亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        FOG2基因在圓錐動(dòng)脈干發(fā)育畸形患者中的外顯子突變和拷貝數(shù)量變化的研究

        2014-05-25 00:34:48鄧展?jié)?/span>章文文易龍
        關(guān)鍵詞:拷貝外顯子圓錐

        鄧展?jié)?章文文 易龍

        (江蘇省南京市南京大學(xué)醫(yī)學(xué)分子技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 南京 210093)

        FOG2基因在圓錐動(dòng)脈干發(fā)育畸形患者中的外顯子突變和拷貝數(shù)量變化的研究

        鄧展?jié)?章文文 易龍*

        (江蘇省南京市南京大學(xué)醫(yī)學(xué)分子技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 南京 210093)

        目的了解FOG2(Friend of G AT A4)基因外顯子突變?cè)谥袊?guó)圓錐動(dòng)脈干發(fā)育畸形(C T D)病人中情況和比例,以及在T O F病人中,檢測(cè)是否存在FOG2基因的拷貝數(shù)量變化。方法在南京市兒童醫(yī)院收集從2004年1月到2006年1月的199例C T D病人的血樣,包括145例法洛四聯(lián)癥(T O F),37例右心室雙出口(D O R V),17例大動(dòng)脈錯(cuò)位(T G A)。100例健康患者作為對(duì)照組,利用一代測(cè)序檢測(cè)FOG2基因的外顯子突變,利用多重連接探針擴(kuò)增(ML P A)檢測(cè)FOG2基因的拷貝數(shù)量變化。結(jié)果在6個(gè)C T D病人發(fā)現(xiàn)了4種錯(cuò)義突變,分別在2個(gè)D O R V病人中發(fā)現(xiàn)了p.V339I、p.A426 T 3個(gè)T O F病人中發(fā)現(xiàn)了p.M703L,在1個(gè)T O F病人中發(fā)現(xiàn)了p.T843??偙壤秊?.0%。所有的這些突變都并沒(méi)有在100個(gè)正常人中發(fā)現(xiàn)。ML P A檢測(cè)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)在T O F病人中存在著拷貝數(shù)量變化。結(jié)論FOG2基因的外顯子突變?cè)谥袊?guó)C T D病人中是相對(duì)比較常見(jiàn)的,而FOG2基因的拷貝數(shù)量變化不是引起C T D的原因。但依然需要更大樣本的研究來(lái)提高我們對(duì)FOG2基因在C T D中的作用的認(rèn)識(shí)。

        圓錐動(dòng)脈干發(fā)育畸形;FOG2基因;突變;拷貝數(shù)量變化

        圓錐動(dòng)脈干發(fā)育畸形(conotruncal heart defect,C T D)是一種先天性心臟?。╟ongenital heart disease,C H D),在新生兒的發(fā)生率為1/1000[1]。C T D主要包括法洛四聯(lián)癥(tetralogy of Fallot, T O F),大動(dòng)脈錯(cuò)位(transposition of great artery,T G A)和右心室雙出口(double-outlet ventricle outflow,D O R V)。圓錐動(dòng)脈干發(fā)育畸形屬于先天性心臟病的一種復(fù)雜類型,一經(jīng)診斷,需要對(duì)患者進(jìn)行手術(shù)修復(fù)治療。雖然大多數(shù)圓錐動(dòng)脈干發(fā)育畸形的病因至今依然不清楚,但是有不少研究表明,遺傳因素在C T D的發(fā)病過(guò)程中起著非常重要的作用。實(shí)際上,大約12%的C T D被認(rèn)為是由22q11微缺失引起的[2-7]。

