張幸福，張 煒

（青海省食品藥品檢驗(yàn)所，青海 西寧 810016）

九味羌活系列制劑系從古方九味羌活湯演變而來(lái)，由羌活、防風(fēng)、蒼術(shù)、細(xì)辛、川芎、白芷、黃芩、甘草、地黃等藥材組方，有大蜜丸、小蜜丸、濃縮丸、水丸和九味羌活顆粒等劑型，主要功效為疏風(fēng)解表、散寒除濕，用于外感風(fēng)寒所致的感冒。方中羌活、川芎、防風(fēng)、蒼術(shù)、細(xì)辛含有多種揮發(fā)性成分，目前對(duì)九味羌活制劑的研究大多限于其中單味藥的成分和藥理活性研究，而對(duì)制劑整方的物質(zhì)基礎(chǔ)和配伍效應(yīng)的研究則少有報(bào)道。為探討揮發(fā)性成分在復(fù)方中的作用，尋找九味羌活制劑治療風(fēng)寒感冒疾病的物質(zhì)基礎(chǔ)，筆者采用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用(GC－MS)法對(duì)九味羌活制劑中揮發(fā)性成分進(jìn)行研究，并模擬相同條件對(duì)各單味藥材進(jìn)行了與九味羌活制劑的分析比較，為九味羌活制劑的物質(zhì)基礎(chǔ)與配伍機(jī)理研究奠定了基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

賽默飛世爾Triplus GC－DSQⅡ型氣相色譜－質(zhì)譜檢測(cè)聯(lián)用儀；賽默飛世爾 TR －1MS－30M 型毛細(xì)管柱（0．25 mm ×0．25 μm）；OHAUS AR5120型電子天平（奧豪斯公司）；HANGPING FA1004型電子天平（上海天平儀器廠）。無(wú)水硫酸鈉（分析純，天津市化學(xué)試劑廠）；正己烷（分析純）；羌活、川芎、防風(fēng)、蒼術(shù)、細(xì)辛購(gòu)自藥材市場(chǎng)，經(jīng)鑒定均為2010年版《中國(guó)藥典（一部）》收載品種；九味羌活系列制劑，其中大蜜丸4批，小蜜丸2批，濃縮丸4批，水丸16批，顆粒劑10批。

2 方法與結(jié)果

2．1 GC －MS 件[1－2]

程序升溫：初始溫度為50℃，保持10 min，以 5℃ ／min的速率升溫至80℃，以8℃ ／min的速率升溫至110℃并保持10 min，以 1．8℃ ／min的速率升溫至 160℃，以 2．5℃ ／min的速率升溫至200℃，以5℃ ／min的速率升溫至240℃并保持7 min。載氣為高純氦氣。進(jìn)樣口溫度：250℃；傳輸線溫度：250℃；節(jié)氣模式；真空補(bǔ)償；恒流模式，流量 1．0 mL ／min；分流進(jìn)樣，Split Flow為 150 mL ／min，Split Ratio為 150，Splitless Time為 1．00 min。 離子源溫度：250℃；溶劑延遲時(shí)間：3．5 min；電離方式：電子轟擊（EI）源；電離能量：70 eV；掃描模式：全掃描 ／Full scan，掃描范圍m ／z 20～650。

2．2 溶液提取和制備

取羌活、川芎、防風(fēng)、蒼術(shù)、細(xì)辛藥材，粉碎成細(xì)粉。分別稱取約50 g（準(zhǔn)確至 0．01 g），置 1 000 mL 圓底燒瓶中，加純化水 500 mL，加沸石少許，上端加揮發(fā)油測(cè)定器，自上端加滿純化水，用移液器加正己烷4 mL至揮發(fā)油測(cè)定器上端，與水液分層。調(diào)節(jié)溫度，保持收集餾出液6 h，冷卻，收集正己烷液，用無(wú)水硫酸鈉過(guò)濾，即得5種對(duì)照藥材揮發(fā)油。取九味羌活制劑樣品，稱取約50 g（蜜丸剪碎、濃縮丸和水丸砸碎成顆粒，準(zhǔn)確至0．01 g），置1 000 mL圓底燒瓶中，按對(duì)照藥材揮發(fā)油提取方法處理，即得樣品揮發(fā)油。取提取樣品的同批次正己烷，作為空白試劑。

