舒 宏，易 珍，謝 麗，黃軍強(qiáng)，王 健，江宗蔚，曹 昭＊

（1.廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，廣西南寧530021；2.廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院）

廣西地區(qū)4031例人乳頭狀瘤病毒感染狀況及基因亞型分布特征分析

舒 宏1，易 珍2，謝 麗2，黃軍強(qiáng)2，王 健2，江宗蔚1，曹 昭2＊

（1.廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，廣西南寧530021；2.廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院）

宮頸癌是一種常見的女性惡性腫瘤，發(fā)病率僅次于乳腺癌，其發(fā)病率和病死率均較高。在我國，每年宮頸癌的新發(fā)病例超過13萬例，約占全球的新發(fā)病例的30%［1］。而人乳頭狀病毒（human papilloma virus，HPV）是引起宮頸癌及宮頸癌前病變的主要病因，目前已知可導(dǎo)致宮頸病變的HPV有30多種亞型［1］。據(jù)統(tǒng)計(jì)，80%以上的女性一生曾感染過HPV，其中少數(shù)人為持續(xù)性感染，與相關(guān)危險(xiǎn)因素共同作用下，導(dǎo)致機(jī)體防御機(jī)制破壞和宮頸病變的發(fā)生，發(fā)展為宮頸上皮瘤變并最終進(jìn)展為浸潤性宮頸癌［2，3］。HPV疫苗的問世使宮頸癌的預(yù)防成為了可能。研究表明，HPV基因型的分布具有明顯的年齡和地區(qū)分布的特異性［4］，因此，本研究基于HPV感染的現(xiàn)狀以及年齡進(jìn)行分析，為HPV疫苗在廣西地區(qū)的應(yīng)用提供流行病學(xué)參考。

1 材料與方法

1.1 一般資料

采集2012年1月至12月到廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院及附屬腫瘤醫(yī)院就診的4031例女性患者，年齡15－86歲，回顧性收集患者的相關(guān)臨床資料。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 使用陰道窺器暴露宮頸，用無菌生理鹽水棉球洗去宮頸外分泌物后，將宮頸刷置于宮頸口，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5周，所有標(biāo)本置于已加專有細(xì)胞保存液的取樣管中，密閉送檢。

1.2.2 試劑及儀器 購自凱普生物科技有限公司的HPV分型檢測(cè)試劑盒，ABI 2700PCR擴(kuò)增儀以及HybrimMax醫(yī)用核酸分子導(dǎo)流雜交儀。

1.2.3 DNA提取 取含0.5ml含宮頸細(xì)胞的保存液，安裝凱普生物科技有限公司的說明書步驟操作，提取DNA模板。

1.2.4 PCR擴(kuò)增 按照說明書配置PCR mix，加入DNA模板后瞬時(shí)離心。PCR反應(yīng)條件為：95℃，9min；95℃，20s，55℃，30s，72℃，30s，40個(gè)循環(huán)；72℃，5min。

1.2.5 雜交結(jié)果判定 共檢測(cè)21個(gè)HPV基因型，其中包括高危型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68；低危型：6、11、42、43、44；中危型：53、CP8304。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，用t檢驗(yàn)分析兩組之間的差異，計(jì)數(shù)資料采用率表示，并采用χ2檢驗(yàn)分析不同年齡組感染率的差異，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV檢測(cè)結(jié)果

在4031例患者樣本中，HPV陽性患者共1602例，檢出率為39.74%。其中，高危亞型檢出率為30.98%（1249／4031例），低危亞型檢出率為15.18%（612／4031例），混合感染率為6.4%（259／4031例）。

2.2 高、低危亞型HPV基因亞型分布

在1249例高危亞型感染標(biāo)本中，單重感染率為77.74%，多重感染率為22.26%，其中最常見的亞型分別為16、58和52，其陽性率分別為35.79%、24.34%和23.86%，而在217例多重高危感染標(biāo)本中，以16亞型合并其他高危亞型感染最為常見，占42.09%（117／278例）。在612例中低危亞型感染標(biāo)本中，單重感染率為88.24%（540／612例），多重感染率為11.76%（72／612例）。其中低危亞型單重感染最常見的為6型和11型，其檢出率分別為33.66%和29.09%。

2.3 HPV感染的年齡分布情況

HPV陽性組1602例和HPV陰性組2429例，HPV陰、陽性組年齡分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。為了統(tǒng)計(jì)分析不同年齡段HPV感染率，將4031例患者按不同年齡分為5個(gè)年齡段，分別為＜25歲組、25－34歲組、35－44歲組、45－54歲和≥55歲組。統(tǒng)計(jì)分析各組HPV感染率，結(jié)果顯示（見表1），＜25歲組的總HPV感染率及雙重感染率遠(yuǎn)高于其他四組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。