        FOG2基因編碼一張鋅指蛋白,包含1151個(gè)氨基酸和8個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)域。FOG2蛋白為一種轉(zhuǎn)錄輔因子,與下游蛋白G AT A4結(jié)合形成復(fù)合物,在心臟的發(fā)育過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用[8]。FOG2基因敲除小鼠表現(xiàn)出異常的心臟發(fā)育,其中包括C T D[9]。G AT A4基因突變的小鼠影響了G AT A與FOG2蛋白的結(jié)合,從而表現(xiàn)出與FOG2基因敲除小鼠相似的表型[10]。Pizzuti等[11]首次在47例T O F病人中發(fā)現(xiàn)了FOG2基因的兩個(gè)錯(cuò)義突變,但對(duì)突變的功能研究顯示并不影響G AT A4與FOG2蛋白的結(jié)合,而且FOG2蛋白的表達(dá)幾乎沒(méi)有變化。隨后的兩個(gè)研究在C T D病人中又發(fā)現(xiàn)了一些突變,主要存在于D O R V的病人中,但他們都沒(méi)有進(jìn)一步的對(duì)FOG2基因突變的致病機(jī)制進(jìn)行研究[12,13]。而在這些研究選用的人群,主要是歐美人群,而在中國(guó)人群,甚至亞洲人群中,F(xiàn)OG2基因在C T D病人中的突變情況,目前還沒(méi)有報(bào)道。

        另一方面,拷貝數(shù)量變化(copy nu m ber variation,CNV),是由于基因組重排導(dǎo)致的主要結(jié)構(gòu)變異類型,包括亞顯微結(jié)構(gòu)下大于1kb基因片段的缺失和重復(fù)。CNV被認(rèn)為是影響人類疾病的主要遺傳因素之一,突變頻率比單核苷酸多態(tài)性(SNP)高的多。CNV證實(shí)與孟德?tīng)栠z傳疾病、散發(fā)性疾病和復(fù)雜疾病的易感性有關(guān),通過(guò)改變相關(guān)基因的劑量產(chǎn)生臨床表型。各種機(jī)制參與CNV的形成,主要分為兩大類:以DNA重組為基礎(chǔ)和DNA復(fù)制為基礎(chǔ)[14]。Steven等[15]對(duì)114例T O F病人進(jìn)行全基因組掃描,結(jié)果發(fā)現(xiàn)了有11個(gè)位點(diǎn)存在拷貝數(shù)量變化,因此,不能排除在T O F病人中存在著FOG2基因的拷貝數(shù)量變化。

        1 材料與方法

        1.1 基本資料 從2004年1月至2006年1月,在南京市兒童醫(yī)院收集了199例C T D的病人,包括145例T O F,37例D O R V,17例T G A。C T D的診斷是以超聲心動(dòng)圖為標(biāo)準(zhǔn),并在手術(shù)中得以證實(shí),而且排除了帶有其他心臟畸形的病人。在鼓樓體檢中心收集100例健康人的血樣,這些病人沒(méi)有先天性心臟病的病史并且超聲心動(dòng)圖檢查沒(méi)有心臟結(jié)構(gòu)的異常。所有的C T D病人和正常人都利用Qiagen試劑盒提取出外周血樣中的DNA。

        1.2 DNA測(cè)序和生物信息學(xué)分析 人類FOG2基因位于8q23.1,包含8個(gè)外顯子。8個(gè)外顯子以及剪接區(qū)域利用PCR進(jìn)行擴(kuò)增,利用Primer 3.0軟件設(shè)計(jì)FOG2基因的14對(duì)特異性引物,其中7對(duì)對(duì)應(yīng)FOG2基因的8號(hào)外顯子。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物利用Gel Extraction Kit(O mega)進(jìn)行純化,BigDye Terminator v3.1 Kit進(jìn)行循環(huán)測(cè)序,并且利用ABI 3100 Genetic Analyzer(Applied Biosystems)進(jìn)行分析。

