冷凍離心機(jī)，上海天美科學(xué)儀器有限公司；MilliQ 超純水處理器，美國(guó)Millipore 公司。主要試劑：標(biāo)準(zhǔn)品為蘇丹紅Ⅰ、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ、蘇丹紅Ⅳ，純度≥87%；甲醇、乙醇、丙酮、正己烷、乙醚，HPLC 級(jí)。

1.2 色譜條件

色譜柱：Athena C18XDB 分析柱（4.6 mm × 150.0 mm，3.5 μm）；流動(dòng)相：溶劑A為 0.1%甲酸的水溶液∶乙腈=85∶15，B為 0.1%甲酸的乙腈溶液∶丙酮=80∶20；流速1 ml/min；進(jìn)樣量10 μl；DAD紫外檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)478 nm。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

分別稱取蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各10.0 mg（按實(shí)際含量折算），用乙醚溶解后用正己烷定容至250 ml，配制成標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。吸取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 ml，用正己烷定容至25 ml，配制成0、0.16、0.32、0.64、1.28、2.56 mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液，經(jīng)0.45 μm的水系濾膜過(guò)濾后，按“1.2”的色譜條件進(jìn)樣分析。

1.4 樣品前處理

將樣品剪碎，稱取10～20 g（準(zhǔn)確至0.01 g）樣品于離心管中，加入10～30 ml 5%丙酮的正己烷液，3 000 r/min離心10 min，過(guò)濾，再用10 ml 5%丙酮的正己烷液洗滌數(shù)次，合并濾液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸至5 ml以下，用正己烷轉(zhuǎn)移并定容至5 ml，經(jīng)0.45 μm有機(jī)濾膜過(guò)濾后待測(cè)。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 波長(zhǎng)的選擇。

該試驗(yàn)采用二極管陣列檢測(cè)器，可在紫外-可見(jiàn)波長(zhǎng)范圍內(nèi)對(duì)被分離組分掃描獲得其吸收光譜。該試驗(yàn)分別對(duì)蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、IV在波長(zhǎng)200～700 nm 進(jìn)行光譜掃描和參考其他文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)在波長(zhǎng)478 nm處均有較高的靈敏度，故選定478 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.1.2 流動(dòng)相的優(yōu)化。

2.3 回收率試驗(yàn)

選取具有代表性的3種樣品，含水量較大的醬腌菜、固體樣品方便面和粉末樣品辣椒粉，且該3種樣品均未檢測(cè)出蘇丹紅。分別稱取樣品10 g，各加入0.02 mg蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、IV，平行測(cè)定3次，得出回收率在90%～ 96%，標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD在0.9%～3.8%，加標(biāo)量越大，RSD值越小（表2）。

3 結(jié)論

該研究采用高效液相色譜法快速測(cè)定食品中蘇丹紅（蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、IV）含量，樣品前處理采用離心提取，再濃縮定容，流動(dòng)相比例為溶液A（0.1%甲酸的水溶液∶乙腈=85∶15）∶溶液B（0.1%甲酸的乙腈溶液∶丙酮=80∶20）=10∶90，柱溫30 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為478 nm。該方法操作簡(jiǎn)單快速，回收率、精密度均滿足要求，適用于食品中蘇丹紅的定性、定量分析。

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