趙耀東,韓豆瑛
1甘肅中醫(yī)學(xué)院,甘肅 蘭州 730000;2甘肅省康復(fù)中心醫(yī)院
溫通針?lè)▽?duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠IL-2、IL-6的影響*
趙耀東1,韓豆瑛2
1甘肅中醫(yī)學(xué)院,甘肅 蘭州 730000;2甘肅省康復(fù)中心醫(yī)院
目的:觀察溫通針?lè)▽?duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠血清IL-2、IL-6含量的影響,探討溫通針?lè)ㄖ委熉苑羌?xì)菌性前列腺炎的作用機(jī)理。方法:將60只雄性W i st ar大鼠隨機(jī)分為針刺組、藥物組、模型組、空白組4組,每組15只。采用25%消痔靈注射液0.2 m L(每單側(cè)葉注射0.1 m L)注入前列腺背側(cè)葉的造模方法,造成CN BP的動(dòng)物模型。針刺組采用溫通針?lè)ㄖ委?,藥物組予前列康灌胃,均每日治療1次,共30次,并觀察各組大鼠血清中IL-2、IL-6的含量變化情況。結(jié)果:針刺組較藥物組能明顯降低大鼠血清中IL-2及IL-6水平(P<0.05)。結(jié)論:溫通針?lè)ㄖ委熉苑羌?xì)菌性前列腺炎的機(jī)理與降低IL-2、IL-6含量,調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能有關(guān)。
非細(xì)菌性前列腺炎,慢性;溫通針?lè)?;IL-2;IL-6
慢性前列腺炎(c h r o n i cp r o s t a t i t i s,C P)是泌尿外科的常見(jiàn)病和多發(fā)病,我國(guó)約3 5%~4 0%3 5歲以上的男性患有此病,約5 0%的男性有過(guò)慢性前列腺炎的癥狀[1]。在C P中,慢性非細(xì)菌性前列腺炎(c h r o n i cn o n-b a c t e r i a lp r o s t a t i t i s,C N B P)發(fā)病率遠(yuǎn)高于細(xì)菌性前列腺炎,占發(fā)病總數(shù)的9 0%~9 5%。近年來(lái)C P發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì),且發(fā)病年齡日趨年輕化[2]。通過(guò)多年的基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)踐,全國(guó)著名針灸專家鄭魁山教授運(yùn)用獨(dú)創(chuàng)的“溫通針?lè)ā敝委烠 N B P取得了滿意效果,為進(jìn)一步探討該手法的獨(dú)特性及其作用機(jī)理,現(xiàn)對(duì)其研究如下:
1.1 動(dòng)物 W i s t a r大鼠,雄性,6 0只,體質(zhì)量(2 0 0±2 0)g,3月齡,由甘肅中醫(yī)學(xué)院科研實(shí)驗(yàn)中心提供,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào):S C X K(甘)2 0 1 1-0 0 0 1。
1.2 主要藥品及試劑 前列康片(浙江康恩貝制藥股份有限公司生產(chǎn),0.5g/片,國(guó)藥準(zhǔn)字Z 3 3 0 2 0 3 0 3);消痔靈注射液[吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn),批號(hào):Z Z-4 9 6 5-吉衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1 9 9 8)第4 0 0 3號(hào)]臨用時(shí)用蒸餾水稀釋成2 5%濃度;I L-2、I L-6放免試劑盒(中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院科技開(kāi)發(fā)中心放免研究所提供,批號(hào):2 0 0 5 0 4 0 3、2 0 0 5 0 4 0 6)。
1.3 實(shí)驗(yàn)方法
1.3.1 動(dòng)物分組 將6 0只大鼠按體質(zhì)量編號(hào),用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為空白組、模型組、藥物組及針刺組4組,每組1 5只。
1.3.2 造模 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物購(gòu)回后常規(guī)飼養(yǎng)1周以適應(yīng)環(huán)境,參考張亞強(qiáng)[3]、雷久士等[4]的方法造模,除空白組外,其余3組大鼠稱取其體質(zhì)量后用異戊巴比妥鈉(0.0 0 2 3 m L/g)麻醉,剪去大鼠下腹部毛,常規(guī)消毒,無(wú)菌條件下沿腹正中線切開(kāi)皮膚,創(chuàng)口1.5c m左右,逐層剖開(kāi)下腹壁,暴露膀胱,用特制不銹鋼環(huán)狀套圈套住膀胱,輕輕拉出,清楚暴露前列腺背側(cè)葉,注入2 5%的消痔靈注射液0.2 m L(每單側(cè)葉注射0.1 m L),取下套圈使膀胱復(fù)位,逐層關(guān)腹。術(shù)后大鼠腹腔注射慶大霉素0.1 m L/只以預(yù)防感染。空白組常規(guī)飼養(yǎng)。造模后各組大鼠精神狀態(tài)較差,活動(dòng)減少,食欲不佳,但均于術(shù)后第3天開(kāi)始逐步恢復(fù)。連續(xù)觀察9天,各組大鼠無(wú)1例死亡。傷口愈合良好,精神狀態(tài)可,毛色潤(rùn)澤,食欲、二便無(wú)異常。于造模期結(jié)束即第9天,每組取2只處死,取前列腺組織做形態(tài)學(xué)觀察,檢測(cè)W B C數(shù)目和卵磷脂小體密度并做細(xì)菌培養(yǎng),符合無(wú)菌性炎癥改變,證明炎癥模型成功。