        FOG2基因突變位點(diǎn)的確定從GenBank獲?。ǖ卿浱?hào):N C_000008.10),并利用美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(NationaLCenter for Biotechnology Information,N C BI)人類SNP數(shù)據(jù)庫(kù)(hu man SNP database,dbSNP)、千人基因項(xiàng)目數(shù)據(jù)庫(kù)(1000 Geno me Project database)以及外顯子測(cè)序項(xiàng)目(Exo me Sequencing Project,ESP)確認(rèn)新發(fā)現(xiàn)的突變。其他物種的FOG2蛋白序列是從N C BI GenBank中獲取的,保守性分析利用Clustalw2軟件進(jìn)行分析。突變對(duì)基因結(jié)構(gòu)和功能的影響利用PolyPhen-2進(jìn)行預(yù)測(cè)。

        1.3 多重鏈接探針擴(kuò)增(m ultiplex ligation-dependent probe a m plification,ML P A) FOG2基因的外顯子探針是用H-MAP D(H u manMLP AProbe Design)軟件進(jìn)行設(shè)計(jì)的。ML P A的步驟為:雙鏈DNA分離:100 ng DNA95℃孵育5 min;雜交:分離后的DNA與探針混合,60℃孵育16~18小時(shí);連接:加入連接酶,54℃孵育15 min;擴(kuò)增:PCR(35 cycle,95℃30 s,60℃30 s,72℃60 s,72℃20 min)。ML P A的產(chǎn)物在ABI 3100 Genetic Analyzer進(jìn)行分離,利用Gene Mapper軟件(Appied Biosystem)進(jìn)行分析。

        2 結(jié) 果

        在6個(gè)C T D病人發(fā)現(xiàn)了4種錯(cuò)義突變,其中分別在2個(gè)D O R V病人中發(fā)現(xiàn)了p.V339I、p.A426 T,3個(gè)T O F病人中發(fā)現(xiàn)了p.M703L,1個(gè)T O F病人中發(fā)現(xiàn)了p.T843 M,總的比例為3.0%(圖1)。對(duì)照組中100個(gè)正常人中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)以上的突變。其中,p.V339I、p.M703L已經(jīng)在先前的報(bào)道中被發(fā)現(xiàn),p.A426 T、p.T843 M是我們研究首次在C T D病人中報(bào)道的突變。p.A426 T、p.M703L、p.V339I能在dbSNP和千人基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中找到(rsID:rs35843564、rs121908603、rs201845067),p.A426 T和p.V339I能在ESP數(shù)據(jù)庫(kù)中找到,但p.T843 M沒(méi)有在任何數(shù)據(jù)庫(kù)中找到,是一個(gè)新的突變。另外,我們發(fā)現(xiàn)的這4種突變,在其他物種中也是高度保守的(圖2)。利用PolyPhen2對(duì)這4個(gè)突變對(duì)蛋白功能和結(jié)構(gòu)的影響進(jìn)行預(yù)測(cè),p.V339I和p.A426T被預(yù)測(cè)為良性突變,而p.M703L和p.T843 M則被預(yù)測(cè)為可能引起疾病的突變,見(jiàn)表1。

        圖1 所發(fā)現(xiàn)的4種錯(cuò)義突變,(a)~(d):V339I,A426 T,M703L,T843 M

        表1 所發(fā)現(xiàn)的4種錯(cuò)義突變以及它們的特點(diǎn)

        圖2 不同物種間的保守序列分析,方框中表示突變的位點(diǎn),從左到右為M703L,T843 M,V339I和A426 T

        在145例T O F病人的ML P A檢測(cè)中,所有的外顯子中都檢測(cè)到正常范圍的ML P A信號(hào),這一結(jié)果排除了拷貝數(shù)量變化在FOG2基因引起C T D發(fā)病機(jī)制中的作用,見(jiàn)圖3。

