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        大連櫻桃根際寄生線蟲種類的調(diào)查與鑒定

        2014-05-30 10:48:04江曉帆董春華馬駿邱馳李鑫
        安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年9期
        關(guān)鍵詞:鑒定線蟲櫻桃

        江曉帆 董春華 馬駿 邱馳 李鑫

        摘要[目的] 對大連櫻桃土壤根際線蟲的種類進行調(diào)查與鑒定。[方法] 在2011年6月至2013年6月,對大連市櫻桃根際土壤線蟲進行了廣泛的調(diào)查和采樣。[結(jié)果] 從所采集的80份櫻桃根際土壤樣品中根據(jù)測量數(shù)據(jù)和形態(tài)特征,共分離和鑒定出植物寄生線蟲8屬8個種,分別為畸形小環(huán)線蟲(Criconemella informis)、突出針線蟲(Paratylenchus projectus)、斯氏短體線蟲(Pratylenchus scribneri)、活潑平滑墊刃線蟲 (Psilenchus hilarulu)、大盾片盾線蟲(Scutellonema megascutum)、擬盤旋屬線蟲(Pararotylenchus sp.)、燕麥真滑刃線蟲(Aphelenchus avenae)、哈克滑刃線蟲(Aphelenchoides haguei),其中畸形小環(huán)線蟲(Criconemella informis)、斯氏短體線蟲(Pratylenchus scribneri)、活潑平滑墊刃線蟲(Psilenchus hilarulu)、大盾片盾線蟲(Scutellonema megascutum)、擬盤旋屬線蟲(Pararotylenchus sp.)、哈克滑刃線蟲(Aphelenchoides haguei)為大櫻桃上的新紀錄種。[結(jié)論] 初步明確了大連地區(qū)櫻桃根際線蟲的種類。

        關(guān)鍵詞櫻桃;線蟲;鑒定

        中圖分類號S432.4+5文獻標(biāo)識碼A文章編號0517-6611(2014)09-02600-02

        作者簡介江曉帆(1981- ),男,遼寧撫順人,從事植物保護研究。

        櫻桃寄生性線蟲種類較多,分布較廣,給櫻桃生產(chǎn)帶來巨大損失。大連地區(qū)臨海環(huán)山,晝夜溫差大,其地理位置和氣候條件成為我國乃至世界櫻桃最佳栽植區(qū)之一,所產(chǎn)櫻桃被消費者譽為“天下奇果”,櫻桃品質(zhì)和口味都優(yōu)于其他地區(qū)。國內(nèi)關(guān)于櫻桃寄生性線蟲的報道較少,因此,筆者對大連櫻桃土壤根際線蟲的種類進行了初步研究,為進一步研究寄生線蟲給櫻桃生產(chǎn)帶來的危害提供理論依據(jù),也為豐富線蟲資源的進一步研究提供部分理論數(shù)據(jù)。

        1材料與方法

        1.1土壤的采集2011年6月~2013年6月,從大連市各地區(qū)櫻桃園采集根際土壤80份。先用鐵鏟除去根圍3~5 cm的表土和其他雜物,然后在土表10~60 cm處取樣300~500 g,裝入塑料袋,封好后帶回實驗室。

        1.2線蟲的分離與鑒定采用淘洗-過篩-重糖離心分離法:將采集到的根際土壤倒入大型容器中,加水約2 000 ml,充分攪拌,靜置2~3 min后,將上清液倒入4080425目的組篩中,使其依次通過40、80和425目網(wǎng)篩,再用噴頭輕淋洗組篩,40目網(wǎng)篩可以除去植物的根系組織及土壤中的雜質(zhì),將根系等雜質(zhì)沖掉,輕沖洗80目網(wǎng)篩使線蟲充分進入425目網(wǎng)篩中,然后小心淋洗425目網(wǎng)篩中的殘余物,使細小的土粒通過該網(wǎng)篩,425目網(wǎng)篩中收集的主要是各種線形線蟲,翻轉(zhuǎn)網(wǎng)篩,從網(wǎng)篩的背面用細水流將425目網(wǎng)篩中的殘余物洗入燒杯中,然后將燒杯中的混合物倒入離心管內(nèi),平衡好后放入吊籃式低速離心機內(nèi),2 000 r/min離心2~4 min后,倒掉離心管內(nèi)的上清液,線蟲存留在管底的沉淀中,再注入比重1.18的蔗糖溶液混勻后,2 000 r/min離心2~4 min,線蟲便分布于蔗糖溶液中,將含有線蟲的蔗糖懸液緩慢傾入500目網(wǎng)篩中,用細水流淋洗線蟲混合樣到200 ml燒杯內(nèi),用20 ml水較適宜,也可轉(zhuǎn)入試管中,饑餓幾天后殺死、固定,顯微鏡下觀察與測量,確定其屬種[1-5]。

