摘要：上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）是指上皮細(xì)胞在特定的生理和病理情況下向間充質(zhì)細(xì)胞分化的現(xiàn)象，EMT在胚胎發(fā)育、組織損傷修復(fù)以及腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程中起重要作用。近年發(fā)現(xiàn)，上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）與腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)?，F(xiàn)就EMT與宮頸癌侵襲、轉(zhuǎn)移的相關(guān)研究做一綜述。

關(guān)鍵詞：上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化；宮頸癌；轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)

宮頸癌是女性第二大常見(jiàn)惡性腫瘤，發(fā)病率僅次于乳腺癌、肺癌，位居第3位[1]，嚴(yán)重危害著女性健康。每年我國(guó)宮頸癌發(fā)病患者超過(guò)13.1萬(wàn)例，80%的患者確診時(shí)已發(fā)展為浸潤(rùn)癌，每年超過(guò)5萬(wàn)例死于宮頸癌（數(shù)據(jù)來(lái)源中國(guó)宮頸癌防治網(wǎng)）。宮頸癌侵襲、轉(zhuǎn)移是嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量并最終導(dǎo)致死亡的主要原因。腫瘤細(xì)胞存在上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epi-thelial-mesenchymal transition，EMT），并且被認(rèn)為是腫瘤細(xì)胞發(fā)生浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的第一步?，F(xiàn)就EMT調(diào)控以及與宮頸癌侵襲、轉(zhuǎn)移的相關(guān)研究進(jìn)展綜述如下。

1 EMT概念及調(diào)控機(jī)制

上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）是指上皮細(xì)胞在特定的生理和病理情況下向間充質(zhì)細(xì)胞分化的現(xiàn)象，即由有極性分布、靜止的上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化為無(wú)極性分布、運(yùn)動(dòng)活躍的間質(zhì)樣細(xì)胞的過(guò)程。EMT在胚胎發(fā)育、組織損傷修復(fù)以及腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程中起重要作用。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化表現(xiàn)為上皮標(biāo)記物（如E-cadherin、角蛋白、Ep-CAM等）表達(dá)降低；立方上皮細(xì)胞的細(xì)胞角蛋白結(jié)構(gòu)改變，外形演變?yōu)榧忓N形纖維細(xì)胞形態(tài)；間質(zhì)標(biāo)記物（如波形蛋白、纖維連接素、N-cad等）表達(dá)增加。EMT受一組轉(zhuǎn)錄阻礙蛋白（ZEB-1、ZEB-2、Twsit、Snail、Slug）調(diào)控，后者作用于E-cad啟動(dòng)子，通過(guò)一系列表觀遺傳學(xué)改變，抑制E-cad轉(zhuǎn)錄及表達(dá)。細(xì)胞表面E-cad分子低表達(dá)及失表達(dá)，引起細(xì)胞間黏附減少，同時(shí)導(dǎo)致胞漿內(nèi)游離β-catenin升高，并進(jìn)入細(xì)胞核與轉(zhuǎn)錄因子LEF（lymphoid enhancer binding factor，LEF）形成復(fù)合體，激活間質(zhì)細(xì)胞相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄及表達(dá)。TGF-β、Notch、Wnt、Hedgehog等信號(hào)分子都可以通過(guò)相應(yīng)途徑激活轉(zhuǎn)錄阻遏蛋白（ZEB-1、ZEB-2、Twist、Snail、Slug）表達(dá)，誘導(dǎo)EMT形成。體外試驗(yàn)表明，尼古丁、酒精等可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生EMT，異黃酮等則可阻斷EMT形成[2]。