        圖3 MLP A探針的電泳效果圖,F(xiàn)OG2基因所有的外顯子都在相應(yīng)的波峰下標(biāo)出

        3 討 論

        1999年,Svensson等[8]研究發(fā)現(xiàn)小鼠FOG2蛋白能在體內(nèi)和體外與G AT A4的N端鋅指特異性相結(jié)合。通過(guò)特異性結(jié)合,F(xiàn)OG2能調(diào)節(jié)G AT A4的轉(zhuǎn)錄活性,因?yàn)樵谛∈笈咛コ衫w維細(xì)胞和大鼠的心肌細(xì)胞中,F(xiàn)OG2基因的過(guò)表達(dá)能抑制Gata4依賴性的轉(zhuǎn)錄過(guò)程。2000年,該研究組運(yùn)用基因定位突變的方法來(lái)探究FOG2基因在正常心臟發(fā)生中的功能。研究顯示FOG2基因缺陷的小鼠在胚胎期的第13天因?yàn)槌溲孕牧λソ叨劳?,表現(xiàn)為一種三尖瓣閉鎖綜合征,包括三尖瓣的缺失、嚴(yán)重的房間隔缺損、室間隔缺損、左心室流出道的延長(zhǎng)、主動(dòng)脈瓣向右移位和肺動(dòng)脈狹窄。這些FOG2基因缺陷的小鼠在發(fā)育中同時(shí)也存在著左心室發(fā)育不全。該研究展示了FOG2在正常心臟的瓣膜發(fā)育中的重要作用以及提示了三尖瓣閉鎖綜合征的遺傳學(xué)基礎(chǔ)。

        2000年,Tevosian等[9]通過(guò)敲除小鼠的FOG2基因來(lái)獲得Fog2-/-小鼠,敲基因小鼠在胚胎形成的中期死亡,表現(xiàn)出嚴(yán)重的心血管畸形,包括共同房室通道、心室肌發(fā)育不良、冠狀動(dòng)脈缺失和法洛四聯(lián)征。另外,在Fog2-/-小鼠的心臟中,冠狀動(dòng)脈發(fā)生非常明顯的缺失。而使FOG2在心肌細(xì)胞中重新表達(dá)能修復(fù)Fog2-/-小鼠的血管表型,進(jìn)一步展示了Fog2基因在心肌中的作用以及在冠狀動(dòng)脈的發(fā)育中至關(guān)重要。

        2001年,Crispino等[10]建立了使Gata4蛋白單個(gè)氨基酸被取代的小鼠模型,削弱其與FOG2蛋白的相互作用。這些小鼠在胚胎期的第12天死亡,表型與Fog2-/-小鼠相似,除了G AT A4突變小鼠還存在半月瓣的畸形和雙右室流出道。此項(xiàng)研究提示Gata4的功能依賴于FOG2蛋白和另一種心臟特異性FOG蛋白間的相互作用。

        FOG2基因突變大多是外顯子的錯(cuò)義突變、同義突變、移碼突變,以及5’U T R區(qū)的變異、非編碼的外顯子的變異、內(nèi)含子剪接異常、外顯子無(wú)義突變形成額外的終止密碼子和起始密碼子,造成蛋白的截短或延長(zhǎng)等。它的單個(gè)或多個(gè)基因的突變或異常表達(dá)均會(huì)導(dǎo)致心血管發(fā)育異常,影響心臟畸形的發(fā)生。

