申小閣 胡福良編譯

（浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，杭州310029）

蜂膠及其組分的抗螨作用

申小閣 胡福良編譯

（浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，杭州310029）

蜂膠含有十分豐富的黃酮類(lèi)、酚酸類(lèi)及萜烯類(lèi)等化合物，具有廣泛的生物學(xué)和藥理學(xué)活性，如抗病源微生物、抗氧化、抗炎、抗腫瘤、護(hù)肝、降血脂、降血糖、免疫調(diào)節(jié)等。人們普遍認(rèn)為蜜蜂采集蜂膠主要用于保護(hù)蜂巢，如填補(bǔ)孔洞、修補(bǔ)裂縫、潤(rùn)滑巢房?jī)?nèi)壁等。然而，蜂膠似乎還作為一種抗菌劑來(lái)防止蜜蜂幼蟲(chóng)、貯蜜和蜂巢受到微生物的侵染；在養(yǎng)蜂生產(chǎn)實(shí)踐中，曾被用來(lái)防治一些蜜蜂疾病。Bilikova等（2013）研究證明蜂膠中咖啡酸苯乙酯、異戊烯基咖啡酸酯類(lèi)及咖啡酸苯甲酯的混合物能夠有效抑制美洲幼蟲(chóng)腐臭病的病原─幼蟲(chóng)芽孢桿菌（Paenibacillus larvae）的生長(zhǎng)；Antunez等（2008）也曾獲得類(lèi)似結(jié)果。Simone等（2009）研究發(fā)現(xiàn)蜂膠還具有調(diào)節(jié)蜜蜂群體免疫力的作用；Mao等（2013）進(jìn)一步研究表明蜂花粉和蜂膠中的一些化學(xué)成分，如對(duì)香豆酸（p-coumaric acid），能夠特異性地上調(diào)表達(dá)蜜蜂個(gè)體相關(guān)解毒酶基因及抗菌肽基因。與此同時(shí)，蜂膠及其組分的抗狄斯瓦螨作用的研究越來(lái)越引起人們的關(guān)注。

狄斯瓦螨（Varroa destructor），是東方蜜蜂原發(fā)性寄生螨，也是蜜蜂的專(zhuān)性寄生蟲(chóng)。自上世紀(jì)六七十年代，由于引種不慎、地理擴(kuò)散等原因，狄斯瓦螨宿主逐漸蔓延至西方蜜蜂群，目前已成為全世界養(yǎng)蜂業(yè)的最大威脅之一。大蜂螨除吸食蜜蜂血淋巴外，還是其他多種病原體的攜帶和傳播者，嚴(yán)重影響蜂群的健康，甚至造成整群覆沒(méi)。Fries等（2006）和Le Conte等（2007）曾觀察到受大蜂螨感染的西方蜜蜂在不治螨的情況下可以成功存活超過(guò)十年的時(shí)間。而Locke等（2012）研究了法國(guó)Avignon地區(qū)的抗螨蜂群，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與處理組相比，自然狀態(tài)下的抗螨群能夠更有效地減少蜂群中大蜂螨的繁殖數(shù)量。然而，目前對(duì)于其抗螨機(jī)制還不甚清楚。

針對(duì)上述兩方面研究的空缺，Popova等（2014）進(jìn)行了一項(xiàng)新的研究，旨在揭示蜂群的抗螨能力與蜂膠化學(xué)成分之間的聯(lián)系，并進(jìn)一步找出其中有效的抗螨活性組分。在這項(xiàng)研究中，該團(tuán)隊(duì)同樣以法國(guó)Avignon地區(qū)同一蜂場(chǎng)的抗螨蜂群和易感蜂群作為研究對(duì)象，對(duì)這兩種蜂群中蜂膠的理化指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。Popova分別收集2012年5～6月間5群抗螨蜂群和5群易感蜂群生產(chǎn)的蜂膠，并采用70%的乙醇對(duì)毛膠進(jìn)行提取，除去不溶性蜂蠟及其他雜質(zhì)后得到蜂膠浸膏。結(jié)果顯示，抗螨蜂群的蜂膠浸膏含量顯著低于易感蜂群（58%∶72%，P＜0.05）。由于浸膏內(nèi)容物主要是植物樹(shù)脂中的活性代謝產(chǎn)物，蜂膠中的浸膏含量直接反應(yīng)了蜜蜂采集到的樹(shù)脂含量。上述結(jié)果表明，抗螨蜂群與易感蜂群相比具有較少的樹(shù)脂植物來(lái)源，這意味著抗螨蜂群可能有選擇性地采集少數(shù)植物樹(shù)脂。

在進(jìn)一步采用GC-MS技術(shù)結(jié)合內(nèi)標(biāo)歸一化法對(duì)這兩組蜂膠樣的化學(xué)成分進(jìn)行定性定量測(cè)定后，結(jié)果顯示所有蜂膠樣的化學(xué)成分定性上基本一致，均檢測(cè)到了60多種化合物，而定量上存在一些差異。這些化學(xué)成分包括芳香酸類(lèi)（主要成分：苯甲酸、咖啡酸、對(duì)香豆酸），酚酸酯類(lèi)（香豆素、阿魏酸酯/異阿魏酸酯、咖啡酸酯），查爾酮類(lèi)（主要成分：松屬素查爾酮），黃酮及黃酮醇類(lèi)（柯因、高良姜素），黃烷酮及二氫黃酮醇（主要成分：短葉松素、短葉松素-3-乙酸酯），糖類(lèi)以及其他（脂肪酸、三萜等）微量的化合物。采用主成分分析法對(duì)上述化學(xué)成分的半定量結(jié)果進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，最明顯的不同之處在于抗螨蜂群的蜂膠中咖啡酸及包括3-甲基-3-丁烯基咖啡酸酯、2-甲基-2-丁烯基咖啡酸酯、3-甲基-2-丁烯基咖啡酸酯在內(nèi)的咖啡酸戊烯基酯類(lèi)化合物的含量顯著高于易感蜂群（P＜0.05）。此外，抗螨蜂群中另外兩種咖啡酸酯類(lèi)化合物即咖啡酸苯乙酯、咖啡酰肉桂酸的含量也高于易感蜂群，但差異不顯著?？紤]到膠源植物是影響蜂膠化學(xué)成分的直接因素，造成這些差異的原因可能在于兩種蜂群所采集到的植物葉芽分泌物的組分不同。

作為蜂群抵抗外界病原菌和寄生蟲(chóng)侵染的天然抗病性物質(zhì)，蜂膠具有極其復(fù)雜的化學(xué)成分。目前已從中分離鑒定出了黃酮類(lèi)、酚酸類(lèi)、萜烯類(lèi)、醌類(lèi)、酯類(lèi)、醇類(lèi)、醛類(lèi)、酚類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)，還有大量的氨基酸、酶類(lèi)、維生素類(lèi)、多糖及多種微量元素等。但這些化學(xué)成分通過(guò)何種途徑對(duì)蜂群健康產(chǎn)生有益影響目前尚不清楚。據(jù)推測(cè)，可能是通過(guò)直接的殺螨作用或是間接地增強(qiáng)蜜蜂的免疫應(yīng)答而實(shí)現(xiàn)。此外，抗螨蜂群的蜂膠中含量較高的化學(xué)成分還可能通過(guò)另外一種途徑：減少大蜂螨攜帶的其他病原體，從而對(duì)蜂群起到保護(hù)作用。然而，這些皆屬推測(cè)，明確蜂群有效的抗螨機(jī)制與蜂膠化學(xué)成分的聯(lián)系還需作進(jìn)一步深入研究。