李軍良，齊曦明，劉洪偉

（1.秦皇島市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北秦皇島066000；2.秦皇島市第一醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室；3.秦皇島市第一醫(yī)院急診科）

新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光檢測PSA的性能評價

李軍良＊，齊曦明，劉洪偉

（1.秦皇島市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北秦皇島066000；2.秦皇島市第一醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室；3.秦皇島市第一醫(yī)院急診科）

前列腺癌是老年男性常見的惡性腫瘤，在歐美男性中發(fā)病率和死亡率分別高居第一、二位的癌癥。我國前列腺癌發(fā)病率較低，但近年來呈明顯迅速上升的趨勢。前列腺特異性抗原（Prostate－specific antigen，PSA）篩查是目前被廣泛接受的前列腺癌常規(guī)篩檢項(xiàng)目。在人群中進(jìn)行PSA篩查的目的是及早發(fā)現(xiàn)前列腺癌，在提高前列腺癌診斷率的同時降低死亡率。前列腺特異性抗原（PSA）的檢測是前列腺癌早期篩查和病程監(jiān)測的主要指標(biāo)［1］。目前國內(nèi)檢測tPSA的方法有化學(xué)發(fā)光微粒測定法（CMIA）、電化學(xué)發(fā)光免疫測定法（ECLIA）、化學(xué)發(fā)光免疫分析法等。本實(shí)驗(yàn)針對目前國產(chǎn)與進(jìn)口化學(xué)發(fā)光檢測PSA，選擇羅氏電化學(xué)發(fā)光法作為比對試劑，驗(yàn)證新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光法測定PSA的臨床應(yīng)用的可行性及檢測結(jié)果的可靠性，進(jìn)一步了解該試劑盒能否用于臨床。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集秦皇島市第一醫(yī)院門診，病房患者標(biāo)本共124例。

1.2 標(biāo)本收集 秦皇島市第一醫(yī)院住院患者和門診受檢者，真空采血管采集靜脈血4ml，3000r／min離心10min，分離出血清作前列腺特異性抗原檢測，剩余血清－20℃凍存，以備重復(fù)測定。

1.3 儀器與試劑 （1）比對實(shí)驗(yàn)方法：①設(shè)備：德國羅氏診斷公司Elecsys e601電化學(xué)發(fā)光檢測系統(tǒng)；②試劑：儀器原裝配套TPSA試劑，試劑批號171687。方法學(xué)是電化學(xué)發(fā)光免疫測定法（ECLIA），檢測范圍0.010～100.00ng／ml.（2）評價實(shí)驗(yàn)方法：①設(shè)備：新產(chǎn)業(yè)Maglumi 2000Plus全自動化學(xué)發(fā)光測定儀；②試劑：儀器原裝配套TPSA試劑，試劑批號27130905。評價方法的方法學(xué)是化學(xué)發(fā)光免疫分析法，檢測范圍0.01～400ng／ml。

1.4 方法 ①計算各項(xiàng)檢測指標(biāo)：以羅氏PSA試劑盒為參比試劑盒，cut－off值為4ng／ml，計算新產(chǎn)業(yè)PSA試劑盒相對敏感度、相對特異性、總體符合率和Kappa一致性檢驗(yàn)。②相關(guān)性及偏倚分析：以羅氏PSA試劑盒作為參比試劑，評估新產(chǎn)業(yè)PSA試劑盒的檢測結(jié)果。兩種方法學(xué)檢測結(jié)果繪制散點(diǎn)圖，回歸分析用一元直線回歸分析，偏倚分析用Bland－Altman法。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS19.0統(tǒng)計分析方法P＜0.05表示具有統(tǒng)計學(xué)意義。應(yīng)用Kappa檢驗(yàn)判定兩種試劑盒間檢測結(jié)果的一致性，以Kappa值＞0.75表示兩者一致性較好。一元直線回歸分析計算相關(guān)系數(shù)（R2），R2＞0.95表示相關(guān)性良好。Bland－Atlman法中如絕大多數(shù)差值位于一致性界限（ˉx±1.96sd）之間，則可認(rèn)為兩種測量結(jié)果的差異是可接受的。

2 結(jié)果

2.1 相對敏感度、相對特異性、總體符合率結(jié)果

新產(chǎn)業(yè)PSA試劑盒的相對敏感度為98.64%，相對特異性為92%，與羅氏PSA試劑盒測定結(jié)果的總體符合率為95.96%，Kappa值為0.915，兩者一致性很好，新產(chǎn)業(yè)PSA與羅氏PSA比對結(jié)果見表1。

表1 新產(chǎn)業(yè)PSA與羅氏PSA 比對結(jié)果

2.2 相關(guān)性及偏倚分析 剔除9份檢測結(jié)果超限樣本，共選取115份樣本，在兩種試劑共同的檢測范圍0～100ng／ml中進(jìn)行相關(guān)性驗(yàn)證。羅氏PSA均值為11.86ng／ml，范圍為0～94.05ng／ml；新產(chǎn)業(yè)PSA均值為12.71ng／ml，范圍為0～91ng／ml。繪制散點(diǎn)圖（圖1），一元線性相關(guān)性分析顯示，新產(chǎn)業(yè)PSA試劑測定值與羅氏PSA試劑的測定值呈正相關(guān)，回歸方程Y＝0.306＋1.046 X R2＝0.969 P＜0.05。Bland－Altman分析顯示新產(chǎn)業(yè)PSA試劑盒與羅氏PSA試劑盒測定值的平均偏倚為－0.8486ng／ml，一致性界限－7.679～5.982ng／ml，除7組數(shù)據(jù)位于差值外，絕大多數(shù)差值都位于一致性界限內(nèi)，說明兩種方法具有較好的一致性（圖2）。