        2003年,Pizzuti等[11]對(duì)47個(gè)T O F患者的FOG2基因進(jìn)行測(cè)序,在其中2個(gè)患者中發(fā)現(xiàn)了各發(fā)現(xiàn)了1個(gè)突變(S657 G、E30 G)。2011,De Luca等[12]在1個(gè)散發(fā)的雙右室流出道的病人中,同樣發(fā)現(xiàn)了FOG2基因上E30 G這一突變。2005年,Ackerman等[16]在30個(gè)死亡的膈肌有缺陷的兒童中,在4號(hào)外顯子上發(fā)現(xiàn)了一個(gè)突變(R112X),尸體解剖顯示患者具有肺發(fā)育不良和先天性膈疝。該研究提示FOG2基因這個(gè)突變可能會(huì)引起原發(fā)性的肺部和膈肌缺陷。2007年,Bleyl等[17]在96個(gè)先天性膈疝的病人中發(fā)現(xiàn)了FOG2基因7號(hào)外顯子上的2個(gè)突變(M703L和T843 A)。2012年,Tan等[13]在一個(gè)雙右室流出道患者中發(fā)現(xiàn)了同樣的突變(M703L)。2011年,De Luca等[12]在1個(gè)散發(fā)的雙右室流出道的病人中發(fā)現(xiàn)了FOG2基因6號(hào)外顯子的一個(gè)突變(I227 M),另外,在1個(gè)散發(fā)的T O F病人中,在FOG2基因8號(hào)外顯子上發(fā)現(xiàn)了另外一個(gè)突變(M544I)。2012年,Tan等[13]在1個(gè)雙右室流出道合并室間隔缺損的新生兒中,發(fā)現(xiàn)了FOG2基因8號(hào)外顯子上的一個(gè)突變(K737E)。

        到目前為止,國(guó)內(nèi)外主要報(bào)道了13種導(dǎo)致先天性心臟病的FOG2基因突變,其中大多數(shù)都發(fā)生在多個(gè)不相干的家庭。FOG2基因突變?cè)贑 T D病人中所占的比例大約為4%,與我們的結(jié)果相似(3%)。

        另一方面,雖然FOG2基因的拷貝數(shù)量變化在我們的研究中沒(méi)有發(fā)現(xiàn),但拷貝數(shù)量變化作為一種重要的疾病發(fā)展發(fā)生機(jī)制,其對(duì)于圓錐動(dòng)脈干發(fā)育畸形這種發(fā)生發(fā)展機(jī)制尚未明確的先天性疾病,仍可能存在相當(dāng)重要的作用,特別是Alu序列豐富的基因區(qū)域,目前與圓錐動(dòng)脈發(fā)育畸形相關(guān)的主要基因主要有G AT A4,JAG-1,F(xiàn)OG2,G AT A6,T B X-1等,這些基因?qū)τ诳截悢?shù)量變化的檢測(cè)目前國(guó)際上還是相當(dāng)缺乏,而我們的檢測(cè)中沒(méi)有得到陽(yáng)性結(jié)果的原因,除了可能FOG2基因拷貝數(shù)量變化不是發(fā)生C T D的機(jī)制外,還可能由于樣本數(shù)量太少,檢測(cè)技術(shù)靈敏度和特異性不夠強(qiáng),所選擇的區(qū)域中沒(méi)有拷貝數(shù)量變化等。因此,依然需要更大樣本,更多中心的研究來(lái)加強(qiáng)我們對(duì)圓錐動(dòng)脈干發(fā)育畸形拷貝數(shù)量變化情況的認(rèn)識(shí)。

        2011年,Tan等[13]通過(guò)對(duì)FOG2基因與T O F發(fā)生的特異性和敏感度分析顯示,雖然其靈敏度不高,但有較高的特異性,據(jù)此可以為FOG2基因在T O F的產(chǎn)前診斷和基因治療提供依據(jù)。FOG2基因是心臟發(fā)育過(guò)程中較早表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子,與G AT A4相互作用貫穿心臟發(fā)育的全過(guò)程,在心臟的發(fā)育中發(fā)揮重要的作用。該基因發(fā)生變異將可能導(dǎo)致先天性膈疝、法洛四聯(lián)癥(T O F)或雙右室流出道(D O R V),對(duì)于妊娠期的婦女,特別是帶有明顯家族史的婦女,通過(guò)抽取產(chǎn)前絨毛組織或羊水,進(jìn)行FOG2基因篩查,結(jié)合胎兒超聲心動(dòng)圖的檢查,提早發(fā)現(xiàn)心臟發(fā)育異常的胎兒,爭(zhēng)取早期治療和終止妊娠的機(jī)會(huì),減輕家庭負(fù)擔(dān)和社會(huì)負(fù)擔(dān)。

        [1]Ferencz C,Rubin JD,Mccarter RJ,et al.Congenital heart disease:prevalence at livebirth the baltim ore-washington infant study[J].American Journal of Epidemiology,1985,121(1):31-36.

