馬怡婷

（黑龍江護(hù)理高等專(zhuān)科學(xué)校，黑龍江 哈爾濱 150086）

從氧化應(yīng)激途徑探討低蛋白飲食加復(fù)方α–酮酸治療Ⅳ期糖尿病腎病的機(jī)制

馬怡婷

（黑龍江護(hù)理高等專(zhuān)科學(xué)校，黑龍江 哈爾濱 150086）

以糖尿病腎?、羝诨颊邽檠芯繉?duì)象，從氧化應(yīng)激的途徑來(lái)探討復(fù)方α–酮酸加低蛋白飲食的治療機(jī)制。方法 入選糖尿病腎?、羝诨颊?5例，隨機(jī)分組為正常蛋白飲食組（A）15例，低蛋白飲食加復(fù)方氨基酸膠囊組（B）15例，低蛋白飲食加復(fù)方α–酮酸組（C）15例。三組分別于治療前、治療12周后測(cè)定四項(xiàng)氧化應(yīng)激指標(biāo)：硝基酪氨酸、羰基化蛋白、共軛雙烯、8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷。結(jié)果 ①組內(nèi)比較：A組四項(xiàng)指標(biāo)治療后均較治療前略有提高，其差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；B組四項(xiàng)指標(biāo)水平均較治療前略有降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。C組四項(xiàng)水平均較治療前明顯降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。②組間比較：治療前，三組各指標(biāo)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療后，A組水平高于其他兩組，C組降低比B組顯著，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論 復(fù)方α–酮酸加低蛋白飲食治療可延緩糖尿病腎?、羝诨颊哐趸瘧?yīng)激過(guò)程。

復(fù)方α–酮酸；糖尿病腎??；硝基酪氨酸；羰基化蛋白；共軛雙烯；8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷

糖尿病腎病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病最常見(jiàn)的慢性并發(fā)癥之一，許多的研究[1]表明氧化應(yīng)激在其發(fā)病發(fā)展過(guò)程中起著主導(dǎo)作用，大量研究[2]證實(shí)，蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、DNA三大分子氧化應(yīng)激的標(biāo)志性產(chǎn)物有硝基酪氨酸（nitrotyrosine，NT）、羰基化蛋白（protein carbonyl，PC）、共軛雙烯（conjugated dienes，CD）、8羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8-hydroxy-2'-deoxyguanosine，8-OHdG ）。本實(shí)驗(yàn)選擇Ⅳ期糖尿病腎病患者，在給低蛋白飲食治療的同時(shí)，加用復(fù)方α–酮酸治療，探討低蛋白飲食加復(fù)方α–酮酸對(duì)糖尿病腎?、羝诨颊哐趸瘧?yīng)激指標(biāo)的影響，希望能為糖尿病腎病的治療提供新的思路。

1 材料與方法

選擇2010年9月至2012年9月哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院內(nèi)分泌科糖尿病腎?、羝诨颊吖?5例，隨機(jī)分為正常蛋白質(zhì)飲食組（A）15例，低蛋白飲食加氨基酸膠囊組（B）15例，低蛋白飲食加復(fù)方α–酮酸組（C）15例?；颊呷脒x后A組給予正常蛋白飲食，每日蛋白攝入量1 g/（kg·d），B、C組給予低蛋白飲食，每日蛋白攝入量0.6 g/（kg·d），所有患者攝入熱量≥35 kcal/（kg·d），同時(shí)低磷飲食。治療期間常規(guī)用藥，未使用促進(jìn)或抑制蛋白分解的藥物，未從腸道外途徑補(bǔ)充蛋白質(zhì)。在其他治療相同的前提下，B組服用氨基酸膠囊治療，C組給予口服復(fù)方α–酮酸治療。三組分別于治療前、治療12周后采用Elisa法測(cè)定相關(guān)指標(biāo)。測(cè)定結(jié)果采用SAS9.1軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)資料均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，各組治療前后組內(nèi)比較用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)，各組組間生化指標(biāo)比較用單項(xiàng)方差分析，氧化應(yīng)激指標(biāo)比較用協(xié)方差分析。以P＜0.05或P＜0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

基本描述見(jiàn)表1。用單向方差分析進(jìn)行三組患者間年齡和病程比較，P＞0.05，無(wú)顯著差異。三組患者治療前后氧化應(yīng)激指標(biāo)對(duì)比見(jiàn)表2。三組間治療前后組內(nèi)比較存在差異，組間比較亦存在差異。

表1 入選患者情況()

表1 入選患者情況()

組別 例數(shù) 年齡(歲) 病程(年)正常蛋白飲食對(duì)照組(A) 15 56.85±6.23 8.1±4.9低蛋白飲食加復(fù)方氨基酸膠囊組(B) 15 57.11±5.01 8.6±2.8低蛋白飲食加復(fù)方α-酮酸組(C) 15 56.27±7.33 9.3±4.4

表2 三組患者治療前后氧化應(yīng)激指標(biāo)對(duì)比()

表2 三組患者治療前后氧化應(yīng)激指標(biāo)對(duì)比()