圖1 兩種試驗(yàn)盒測得PSA濃度散點(diǎn)圖

圖2 兩種試驗(yàn)盒測定PSA濃度Bland－Altman圖

3 討論

前列腺特異性抗原成為1992年被FDA批準(zhǔn)［2］以來最常用的篩查前列腺癌的腫瘤標(biāo)志物。其在前列腺癌的早期診斷和治療監(jiān)測有了廣泛的研究，參考上限4.0ng／ml已被臨床廣泛接受。PSA是一種由前列腺上皮細(xì)胞產(chǎn)生的糖蛋白，相對分子量為30000～34000道爾頓，由含有240個氨基酸的多肽鏈組成，是一種絲氨酸蛋白酶，具有類似胰蛋白酶和糜蛋白酶的酶活性［3］。目前，我國前列腺癌發(fā)病率呈快速上升趨勢，彭鵬等［4］研究發(fā)現(xiàn)2008年我國前列腺癌新發(fā)病例為33 802例，占男性所有惡性腫瘤發(fā)病例數(shù)的2.1%，居第8位；2008年中國15歲以上成年人前列腺癌5年患病例數(shù)為75 535例，占男性所有惡性腫瘤5年患病例數(shù)的3.5%，居第7位。韓蘇軍等［5］調(diào)查發(fā)現(xiàn)2008年，中國男性前列腺癌死亡率為4.07／10萬，0～74歲前列腺癌累積死亡率為0.18%。占中國男性惡性腫瘤死亡構(gòu)成的1.78%。城市男性前列腺癌死亡率（4.69／10萬）約為農(nóng)村（1.75／10萬）的2.7倍。王鑫等［6］在北京50歲以上體檢人群中發(fā)現(xiàn)隨著年齡的增長，PSA水平異常者的比例明顯增加，由50～59歲的23例（2.7%）升高至80～89歲的21例（12.8%）。因此篩查PSA具有重要的臨床意義。

進(jìn)口羅氏PSA試劑盒較早上市且已廣泛應(yīng)用于臨床，可以溯源［7］到世界衛(wèi)生組織（WHO）96／670，故以其作為參比試劑對國產(chǎn)新產(chǎn)業(yè)試劑進(jìn)行了相關(guān)性、一致性分析。新產(chǎn)業(yè)PSA試劑盒與羅氏PSA試劑盒的相對敏感度為98.64%，相對特異性為92%，與羅氏PSA試劑盒測定結(jié)果的總體符合率為95.96%，Kappa值為0.915，兩者一致性很好。兩種試劑相對敏感度、相對特異性和總體符合率都較理想；新產(chǎn)業(yè)試劑盒PSA濃度與羅氏試劑盒呈正相關(guān)，回歸方程Y＝0.306＋1.046X（R2＝0.969，P＜0.05）。本研究發(fā)現(xiàn)，除7組數(shù)據(jù)位于差值外，Bland－Altman偏倚分析顯示，絕大多數(shù)差值都位于－7.679～5.982ng／ml的一致性界限內(nèi)，說明兩種方法具有較好的一致性，由此說明新產(chǎn)業(yè)PSA試劑盒與羅氏PSA試劑盒一致性良好。評價方法新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光檢測PSA與比對方法羅氏電化學(xué)發(fā)光總體間的符合情況良好。國產(chǎn)新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光儀器、PSA試劑相對進(jìn)口化學(xué)發(fā)光價格便宜，利于臨床推廣，PSA在兩個儀器上相關(guān)性好，能夠滿足臨床需要。

［1］Armbruster DA.Prostate－specific antigen：biochemistry，analytical methods，and clinical application［J］.Clinical chemistry，1993，39（2）：181.

［2］Charatan FB.FDA approves test for prostatic cancer［J］.BMJ，1994，309（6955）：628.

［3］Henttu P，Vihko P.Prostate－specific antigen and human glandular kallikrein：two kallikreins of the human prostate［J］.Annals of medicine，1994，26（3）：157.

［4］彭 鵬，龔楊明，鮑萍萍，等.中國2008年前列腺癌發(fā)病，死亡和患病情況的估計及預(yù)測［J］.中華流行病學(xué)雜志，2012，33（10）：1056.

［5］韓蘇軍，張思維，陳萬青，等.中國前列腺癌死亡現(xiàn)狀及流行趨勢分析［J］.中華泌尿外科雜志，2012，33（011）：836.

［6］王 鑫，劉 明，李 萍，等.北京地區(qū)50歲以上體檢人群前列腺特異性抗原篩查結(jié)果分析［J］.中華泌尿外科雜志，2013，34（006）：462.

［7］Rafferty B，Rigsby P，Rose M，et al.Reference reagents for prostate－specific antigen（PSA）：establishment of the first international standards for free PSA and PSA（90：10）［J］.Clinical chemistry，2000，46（9）：1310.

李軍良（1979－）河北省秦皇島市，本科，主要從事免疫學(xué)檢驗(yàn)。

2013－06－12）

1007－4287（2014）07－1186－02

＊通訊作者