1.3.3 治療方法 針刺組選取關(guān)元、曲骨、行間等穴。取穴依據(jù)林文注主編《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》[5],并參考人體有關(guān)穴位,依動(dòng)物比較方法學(xué)而定。關(guān)元:臍下約2 5 m m處;曲骨:恥骨聯(lián)合上緣中點(diǎn)處;行間:后肢趾背第一二趾縫間。造模后9天開(kāi)始治療,針刺組每天針刺1次,即穴位局部消毒后,進(jìn)針得氣即行溫通針?lè)ǎ?]:左手加重力量,右手拇指向前連續(xù)捻按9次,針下沉緊后,針尖拉著感應(yīng)的部位連續(xù)重插輕提9次,拇指再向前連續(xù)捻按9次,針尖頂著有感應(yīng)的部位推弩守氣,使針下繼續(xù)沉緊,此時(shí)醫(yī)者押手可明顯感覺(jué)到經(jīng)氣沖動(dòng)。每穴操作6 0秒,留針3 0分鐘,每1 5分鐘行針1次,然后慢慢將針拔去,按壓針孔。藥物組每次胃飼前列康混懸液(前列康片研末,加蒸餾水制成0.0 5 4 g/m L的混懸液)1 m L,1次/d??瞻捉M每次胃飼蒸餾水1 m L,模型組經(jīng)抓取、固定等同針刺組全過(guò)程,但不做治療。
1.3.4 標(biāo)本采集及檢測(cè) 治療3 0天,禁食不禁水2 4小時(shí)后殺檢。血清標(biāo)本制備:各組動(dòng)物于末次針刺、給藥2 4小時(shí)后,稱取大鼠體質(zhì)量后用異戊巴比妥鈉(0.0 0 2 3 m L/g)麻醉,分離頸動(dòng)脈取血5m L,3 7℃水中放置半小時(shí),以35 0 0r/m i n離心1 5分鐘,取上清液放入尖底試管中,置4℃冰箱內(nèi)保存,待測(cè)。用放射免疫法測(cè)定血清I L-2、I L-6含量。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)采用S P S S1 7.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,計(jì)量資料以(±s)表示,組間比較采用t檢驗(yàn),P<0.0 5為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
各組大鼠血清I L-2、I L-6含量變化結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 各組大鼠血清IL-2、IL-6含量變化情況(±s)
表1 各組大鼠血清IL-2、IL-6含量變化情況(±s)
注:與空白組比較,**表示P<0.01;與模型組比較,△表示P<0.05,△△表示P<0.01;與藥物組比較,▲表示P<0.05。
組別 只數(shù) IL-2/(ng·m L-1) IL-6/(ng·L-1)空白組 13 5.8912±1.1546 0.8584±0.2537模型組 13 7.6701±1.2529** 1.6585±0.4211**藥物組 13 6.2680±0.9817△ 1.2490±0.4164△針刺組 13 6.2083±1.5098△△▲ 1.0815±0.2660△△▲
造模后模型組I L-2、I L-6水平與空白組相比顯著增高(P<0.0 1);治療后藥物組和針刺組I L-2、I L-6含量較模型組顯著降低(P<0.0 5),且針刺組與藥物組在降低I L-2、I L-6水平方面相比有顯著性差異(P<0.0 5),提示造模后細(xì)胞毒T細(xì)胞損傷靶細(xì)胞,機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng),I L-2水平隨之升高;抗炎性細(xì)胞因子I L-6水平增高,使前列腺局部免疫細(xì)胞被激活,產(chǎn)生多種炎性介導(dǎo)的細(xì)胞因子及免疫性抗體,而溫通針?lè)ǖ尼槾探M能顯著改善機(jī)體的自身免疫反應(yīng),降低血清中的I L-2水平,提高機(jī)體免疫力,增強(qiáng)抗炎能力,使血清中I L-6水平顯著降低,其效果優(yōu)于藥物組。
C N B P屬中醫(yī)“精濁”“白濁”“白淫”“淋濁”等范疇。本病的病因病機(jī)多為“本虛標(biāo)實(shí)”“本虛為脾腎不足,標(biāo)實(shí)指濕熱瘀血、敗精熱結(jié)于精室而形成本虛標(biāo)實(shí)、虛實(shí)夾雜之證”[7]。本虛的發(fā)生,一則“邪之所湊,其氣必虛”;二則本病病程較長(zhǎng),濕熱瘀血等邪氣長(zhǎng)期停留體內(nèi),會(huì)進(jìn)一步耗傷機(jī)體正氣。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證實(shí),C N B P是由相關(guān)細(xì)胞因子和免疫炎性細(xì)胞介導(dǎo)的局部免疫反應(yīng)[8]。I L-2是T輔助細(xì)胞(T h)分泌產(chǎn)生的一種前炎性細(xì)胞因子,其主要生物學(xué)活性是促進(jìn)T細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞(N K)的增殖,促進(jìn)B細(xì)胞分化、增殖及抗體生成,在C N B P時(shí)機(jī)體的免疫應(yīng)答、免疫調(diào)節(jié)中具有重要作用;I L-6是重要的抗炎性細(xì)胞因子,能下調(diào)和抑制I L-1和γ干擾素(I F N-γ)等前炎性細(xì)胞因子合成和產(chǎn)生;I L-2和I L-6均參與C N B P的局部免疫反應(yīng)。