        [2]Gold m untz E,Clark BJ,Mitchell L E,et al.Frequency of 22q11 deletionsin patients with conotruncal defects[J].Journal of the American College of Cardiology,1998,32(2):492-498.

        [3]Cuneo BF,Lang man CB,Ilbawi MN,et al.Latent hypoparathyroidism in children with conotruncaLCardiac defects[J].Circulation,1996,93(9):1702-1708.

        [4]W ebber S A,H atch well E,Barber JC,et al.Im portance of microdeletions of chro m oso mal region 22q11 as a cause of selected malformations of the ventricular outflow tracts and aortic arch:a three-year prospective study[J].The Journal of Pediatrics,1996,,129(1):26-32.

        [5]Takahashi K,Kido S,H oshino K,et al.Frequency of a 22q11 deletion in patients with conotruncaLCardiac malformations:a prospective study[J].European Journal of Pediatrics,1995,154(11):878-881.

        [6]Amati F,Mari A,Digilio MC,et al.22q11 deletionsin isolated and syndro mic patients with tetralogy of Fallot[J].H uman Genetics,1995,95(5):479-482.

        [7]Gold m untz E,Driscoll D,Budarf ML,et al.Microdeletions of chro m oso mal region 22q11 in patientswith congenitaLConotruncaLCardiac defects[J].Journal of Medical Genetics, 1993,30(10):807-812.

        [8]Svensson E C,Tufts R L,Polk C E,et al.Molecular cloning of FOG-2:a m odulator of transcription factor G AT A-4 in cardio m yocytes[J].Proceedings of the National Academ y of Sciences,1999,96(3):956-961.

        [9]Tevosian S G,Deconinck AE,Tanaka M,et al.FOG-2,a cofactor for G AT Atranscription factors,is essential for heart m orphogenesis and develop ment of coronary vessels from epicardiu m[J].Cell,2000,101(7):729-739.

        [10]Crispino JD,Lodish MB,T hurberg B L,et al.Proper coronary vascular develop ment and heart m orphogenesis depend on interaction of G AT A-4 with FOG cofactors[J].Genes&Develop ment,2001,15,(7):839-844.

        [11]Pizzuti A,Sarkozy A,Newton AL,et al.Mutations of ZFP M2/FOG2 gene in sporadic cases of tetralogy of Fallot[J].H u man Mutation,2003,22(5):372-377.

        [12]De Luca A,Sarkozy A,F(xiàn)erese R,et al.New m utations in ZFP M2/FOG2 gene in tetralogy of Fallot and double outlet right ventricle[J].Clinical Genetics,2011,80(2):184-190.

        [13]Tan ZP,H uang C,Xu ZB,et al.N ovel ZFP M2/FOG2 variants in patients with double outlet right ventricle[J].Clinical Genetics,2012,82(5):466-471.

        [14]Zhang F,G u W,H urles ME,et al.Copy nu m ber variation in hu man health,disease,and evolution[J].Annual Review of Geno mics and H u man Genetics,2009,10:451-481.

        [15]Green way SC,Pereira AC,Lin JC,et al.De novo copy nu mber variants identify new genes and loci in isolated sporadic tetralogy of Fallot[J].Nature Genetics,2009,41(8):931-935.

        [16]Ackerman K G,H erron BJ,Vargas S O,et al.Fog2 is required for normal diaphrag m and lung develop ment in mice and humans[J].Plos Genetics,2005,1(1):58-65.

        [17]Bleyl SB,Moshrefi A,Shaw G M,et al.Candidate genes for congenital diaphrag matic hernia from animal m odels:sequencing of FOG2 and P D G FR alpha reveals rare variants in diaphrag matic hernia patients[J].European Journal of H u man Genetics,2007,15(9):950-958.