圖1 九味羌活制劑中揮發(fā)油的總離子流圖

2．3 測(cè)定法

分別精密吸取空白試劑、5種對(duì)照藥材揮發(fā)油、樣品揮發(fā)油各1 μL，注入 GC－MC檢測(cè)儀，測(cè)定。代表性總離子流圖見(jiàn)圖1?？梢?jiàn)，空白試劑無(wú)明顯干擾。

2．4 成分鑒定

將GC－MS所得質(zhì)譜信息用質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)NIST08．L計(jì)算機(jī)檢索，同時(shí)采用人工圖譜解析，按各色譜峰的質(zhì)譜裂解圖與庫(kù)和文獻(xiàn)核對(duì)，鑒定出了其中35個(gè)化合物，并確定了歸屬，設(shè)定了各藥材的主要特征峰或峰簇。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 16個(gè)生產(chǎn)企業(yè)5種劑型的九味羌活制劑揮發(fā)性成分GC－MS特征峰分析

3 討論

對(duì)制劑中鑒定出的35個(gè)成分進(jìn)行峰檢出數(shù)判斷，蜜丸中檢出28～33個(gè)，濃縮丸中檢出26～31個(gè)，水丸中檢出0～29個(gè)，顆粒劑中檢出0～26個(gè)。

根據(jù)設(shè)定的各味藥材的特征峰進(jìn)行了專屬性檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)九味羌活制劑中存在特征峰缺失的情況。分析5味藥材在蜜丸、顆粒劑、濃縮丸和水丸中特征峰的檢出比例，羌活分別為100%，10%，50%，29%；川芎分別為100%，40%，100%，94%；蒼術(shù)分別為100%，50%，100%，94%；細(xì)辛分別為100%，30%，25%，47%；防風(fēng)分別為 100%，0，100%，88%。

顆粒劑中羌活、川芎、防風(fēng)、蒼術(shù)、細(xì)辛5味藥材的入藥工藝為，將提取揮發(fā)油噴灑在藥物表面，然后封袋包裝，在儲(chǔ)藏和運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)造成揮發(fā)油的損失，影響藥物質(zhì)量。應(yīng)考慮從藥材質(zhì)量源頭開(kāi)始，規(guī)范使用和生產(chǎn)過(guò)程及提高制劑的工藝技術(shù)。對(duì)于顆粒劑，已有進(jìn)行工藝改進(jìn)的報(bào)道，如采用環(huán)糊精包合技術(shù)等[3－7]。

參考文獻(xiàn)：

[1]黃華花，吳春敏．維C銀翹片揮發(fā)性成分GC－MS特征圖譜研究[J]．藥物分析雜志，2011，31(4)：768 －771．

[2]吳 芳，郭增軍，羅定強(qiáng)，等．五苓系列制劑中揮發(fā)油的GC指紋圖譜研究[J]．藥物分析雜志，2013，33(8)：1 355 －1 358．

[3]曲永勝．不同工藝對(duì)九味羌活顆粒中歐前胡素及異歐前胡素含量的影響[J]．齊魯藥事，2009，28(11)：692 －694．

[5]劉 新．環(huán)糊精衍生物及改性淀粉包合九味羌活揮發(fā)油的研究[J]．中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2008，28(10):799 －802．

[6]高 燕，趙渤年，丁曉彥．多指標(biāo)正交實(shí)驗(yàn)法研制九味羌活揮發(fā)油－ 環(huán)糊精包合物[J]．時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2007，18(8)：1 901 －1 902．