2 EMT對(duì)其他腫瘤的影響

2.1對(duì)大腸癌肝轉(zhuǎn)移的影響 大腸癌目前證實(shí)是一個(gè)很好的模型，用來(lái)研究EMT在一般實(shí)體腫瘤中的角色。部分原因是它廣為人知地轉(zhuǎn)移至肝臟和其他的致命部位[8]。事實(shí)上，最近一項(xiàng)采用了轉(zhuǎn)錄分析技術(shù)分析報(bào)道的研究表明，326例結(jié)腸癌患者的微點(diǎn)陣數(shù)據(jù)與EMT信號(hào)的結(jié)腸癌基因表達(dá)模式有緊密聯(lián)系[9]。TGF-β和腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）能誘導(dǎo)EMT已經(jīng)被證實(shí)。整合素αvβ6表達(dá)的增加伴隨著EMT。在異種移植的研究中，進(jìn)一步說(shuō)明在腫瘤細(xì)胞侵犯的周圍間質(zhì)組織中，鈣黏素E的缺失與整合素αvβ6表達(dá)的增加有密切聯(lián)系。重要的是，對(duì)那些臨床患者組織的研究中，研究顯示這些數(shù)據(jù)標(biāo)志著患者不良的預(yù)后。免疫組化研究顯示，F(xiàn)LH2（four-and-a-half LIM protein2）在轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中的高度表達(dá)，進(jìn)一步證明了TGF-β1誘導(dǎo)的EMT在大腸癌的進(jìn)展、侵襲及轉(zhuǎn)移的重要性。

2.2 EMT與乳腺癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系 研究發(fā)現(xiàn)，從人類乳腺癌組織中提取的成纖維細(xì)胞可以誘導(dǎo)EMT，并增加體外直接共同培養(yǎng)癌細(xì)胞模型的遷移能力[10]。乳腺癌細(xì)胞系全基因組轉(zhuǎn)錄譜的鑒定結(jié)果顯示，EMT相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)與其侵襲轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)[11-12]。研究表明，基底型乳腺癌更易發(fā)生EMT。具有更高的侵襲轉(zhuǎn)移能力[13]。從骨髓微轉(zhuǎn)移灶分離的乳腺癌細(xì)胞也顯示與侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的EMT特征[4]。研究還發(fā)現(xiàn)，在原發(fā)性乳腺癌中常出現(xiàn)細(xì)胞角蛋白缺失，這與EMT在促使癌細(xì)胞擴(kuò)散至周圍基質(zhì)的機(jī)制相一致[14]。研究還表明，E-鈣黏蛋白的表達(dá)下調(diào)能夠明顯增強(qiáng)乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移能力[15]，而給予外源性E-鈣黏蛋白盡管并不足以使間質(zhì)細(xì)胞表型逆轉(zhuǎn)，但能夠抑制乳腺癌轉(zhuǎn)移[16-17]。

2.3 EMT及其轉(zhuǎn)錄因子在口腔鱗癌中的作用 體內(nèi)口腔鱗癌細(xì)胞往往通過(guò)淋巴系統(tǒng)向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。在口腔鱗癌細(xì)胞系43A（原發(fā)腫瘤細(xì)胞系）和43B（復(fù)發(fā)腫瘤細(xì)胞系）研究EMT的發(fā)生機(jī)發(fā)現(xiàn)，43A表達(dá)典型的上皮細(xì)胞表型，主要表現(xiàn)在E-cadherin和laminin-332（laminin-5）的表達(dá)。此外，還有Vimentin filaments和N-cadherin表達(dá)；反而，已經(jīng)歷EMT轉(zhuǎn)變的復(fù)發(fā)腫瘤細(xì)胞43B表達(dá)特征。在2種口腔鱗癌細(xì)胞系中，Snail、Slug及Twist都可以單獨(dú)直接抑制E-cadherin表達(dá)，并高表達(dá)誘導(dǎo)產(chǎn)生的EMT，使上皮細(xì)胞表現(xiàn)纖維原細(xì)胞表型并獲得轉(zhuǎn)移性[18]。