        2結(jié)果與分析

        在大連櫻桃根際土壤中共鑒定出植物寄生線蟲2目7科8屬8種,并對分離到的每一種線蟲進行了詳細的測量、中文描述并列出其鑒別特征,鑒定結(jié)果分別為畸形小環(huán)線蟲(Criconemella informis)、突出針線蟲(Paratylenchus projectus)、斯氏短體線蟲(Pratylenchus scribneri)、活潑平滑墊刃線蟲 (Psilenchus hilarulu)、大盾片盾線蟲(Scutellonema megascutum)、擬盤旋屬線蟲(Pararotylenchus sp.)、燕麥真滑刃線蟲(Aphelenchus avenae)、哈克滑刃線蟲(Aphelenchoides haguei)。

        2.1畸形小環(huán)線蟲(Criconemella informis (Micoletzky,1922)Luc & Raski,1981)[6]溫和熱殺死后蟲體呈臘腸形,略向腹面彎曲,頭尾兩端略尖。體長為427.6~505.8 μm,體環(huán)數(shù)(R)為62~69條,體環(huán)較粗大,后翻明顯,體中部體環(huán)寬7 μm左右。頭環(huán)3條,不向后翻,唇盤小且略突出,頭部骨化明顯??卺橀L63.3~65.1 μm,錐體長47.7~52.7 μm,錐體占口針長度的比例為75.4%~81.0%,口針基球錨形,寬8.5~10 μm。食道為典型的環(huán)型食道,食道前體部與中食道球合并,中食道球發(fā)達,寬為18~22 μm,瓣門明顯,長10~12 μm,峽部細而短,被神經(jīng)環(huán)圍繞,食道基球梨形,寬為11~14 μm,長為16~21 μm,與腸交界的賁門呈球突狀,食道基球到頭端的距離為116.1~126.8 μm,排泄孔位于食道基球后約2個體環(huán)處。腸道通常不清晰;陰門位于蟲體后部,成熟雌蟲陰門閉合,橫裂,單生殖腺前伸,卵母細胞頂部雙行排列,基部單行排列,陰門到尾端的體環(huán)數(shù)(RV)為4~5條;陰門后蟲體圓錐形漸細,尾短,肛門到尾端的體環(huán)數(shù)(Ran)為2~3條,尾末端呈裂葉狀或元寶形。

        2.2突出針線蟲 (Paratylenchus projectus Jenkins,1956)[6]溫和熱殺死后蟲體前部較直,中后部向腹面彎曲呈敞開的“C”形,體長308.5~316.4 μm。體環(huán)細小,側(cè)區(qū)有4條等距的側(cè)線。頭部縊縮明顯,兩側(cè)向上逐漸傾斜變窄,至頭端平截??卺橀L26.8~27.3 μm,口針基球半球形,兩側(cè)略尖。背食道腺開口到口針基球的距離(DGO)為5~8 μm。環(huán)型食道,食道前體部與中食道球合并;中食道球很發(fā)達,食道瓣門較大,位于中食道球的中央,骨化明顯;峽部細,被神經(jīng)環(huán)圍繞;后食道腺圓形,與腸平截。排泄孔位于峽部以下,后食道腺偏上的位置,半月體位于排泄孔前1~3個體環(huán)處。成熟雌蟲陰門處蟲體常膨脹,有陰門側(cè)膜,單生殖腺前伸,無后陰子宮囊,受精囊大,近圓形,卵母細胞頂部雙行排列,基部單行排列。尾部向腹面彎曲,呈圓錐形,末端鈍圓,通常尾末端背側(cè)收縮成指狀突。

        2.3斯氏短體線蟲(Pratylenchus scribneri Steiner,1943)[7]溫和熱殺死后蟲體略向腹面彎曲或彎曲呈“C”型。蟲體表皮紋細。側(cè)區(qū)4條側(cè)線,側(cè)帶光滑。唇區(qū)較低,稍縊縮,唇環(huán)2條,基環(huán)高于頂環(huán),頭架發(fā)達,深度骨化??卺樰^強壯,口針基球圓形。背食道腺開口距口針基部球2.5 μm左右。中食道球卵圓形,寬7.9~10.3 μm。食道腺從腹面長覆蓋腸的前端,覆蓋長度為18.4~25.7 μm。排泄孔位于食道與腸連接處的前方,半月體緊挨在排泄孔的前部,占2個體環(huán)左右。前生單卵巢,卵母細胞單行排列,增殖區(qū)有時雙行排列,受精囊退化,卵圓形或近圓形,內(nèi)部常無精子。后陰子宮囊較短,無細胞分化,長度短于陰門處蟲體直徑的1.5倍。尾圓錐形,尾紋18~24條,末端寬圓形,無環(huán)紋。側(cè)尾腺孔位于尾的中前部,側(cè)線不延伸到尾端。

