摘要：目的 建立文冠木噴霧劑中總黃酮的含量測(cè)定方法。方法 采用紫外分光光度法，通過紫外可見掃描確定最大吸收波長(zhǎng)，以蘆丁為對(duì)照品制定標(biāo)準(zhǔn)曲線，并進(jìn)行樣品溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)和方法回收率與重復(fù)性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果 最大吸收波長(zhǎng)為500nm，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為10.520mg/L～63.120mg/L，r=0.9997。平均回收率為95.09%，RSD=1.61%，符合要求。結(jié)論 該方法簡(jiǎn)單方便、準(zhǔn)確可靠，可以用來進(jìn)行文冠木噴霧劑中總黃酮的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：文冠木；總黃酮；紫外分光光度法

Abstract：Objective To establish a method for determination of total flavonoids inXanthoceras sorbifolia spray. Methods Using UV spectrophotometry， UV Vis scanto determine the maximum absorption wavelength， with rutin as a standard to make the standard curve， and the sample solution stability experiment andrecovery rate and repeatability. Results The maximum absorption wavelength is 500nm， the linear range of standard curve is 10.520～ 63.120mg/L，r=0.9997. The average recovery was 95.09%， RSD=1.61%， meet the requirements. Conclusion The method is simple， accurate and reliable， can be used for the determination of content of total flavonoids in Xanthoceras sorbifoliaspray.

Key words： Xanthoceras sorbifolia Bunge；Total flavonoids； UV Spectrophotometry

文冠木處方由三類藥物構(gòu)成，即文冠木、黃連和人工牛黃。文冠木為無(wú)患子科植物文冠木（Xant Hoceras Sorbifolia Bge.）的莖干或枝條的無(wú)皮干燥木部，是一種常用的蒙藥材。主要用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕內(nèi)熱、皮膚風(fēng)濕、風(fēng)濕性心臟病等病癥[1]，其中有效成分為總黃酮。黃連[2]為毛莨科植物黃連，三角葉黃連或云南黃連的干燥根莖。黃連的藥用始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，能清熱燥濕，瀉火解毒，現(xiàn)代研究表明黃連的有效成份主要為小檗堿（即黃連素Berberine），含量可達(dá)10%左右。人工牛黃[3]由膽酸、豬去氧膽酸、膽紅素、膽固醇等配制而成，具有清心、豁痰、開竅、涼肝、息風(fēng)、解毒等功能。由于該處方藥中文冠木質(zhì)量占有絕大部分，故對(duì)其文冠木中的總黃酮進(jìn)行含量測(cè)定，為其進(jìn)一步開發(fā)研究奠定基礎(chǔ)。

1儀器及試劑

紫外-可見分光光度儀：島津UV-2401PC型（日本）；離心機(jī)：飛鴿牌LXJ-ⅡB型低速大容量多管離心機(jī)；超聲波清洗儀：KQ2200B型（昆侖超聲儀器有限公司）；分析天平：ESJ200-4型（沈陽(yáng)龍騰電子有限公司）。蘆丁對(duì)照品 （中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)：0080-9705）；其它試劑試藥均為分析純。樣品來源：文冠木（ 內(nèi)蒙古庫(kù)倫旗蒙藥股份有限公司），黃連（重慶石柱黃連有限公司），人工牛黃（內(nèi)蒙古自治區(qū)海拉爾生物化學(xué)制藥廠）。

2方法學(xué)考察與結(jié)果

2.1測(cè)定方法及波長(zhǎng)的選擇 根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[4，5]，文冠木中的黃酮類化合物的3 ， 5 羥基與Al3+生成絡(luò)合物，在可見光區(qū)有最大吸收的特點(diǎn)，故選用蘆丁作為對(duì)照品，采用紫外分光光度法進(jìn)行含量測(cè)定。分別取蘆丁對(duì)照品和文冠木醇提取溶液在400～800nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行光譜掃描，從光譜圖中可見上述兩種溶液在波長(zhǎng)500nm附近有明顯吸收，故選擇500nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取蘆丁對(duì)照品13.15mg 置5ml容量瓶中，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得每1ml含2.63mg蘆丁對(duì)照品。

2.7重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 用加液槍取出同一供試品五份，每份250μL分別注入到25ml容量瓶中，在每一容量瓶中依次加入30%乙醇12.25ml，再分別加入5%亞硝酸鈉溶液1.0ml，輕搖后放置6min，再加入10%硝酸鋁溶液1.0ml輕搖后放置6min，再加入1mol/LNaoH溶液10.0ml，用30%乙醇定容置25.0ml，充分搖勻后放置15min。時(shí)間到后，將每一份放入離心管中進(jìn)行離心操作，使轉(zhuǎn)數(shù)達(dá)到4400r/min，并保持5min。離心后取出上清液進(jìn)行測(cè)量，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表4。

結(jié)果表明：供試品溶液的平均濃度為14.652mg/L，，RSD（%）=5.08，說明該方法的重復(fù)性良好。

2.8 回收率試驗(yàn) 用加液槍取供試品五份，每份125μL依次加入到五個(gè)25ml容量瓶中，再用加液槍加入200μL蘆丁對(duì)照品溶液置每個(gè)容量瓶中，再依次加入30%的乙醇12.125ml，再依次加入5%亞硝酸鈉溶液1.0ml輕搖后放置6min，再依次加入10%硝酸。

鋁溶液1.0ml輕搖后放置6min，最后在每個(gè)25ml容量瓶中加入1mol/LNaoH溶液10.0ml并用膠頭吸管吸取30%的乙醇準(zhǔn)確定容置25ml，充分搖勻，放置15min，時(shí)間到后，將每一份放入離心管中進(jìn)行離心操作，使轉(zhuǎn)數(shù)達(dá)到4400r/min，并保持5min。離心后取出上清液進(jìn)行測(cè)量，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表5。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：該方法的平均回收率（%）為95.09%，RSD（%）=1.61。符合要求，說明該方法的準(zhǔn)確度良好。

2.9 樣品含量測(cè)定 用加液槍取五份樣品，每份250μL分別注入到5個(gè)25ml的容量瓶中，在每瓶中依次加入30%的乙醇12.25ml和5%亞硝酸鈉溶液1.0ml，輕搖后放置6min，再依次加入10%硝酸鋁溶液1.0ml， 輕搖后放置6min，再依次加入1mol/LNaoH溶液10.0ml，用膠頭滴管吸取30%的乙醇精確定容置25ml，充分搖勻后，放置15min。時(shí)間到后，將每一份放入離心管中進(jìn)行離心操作，使轉(zhuǎn)數(shù)達(dá)到4400r/min，并保持5min。離心后取出上清液進(jìn)行測(cè)量，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表6。

3結(jié)論

本課題對(duì)文冠木噴霧劑中總黃酮的含量進(jìn)行定量分析，并對(duì)測(cè)定的線性范圍（10.520mg/L～63.120mg/L）、精密度RSD%=0.74、穩(wěn)定性RSD%=0.90、加樣回收率（平均回收率為95.09%，RSD%=1.61）進(jìn)行了考察，結(jié)果均符合要求，可以作為文冠木噴霧劑中總黃酮的含量的測(cè)定方法。

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編輯/王海靜