表1 不同年齡段女性患者HPV感染率

3 討論

HPV感染時(shí)女性宮頸癌錢病變和宮頸癌的主要原因，根據(jù)不同基因型導(dǎo)致的病變程度，可以將其分為高危型、低危型及其他型［6］，且由于不同亞型HPV病毒的編碼外殼蛋白基因變異很大，導(dǎo)致不同亞型HPV之間沒有交叉保護(hù)抗體，容易導(dǎo)致不同基因型HPV的多重感染［7］。在普通人群中，HPV感染非常普遍，正常婦女HPV感染率為20%－46%［8］。在本文結(jié)果中，HPV的陽性結(jié)果達(dá)39.74%，與浙江紹興市相近，遠(yuǎn)高于梅州、西安、重慶及新疆等地區(qū)［9－13］。其中，高危型主要以HPV16、58和52為主，低危型主要以HPV6、11為主，與Lee等［14］等報(bào)道全世界高危型HPV主要是HPV16和18亞型不相符，可能與民族和地區(qū)，以及各地區(qū)人群健康意識(shí)存在差異有關(guān)。年齡也是影響HPV流行的一個(gè)重要因素。在調(diào)查中，HPV感染高發(fā)年齡段為＜25歲性活躍年齡女性，與其他年齡組感染有顯著差異，與北京、廣州等地區(qū)的調(diào)查結(jié)果基本一致，HPV感染有低齡化、年輕化的趨勢(shì)。目前，已投入臨床應(yīng)用的HPV疫苗主要針對(duì)HPV高危型的16、18以及低危型的6、11。在本調(diào)查中，發(fā)現(xiàn)廣西地區(qū)女性HPV感染率很高，高危型HPV感染主要以單重感染為主；在多重感染中，以16型合并58、51型最多見，提示研制16、58及52型三價(jià)HPV疫苗能覆蓋大部分人群。

［1］Arbyn M，Walker A，Meijer CJ.HPV－based cervical－cancer screening in China［J］.Lancet Oncol，2010，11（12）：1112.

［2］LANG JH，Diagnosis and treatment of cervical intraepithelial neoplasia［J］，China J Obstet Gynecol，2001，36（5）：261.

［3］Cantor SB，Atkinson EN，Cardenas－Turanzas M，et al Natural history of cervical intraepithelial neoplasia［J］.Acta Cytol，2005，49：405.

［4］Wright TC Jr，Huh WK，Monk BJ，et al.Age considerations when vaccinating against HPV［J］.Gynecol Oncol，2008，109：40.

［5］Cuschieri K，Brewster DH，Williams AR，et al.Distribution of HPV types associated with cervical cancers in Scotland and implications for the impact of HPV vaccines［J］.Br J Cancer，2010，102（5）：930.

［6］Zheng AM，Baker CC，et al.Papillomavirus genome structure，expression and post－transcriptional regulation［J］.Front Biosci，2006，11：2286.

［7］Bachtiary B，Obemair A，Dreier B，et al.Impact of multiple HPV infection on response to trentment and survival in patients receiving radical radiotheraphy for cervical cancer［J］.Int J Cancer，2002，102：237.

［8］Weaver BA.Epidemiology and natural history of genital human papillomavirus infection［J］.J Am Osteopath Assoc，2006，106：2.

［9］楊海坤.梅州市婦女HPV感染研究［J］.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2011，8（9）：78.

［10］瑪依努爾，尼牙孜，李 麗，陳 鳳，等.新疆維吾爾族女性人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌相關(guān)性的流行病學(xué)調(diào)查［J］.臨床腫瘤學(xué)雜志，2011，16（4）：322.

［11］劉 靜，張曉艷，齊寧霞，等.西安地區(qū)人乳頭瘤病毒感染型別分析及臨床意義［J］.中外婦兒健康，2011，19（4）：42.

［12］陳 棟，王貴宇，王 豐，等.重慶地區(qū)人乳頭狀瘤病毒感染及其基因型分布特點(diǎn)［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（10）：2025.

［13］余鑫煜，孫紅崗，李志國，等.女性人乳頭瘤病毒感染及基因型別分析［J］.醫(yī)學(xué)研究雜志，2011，40（12），98.

［14］Bulk S，Berkhof J，Bulkmans NW，et al.Preferential risk of HPV16for squamous cell carcinoma and of HPV18for adenocarcinoma of the cervix compared to women with normal cytology in the Netherlans［J］.Br J Cancer，2006，94（1）：171.

舒宏（1981－），女，主管技師，從事臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作。

2013－06－10）

1007－4287（2014）07－1175－02

＊通訊作者