        2.4活潑平滑墊刃線蟲(Psilenchus hilarulus de Man,1921)蟲體細長,溫和熱殺死后蟲體較直。蟲體長853.6.1~960.3 μm,體表環(huán)紋細密。唇區(qū)較高,光滑,前端平圓,不縊縮??卺樌w細,長13.7~14.3 μm,錐部長約為口針長的1/3,無口針基部球。背食道腺開口到口針基部球的距離為6~7 μm。食道前體部長筒形,中食道球卵圓形,位于食道中部稍后方,瓣門明顯。狹部細長,后食道腺梨形,排泄孔位于食道腺前方,到頭端的距離為97.1~105.2 μm。陰門橫裂,略凹陷,雙卵巢對伸,卵母細胞雙行排列,受精囊長橢圓形,常充滿精子。尾較長,環(huán)紋清晰,長133.2~144.5 μm,為肛門處蟲體直徑的9~10倍,尾末端膨大呈棍棒狀。

        2.5大盾片盾線蟲(Scutellonema megascutum Peng & Siddiqi,1994)[8]蟲體較大,溫和熱殺死后呈松散的螺旋形或“C”形;側(cè)區(qū)4條側(cè)線,在蟲體前端和側(cè)尾腺口盾片處網(wǎng)格化。唇區(qū)呈半球形,稍有縊縮,有4~5條唇環(huán),頭架高度骨化;口針發(fā)達,長度為26.4~29.2 μm;口針基球圓形,高3.5 μm;背食道腺開口距口針基球的距離為6.5~6.9 μm。中食道球圓形,排泄孔位于食道—腸瓣門稍后的位置;半月體位于排泄孔前3~5個體環(huán)處,2~3個體環(huán)長;食道腺從背面長覆蓋腸。陰門凹陷,具有小陰門唇葉;卵母細胞單行排列,局部雙行排列。側(cè)尾腺孔盾片狀,直徑為5~6 μm,位于肛門后1~4個體環(huán)間;尾端闊圓形,長12.7~20.9 μm,腹面有9~12條環(huán)紋。

        2.6擬盤旋屬線蟲(Pararotylenchus sp.)蟲體較大,溫和熱殺死后蟲體呈松散的“C”字形,側(cè)區(qū)4條側(cè)線。頭部有環(huán)紋,略縊縮;口針發(fā)達,長29~31 μm,口針基球圓形,前端稍平;背食道腺開口距口針基球的距離為5.5~6.0 μm。中食道球明顯,距前端91.2~99.8 μm;食道腺葉長梨形,基本不覆蓋腸。雙生殖腺對伸,有小陰門蓋。側(cè)尾腺孔小,孔狀,位于肛門附近;尾略向腹面彎曲,末端較圓,尾長為18~20 μm,腹面有8~9條環(huán)紋,環(huán)紋清晰,尾末端環(huán)紋寬大。

        2.7燕麥真滑刃線蟲(Aphelenchus avenae Bastian,1865)[9-10]蟲體經(jīng)溫和熱殺死后較直或略向腹面彎曲。蟲體圓筒形,兩端稍變細,表皮環(huán)紋細。體中部側(cè)區(qū)具有10~12條側(cè)線。唇區(qū)較低,不縊縮,前端平圓??卺樰^長,長166~19.8 μm,口針前段稍短于后段,無口針基球。食道前體部圓筒形,中食道球較大,呈卵圓形,寬10~14.3 μm,長154~20.4 μm。食道狹部短,食道腺呈長葉狀,從背側(cè)覆蓋腸,覆蓋長度為體寬的2~3倍。神經(jīng)環(huán)位于中食道球后約半個中食道球長度處,排泄孔位于中食道球后2/3~1個中食道球長度處。陰門位于蟲體后部75%~79%處,陰道壁較厚,稍向前傾斜,陰門唇常突起。前生單卵巢,卵母細胞單行排列,部分雙行排列。后陰子宮囊較長,長度約為陰門處蟲體直徑的2~4倍。肛門前唇突起。尾較短,呈圓筒形,末端寬圓形。

        2.8哈克滑刃線蟲(Aphelenchoides haguei Maslen,1979)溫和熱殺死后蟲體略向腹面彎曲,體長為663.8~722.6 μm。體表環(huán)紋細密。唇區(qū)縊縮明顯,前端平圓??卺橀L12.4~12.9 μm,口針基部球小。食道前體部呈細長的管狀;中食道球卵圓形,13.8 μm~16.3 μm×10.6 μm~12.8 μm,瓣門位于中食道球的中央;峽部較短,食道腺長葉狀,覆蓋腸的背側(cè)面。排泄孔位于中食道球后一個中食道球長度處,與神經(jīng)環(huán)處于同一水平上。陰門橫裂,陰門唇稍突起,陰道向前傾斜,長度約占陰門處蟲體寬度的1/2,陰門位于蟲體中后部70.1%~70.8%處。單卵巢前伸,卵母細胞單行排列。后陰子宮囊較長,呈囊袋狀,為陰門處蟲體直徑的2~4倍。尾長圓錐形,長為41.6~43.7 μm,為肛門處蟲體直徑的3.3~3.9倍。尾末端變細,近腹面或尾尖中間具一短的尾尖突。

        3結(jié)論與討論

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