本研究顯示,溫通針?lè)ㄝ^藥物能更顯著地降低大鼠血清I L-2和I L-6水平,其機(jī)理可能有以下幾個(gè)方面:第一、從針刺手法方面看,由于本病病理因素中以正虛最為關(guān)鍵,因而扶正祛邪成為治療本病的大法。故而運(yùn)用全國(guó)著名針灸專家鄭魁山教授的家傳手法“溫通針?lè)ā保?-10],溫可溫補(bǔ)脾腎,溫通陽(yáng)氣,振奮和提高正氣,通可疏通經(jīng)絡(luò),行氣和血,活血解毒,“溫”對(duì)正虛,“通”對(duì)邪實(shí),從而在最大范圍和程度上調(diào)整了前列腺局部氣血和免疫功能,起到了扶正祛邪的作用。第二、根據(jù)現(xiàn)代研究,溫通針?lè)ㄡ槾剃P(guān)元、曲骨等小腹部穴位,一可調(diào)節(jié)支配前列腺血液循環(huán)的腹壁淺動(dòng)、靜脈分支,髂總動(dòng)、靜脈及會(huì)陰動(dòng)、靜脈,從而有效改善前列腺局部微循環(huán),達(dá)到活血化瘀的治療目的;二可調(diào)節(jié)、整合支配前列腺的髂腹股溝神經(jīng)及會(huì)陰神經(jīng),緩解盆底肌群痙攣,松弛周圍肌肉,有益于前列腺管的引流通暢,解除了諸如會(huì)陰、少腹及腰骶部的墜脹疼痛等不適,促使前列腺分泌功能康復(fù)[11];針刺行間有抗炎和抗變態(tài)反應(yīng),擴(kuò)張外周血管,改善微循環(huán)等作用[12]。
綜上所述,溫通針?lè)ㄖ委烠 N B P的機(jī)理與降低I L-2、I L-6含量,調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能從而達(dá)到扶正祛邪的作用有關(guān)。而且本研究顯示溫通針?lè)黠@優(yōu)于藥物治療,療效確切,效果獨(dú)特,值得推廣應(yīng)用。
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Effects of Warm-promotion Needling on IL-2 and IL-6 of Rats with Chronic Nonbacterial Prostatitis
ZHAO Yaodong1,HAN Douying2
1 Gansu University of Traditional Chinese Medicine,Lanzhou 730000,China;2 Gansu Rehabilitation Central Hospital
Objective:To explore the mechanism of warm-promotion needling in treating chronic nonbacterial prostatitis(CNBP)by observing the effects of warm-promotion needling on the contents of IL-2 and IL-6 of rats with chronic nonbacterial prostatitis.Methods:All 60 rats were randomized into the acupuncture group,the medicine group,the model group and the blank group,15 rats each group.CNBP animal model was established by giving 25% XiaoZhiLing injection,0.2 mL (each dorsal lobe,0.1mL)to dorsal lobe of the prostate.The acupuncture group received warm-promotion needling,the medicine group accepted gastric administration of QianLieKang,once each day,for 30 days,the contents of IL-2 and IL-6 of rats in each group were observed.Results:The levels of IL-2 and IL-6 of rats in the acupuncture group were decreased more significantly than these of the medicine group (P<0.05).Conclusion:The mechanism of warm-promotion needling in treating chronic nonbacterial prostatitis might be related to regulating the immunity of the body,decreasing the contents of IL-2 and IL-6.
nonbacterial prostatitis,chronic;warm-promotion needling;IL-2;IL-6
R277.5
B
1004-6852(2014)05-0114-03
2014-01-26
國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào)81060304),甘肅省教育廳項(xiàng)目(編號(hào)0906B-03),甘肅省科技廳自然基金項(xiàng)目(編號(hào)1208RJZA 248)
趙耀東(1972—),男,碩士學(xué)位,副教授。研究方向:傳統(tǒng)針刺手法的臨床及實(shí)驗(yàn)研究。