3 EMT與宮頸癌侵襲、轉(zhuǎn)移

EMT在宮頸癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移中起重要作用。Lee等[3]發(fā)現(xiàn)宮頸癌細(xì)胞發(fā)生EMT時(shí)，細(xì)胞呈長(zhǎng)形，細(xì)胞表面E-cad表達(dá)下調(diào)，波形蛋白表達(dá)上調(diào)，癌細(xì)胞擴(kuò)散、侵襲能力增強(qiáng)，并認(rèn)為，在EMT過(guò)程中Snai1上調(diào)起重要作用。通過(guò)轉(zhuǎn)染技術(shù)，使宮頸癌細(xì)胞高表達(dá)Snai1，可以誘導(dǎo)宮頸癌上皮細(xì)胞發(fā)生間質(zhì)轉(zhuǎn)化，E-cad表達(dá)顯著下降，同時(shí)發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞對(duì)劃痕愈合及侵襲能力顯著提高[4]。后來(lái)研究發(fā)現(xiàn)Notch1和RhoC激活同樣可以導(dǎo)致宮頸癌細(xì)胞發(fā)生EMT[5]。

研究表明，E-cad分子表達(dá)的改變與腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。1997年就有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在宮頸癌轉(zhuǎn)移瘤中E-cad及a/β-catenin mRNA的表達(dá)顯著低于原發(fā)瘤。Yaldizl等[6]通過(guò)分析24例侵襲型宮頸癌，發(fā)現(xiàn)超過(guò)50%（13例）的宮頸癌組織E-cad表達(dá)減少，而在E-cad表達(dá)減少的宮頸癌患者中11例存在著淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移（11/13），提示E-cad低表達(dá)與宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Dursun等[7]發(fā)現(xiàn)宮頸癌細(xì)胞E-cad表達(dá)與宮旁侵襲的發(fā)生顯著相關(guān)（P=0.024），E-cad低表達(dá)導(dǎo)致總體生存率下降。應(yīng)用COX回歸分析發(fā)現(xiàn)，剔除干擾因素后E-cad低表達(dá)與總體生存率、疾病復(fù)發(fā)率明顯相關(guān)（生存率相關(guān)性，P=0.004，RR=6.08，95%CI 1.75～21.1；復(fù)發(fā)率相關(guān)性，P=0.027，RR=1.75，95%CI 1.06～2.88）。E-cad低表達(dá)可以作為預(yù)測(cè)宮頸癌患者預(yù)后的指標(biāo)，而E-cad低表達(dá)是上皮癌發(fā)生間質(zhì)性轉(zhuǎn)化的特征性改變?？梢?jiàn)EMT不僅在宮頸癌中是普遍存在的現(xiàn)象，而且與宮頸癌侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，從而與患者的預(yù)后密切相關(guān)。

4問(wèn)題與展望

宮頸癌的侵襲、轉(zhuǎn)移是影響宮頸癌預(yù)后的主要因素。早期宮頸癌無(wú)論手術(shù)還是放療都可以取得非常好的療效，然而一旦發(fā)生局部侵襲，患者不僅并發(fā)癥增加，生存率也顯著降低，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量；若存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移則喪失了根治的機(jī)會(huì)，患者的生存率更低。如果能抑制腫瘤細(xì)胞侵襲，減少轉(zhuǎn)移的機(jī)會(huì)，就會(huì)改善患者預(yù)后，提高患者的生存率及生活質(zhì)量。同時(shí)，一些研究者發(fā)現(xiàn)腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與EMT的逆轉(zhuǎn)移方向有關(guān)，這種現(xiàn)象稱作間質(zhì)細(xì)胞上皮轉(zhuǎn)移。比如，在大腸癌中，發(fā)現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移與miR-200C表達(dá)的增加和特征性EMT的增加密切相關(guān)[19]。MET在癌癥轉(zhuǎn)移中的確切作用存在爭(zhēng)議，因?yàn)樵谝恍┌┌Y的數(shù)據(jù)中表明MET起到反腫瘤轉(zhuǎn)移的作用[20]。

總之，哪些分子標(biāo)志物可以作為腫瘤治療的靶點(diǎn)？EMT是腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的重要過(guò)程，但EMT與鈣調(diào)蛋白結(jié)合蛋白的表達(dá)及磷酸化的關(guān)系尚不清楚。隨著對(duì)宮頸癌侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程認(rèn)識(shí)的深入，將有可能尋找到可以抑制甚至阻斷宮頸癌侵襲、轉(zhuǎn)移的靶點(diǎn)，為探索宮頸癌新的治療模式提供理論依據(jù)。

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編輯/肖慧