摘要:目的 評估血小板計數(shù)、平均體積及分布寬度在血小板保存過程中的變化。方法 來自于自愿獻血者的30例單采血小板,置于血小板常溫保存箱保存5d。分別在保存的第1d、第3d、第5d留取樣品檢測血小板計數(shù)、平均體積及分布寬度。結(jié)果 隨著保存時間的延長,血小板計數(shù)、平均體積及分布寬度沒有發(fā)生明顯改變(P>0.05)。結(jié)論 血小板的體外保存對血小板計數(shù)、平均體積及分布寬度無影響。
關鍵詞:血小板;平均體積;體積分布寬度;血小板保存;血小板計數(shù)
血小板是人體內(nèi)唯一具有止血和凝血功能的血細胞,目前尚未發(fā)現(xiàn)可與其功能相媲美的代替品。目前血站主要提供手工分離濃縮血小板和單采血小板,后者通過血細胞分離機進行采集制備而成。單采血小板因為其濃度高和純度好的優(yōu)點,臨床療效好。其采用血小板專用保存袋進行保存,存儲在22℃專用血小板保存箱內(nèi),保存期為5d[1]。筆者擬在血小板保存的不同時間段對血小板計數(shù)、平均體積(MPV)及分布寬度(PDW)進行檢測,評估血小板的保存對這三項指標的影響。
1 資料與方法
1.1一般資料 CS3000血小板常溫保存袋(Baxter公司,美國),CS-3000 plus血細胞分離儀(Baxter公司,美國),HELMER血小板恒溫振蕩保存箱(美國),XT-2000型血細胞計數(shù)儀(Sysmex公司,日本)。
1.2方法
1.2.1樣品采集與處理 招募30位健康自愿獻血者,按照血站標準采用CS-3000plus血細胞分離機采集濃縮血小板懸液,每治療量血小板含量為(2.5~3)×1011,用CS3000血小板常溫保存袋保存,置于22℃血小板保存箱保存5d,分別在d0、d3、d5留取樣品檢測血小板計數(shù)、平均體積(MPV)及體積分布寬度(PDW)。
1.2.2檢測 按照常規(guī)方法,采用XT-2000型血細胞計數(shù)儀測定血小板計數(shù)、平均體積(MPV)及體積分布寬度(PDW)。
1.2.3統(tǒng)計處理 采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件進行重復測量的方差分析,計量資料以(x±s)表示,P<0.05表示有明顯統(tǒng)計學差異。
2 結(jié)果
在血小板保存期內(nèi),隨著保存時間的延長,血小板計數(shù)、平均體積及分布寬度均無明顯改變(P>0.05),見表1~表3。
3 討論
血小板是哺乳動物血液中的有形成分之一,是從骨髓成熟的巨核細胞胞質(zhì)裂解脫落下來的具有生物活性的小塊胞質(zhì),只存在于哺乳動物的血液中。體積小,無細胞核,呈雙面微凸的圓盤狀,正常值為(100-300)×109/L,直徑為2~3μm。血小板具有特定的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生化組成,在正常血液中有較恒定的數(shù)量(如人的血小板數(shù)為每立方毫米10~30萬),在止血、傷口愈合、炎癥反應、血栓形成及器官移植排斥等生理和病理過程中有重要作用。血小板輸注作為成分輸血之一,有著廣泛的應用,特別是在血液系統(tǒng)疾病、腫瘤放化療導致的血小板減少和復雜外科手術(shù)方面[2]。早期研究發(fā)現(xiàn)血小板在體外保存過程中發(fā)生了一系列形態(tài)和功能的變化。在體外保存過程中,血小板的雙面圓盤結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,大量偽足形成,α顆粒融合,致密體減少,基質(zhì)中出現(xiàn)肌動纖維細絲聚集成團和肌球蛋白結(jié)晶。保存過程中的血小板活化及細胞內(nèi)Ca2+增加導致的微纖維肌動蛋白聚集是造成血小板形態(tài)發(fā)生不可逆改變的根本原因[3]。
本研究發(fā)現(xiàn),血小板在保存過程中,血小板計數(shù)沒有明顯變化(P>0.05),見表1,這說明血小板的數(shù)量在保存過程中基本上沒有變化。MPV指的是血小板體積的平均值,其正常范圍為9~13fL。PDW是反映血液內(nèi)血小板體積變異的參數(shù),以測得的血小板體積大小的變異系數(shù)表示,其正常范圍為(15.5~18.1)%。PDW在正常范圍內(nèi)表明血小板體積均一性高。由表2和表3可見,在體外保存過程中,血小板的MPV和PDW均在正常范圍之內(nèi),并且沒有明顯改變(P>0.05)。由此可見,血小板的大小在保存過程也沒有發(fā)生明顯變化。雖然早期研究發(fā)現(xiàn)血小板的形態(tài)在體外保存時發(fā)生明顯改變,但是本研究發(fā)現(xiàn)血小板的數(shù)量和大小均基本保持一致,變化不明顯,這可能是因為血小板在檢測時是以顆粒的形式存在有關[4]。但是血小板的形態(tài)是否發(fā)生改變和怎么改變,還需通過透射電鏡進行進一步研究。那么,血小板的數(shù)量和大小沒有發(fā)生改變,是否代表血小板的質(zhì)量得到保證?大量研究證實,體外保存血小板的功能發(fā)生了明顯改變,血小板活化和聚集增強,代謝改變,這些變化可能會影響到血小板的輸注療效[5]。
限于技術(shù)和條件的不足,目前血站供應的血小板制品,往往僅僅以血小板數(shù)量≥2.5×109/袋、紅細胞混入量≤8.0×109/袋及白細胞混入量≤5.0×108/袋為質(zhì)量標準,對其功能沒有任何檢測[1]。筆者認為,血小板輸注作為臨床一個不可替代的治療手段,血小板功能的不足一定會影響其輸注的療效,建議采供血機構(gòu)應該建立一套完整的血小板質(zhì)量控制體系。在此之外,是否可以尋求其他辦法抑制血小板功能的改變?比如新型的血小板保護液或者更好的血小板保存袋,值得進一步研究。
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編輯/哈濤