        編輯:熊詩(shī)詣

        ObjectiveTo understand the role of FOG2 gene in patients with conotruncal heart defect and find exon m utations and copy nu m ber variants of FOG2 gene.MethodFro m January 2004 to January 2006,blood sam ples were collected from 199 C T D patients w ho were ad mitted to Nanjing Children’s H ospital,Jiangsu Province,including 145 T O F,37 D O R V and 17 T G A.Sequencing was used to detect exon m utations and MLP Awas used to detect copy nu m ber variants of FOG2 gene in C T D patients.Results4 missense m utations were identified in 6 patients with conotruncal heart defect.p.V339I and p.A426 T were identified in 2 patients with D O R V,p.M703L wasidentified in 3 patients with T O Fand p.T843 was identified in 1 patients with T O F.MLP Asignals were allfound within the normal range values for all exons in all patients.ConclusionsFOG2 gene m utations are also com m on in C T D patients and major contribution of FOG2 gene CNVs was excluded in T O Fpathogenesis.But m ore studies with larger sam ples are still needed to enhance our understanding of the role of FOG2 gene.

        conotruncal heart defect;FOG2 gene;m utation;copy nu m ber variant

        R714.53

        A

        10.13470/j.cnki.cjpd.2014.02.006

        2014-02-21)

        *通訊作者:易龍,E-mail:18751851015@163.com

        猜你喜歡
        拷貝外顯子圓錐
        外顯子跳躍模式中組蛋白修飾的組合模式分析
        圓錐擺模型的探究與拓展
        圓錐截線與玫瑰線
        “圓柱與圓錐”復(fù)習(xí)指導(dǎo)
        計(jì)算法在圓錐保持架收縮模組合沖頭設(shè)計(jì)中的應(yīng)用
        哈爾濱軸承(2021年4期)2021-03-08 01:00:50
        外顯子組測(cè)序助力產(chǎn)前診斷胎兒骨骼發(fā)育不良
        中國(guó)生殖健康(2018年1期)2018-11-06 07:14:38
        外顯子組測(cè)序助力產(chǎn)前診斷胎兒骨骼發(fā)育不良
        人類組成型和可變外顯子的密碼子偏性及聚類分析
        文件拷貝誰(shuí)最“給力”
        五月天无码| 老少配老妇老熟女中文普通话 | 亚洲一区二区三区乱码在线中国| 久久99精品久久水蜜桃| 国内少妇偷人精品视频免费| 亚洲AV无码一区二区水蜜桃| 亚洲丰满熟女乱一区二区三区| 欧美性猛交xxxx免费看蜜桃| 国产乱人伦av在线无码| 久久青草国产免费观看| 日本精品一区二区三区试看| 色综合久久中文娱乐网| 国产性猛交╳xxx乱大交| 国语精品视频在线观看不卡| 久久精品国产亚洲av麻豆床戏 | 中文岛国精品亚洲一区| 亚洲中文乱码在线观看| 精品福利一区二区三区免费视频 | 久热爱精品视频在线观看久爱 | 蜜桃av噜噜一区二区三区9| 377p日本欧洲亚洲大胆张筱雨| 久久精品re| 久久国产女同一区二区| 亚洲最大成人网站| 东方aⅴ免费观看久久av| 欧美高h视频| 97青草超碰久久国内精品91| 玩中年熟妇让你爽视频| 91精品国产丝袜在线拍| 日本一区二区高清在线观看| 日韩av无码一区二区三区| 国产内射在线激情一区| 91精品国产闺蜜国产在线| 自拍成人免费在线视频| 97精品超碰一区二区三区| 国产精品一区二区韩国AV| 精品国产精品久久一区免费| 337p粉嫩日本欧洲亚洲大胆| 日本强好片久久久久久aaa| 天堂视频一区二区免费在线观看| 青青手机在线观看视频|