注：治療后與治療前組內(nèi)比較，*P＜0.01；治療后C組與A組組間比較，#P＜0.05；治療后C組與B組組間比較，ΔP＜0.05

8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(ng/mL) A組12周前 102.14±10.79 11.78±0.99 1.91±0.03 64.33±5.11 A組12周后 105.84±13.67 12.94±0.92 2.39±0.23 68.38±7.10 B組治療前 101.7±10.7 11.23±7.08 1.88±1.58 64.18±10.31 B組治療后 98.2±15.9 10.29±9.19 1.41±0.78 60.09±9.02 C組治療前 103.2±11.3 11.67±3.18 1.93±1.53 65.18±9.38 C組治療后 95.37±6.6*#Δ 9.6±2.02*#Δ1.13±0.81*#Δ57.31±7.99*#Δ組別 硝基酪氨酸(ng/mL)羰基蛋白(ng/mL)共軛雙烯(ng/mL)

3 討 論

糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制至今未完全闡明，為了證實(shí)低蛋白飲食加用復(fù)方α–酮酸治療在延緩糖尿病腎病氧化應(yīng)激發(fā)生、發(fā)展中的重要作用，本研究檢測(cè)了糖尿病腎病患者采取三種不同方案治療前后體內(nèi)蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、DNA三大分子的氧化的標(biāo)志性產(chǎn)物，并分析了它們之間的關(guān)系，以探討復(fù)方α-酮酸治療糖尿病腎病的機(jī)制。為了減少其他的影響因素，各組之間的年齡、性別、病程無(wú)顯著差異，并且嚴(yán)格的排除了可能引起氧化水平增高的疾病，如感染、衰老、腫瘤等。結(jié)果顯示治療后C組患者血中NT、PC、CD、8-OHdG含量下降，差異有顯著性，表明低蛋白飲食加用復(fù)方α–酮酸治療可延緩糖尿病腎病蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、DNA氧化應(yīng)激過(guò)程，其效果優(yōu)于低蛋白飲食加復(fù)方氨基酸膠囊治療方案，正常蛋白飲食組的氧化應(yīng)激過(guò)程進(jìn)一步進(jìn)展。

C組患者在復(fù)方α-酮酸加低蛋白飲食治療后，蛋白質(zhì)硝基化的氧化應(yīng)激指標(biāo)水平下降，提示復(fù)方α-酮酸加低蛋白質(zhì)飲食對(duì)延緩糖尿病臨床腎病期患者蛋白質(zhì)氧化應(yīng)激過(guò)程具有不容忽視的作用，其治療機(jī)制中可能的作用為：α-酮酸不含NH2基，在體內(nèi)可與NH2結(jié)合，通過(guò)相應(yīng)轉(zhuǎn)氨酶轉(zhuǎn)化成對(duì)應(yīng)的必需氨基酸，從而促進(jìn)體內(nèi)合成氨基酸，同時(shí)降低血尿素氮，改善氮質(zhì)血癥，不增加尿素產(chǎn)生，從而減少蛋白質(zhì)酪氨酸殘基或游離酪氨酸發(fā)生硝基化反應(yīng)。超量攝入的α-酮酸最終轉(zhuǎn)化為二氧化碳和水并供能，改善代謝。

C組患者在復(fù)方α-酮酸加低蛋白飲食治療后，脂質(zhì)氧化應(yīng)激指標(biāo)水平下降，其治療機(jī)制中可能的作用為：多項(xiàng)在糖尿病或非糖尿病腎病患者中進(jìn)行的研究證實(shí)，復(fù)方α-酮酸合并低蛋白飲食顯著降低患者低密度脂蛋白膽固醇和三酰甘油水平，同時(shí)升高高密度脂蛋白膽固醇。體外實(shí)驗(yàn)表明氧化低密度脂蛋白對(duì)系膜細(xì)胞有直接毒性作用，并呈劑量相關(guān)性。此外，氧化低密度脂蛋白具有免疫原性，能使機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，加重血管壁的損害。復(fù)方α-酮酸可以通過(guò)降低低密度脂蛋白的水平，減少共軛雙烯等氧化應(yīng)激產(chǎn)物的生成。

C組患者在復(fù)方α-酮酸加低蛋白飲食治療后，蛋白質(zhì)糖基化的氧化應(yīng)激指標(biāo)、DNA氧化應(yīng)激指標(biāo)水平下降，其關(guān)系機(jī)制現(xiàn)無(wú)相關(guān)報(bào)道，有待于進(jìn)一步研究。

總之，糖尿病腎病Ⅳ期患者進(jìn)行低蛋白[0.6 g/（kg·d）]飲食加用復(fù)方α–酮酸治療可以降低患者硝基酪氨酸、羰基化蛋白、共軛雙和8-OHdG水平，延緩蛋白質(zhì)、脂肪和DNA氧化應(yīng)激過(guò)程，延緩腎病的進(jìn)展，使糖尿病腎病患者生存率和生活質(zhì)量都得到提高。

[1] Taniyama Y,Griendling KK.Reactive oxygen species in the vasculature: molecular and cellular mechanisms[J].HyPertension,2003,42(6):1075-1081.

[2] Ceriello A,Mercuri F,Quagliaro L,et al.Detection of nitrotyrosine in the diabetic plasma: evidence of oxidative stress[J].Diabetolog ia,2001,44(7):834-838.

R587.2

B

1671-8194（2014）18-0113-02