摘要：目的探討在食管鱗癌中八聚體4(octamer 4，OCT4)的表達(dá)及其意義。方法檢測60例食管鱗狀細(xì)胞癌和20例食管正常組織OCT4的表達(dá)，并與食管癌病理特征關(guān)系進(jìn)行探討。結(jié)果OCT4在食管鱗癌組織和正常上皮組織中的陽性表達(dá)率分別為71.7%和20%（P<0.01），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。OCT4的表達(dá)與食管鱗癌組織中癌細(xì)胞的浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論在食管癌組織中OCT4的表達(dá)異常增高，提示其與食管癌的發(fā)生、發(fā)展有密切的關(guān)系。

關(guān)鍵詞：八聚體4(OCT4)；免疫組化；細(xì)胞癌食管癌是最常見的惡性腫瘤之一，食管癌死亡百分率在惡性腫瘤中約占16.05%，居惡性腫瘤死亡率第4位。其發(fā)生、發(fā)展是一個復(fù)雜的過程，其中八聚體4(OCT-4)是近來發(fā)現(xiàn)的一種與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子。目前，對食管癌中OCT-4的研究尚少見報道。為進(jìn)一步探討上述問題，我們采用免疫組織化學(xué)染色等方法觀察了食管鱗癌組織中OCT-4的表達(dá)，結(jié)果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 隨即選取我院2009年6月~2010年3月行手術(shù)切除的食管癌標(biāo)本（石蠟包埋），術(shù)前經(jīng)化療或放療的排除在外，按1級、2級、3級分化每級各取20例，并取20例上述標(biāo)本中距離腫瘤邊緣8 cm以上的正常食管粘膜上皮組織并經(jīng)病理檢查排除腫瘤累及，制成病理切片。

1.2方法 OCT-4兔多克隆抗體(博士德生物工程有限公司公司)工作濃度1∶200。標(biāo)本經(jīng)4%甲醛固定，常規(guī)處理后4 μm厚度連續(xù)切片，檢測OCT-4的表達(dá)。切片按免疫組化SABC法常規(guī)處理，DAB顯色，蘇木素復(fù)染，常規(guī)脫水，透明，封片。以已知陽性表達(dá)切片作為陽性對照，以PBS代替一抗作為陰性對照。

1.3判斷標(biāo)準(zhǔn) 按細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)染色呈黃色且明顯強(qiáng)于陰性對照者為陽性，綜合染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的比例做半定量處理。

1.4評分標(biāo)準(zhǔn) 淡黃色計1分；棕黃色計2分；棕褐色計3分，陽性細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)<10%為0分，11%~25%為1分，26%~50%為2分，51%~75%為3分，≥75%為4分，兩項(xiàng)評分相加。

免疫組織化學(xué)染色是由兩位資深病理學(xué)專家單獨(dú)進(jìn)行評定，并達(dá)成一致意見。不管其染色強(qiáng)度，只要陽性細(xì)胞數(shù)<10%為陰性(-)；2~3分為弱陽性(+)；4~5分為中陽性(++)；6~7分為強(qiáng)陽性(+++)。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件，各組間陽性表達(dá)率的分析采用χ2檢驗(yàn)；OCT-4的表達(dá)與腫瘤臨床病理特征之間的分析，不同分組之間采用秩和檢驗(yàn)，雙向有序資料（浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移）進(jìn)一步采用Spearman等級相關(guān)分析，P<0.05視為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 OCT-4在食管鱗癌、正常上皮組織中的表達(dá)，見表1。

2.2食管鱗癌組織中OCT-4表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系，見表2。

3討論

腫瘤的發(fā)生發(fā)展這個過程是非常復(fù)雜的，近年來發(fā)現(xiàn)的八聚體4（OCT-4）在這個一個過程中表現(xiàn)為異?；罨崾舅c腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及腫瘤的轉(zhuǎn)移具有密切關(guān)系。OCT-4具有自我更新以及維持細(xì)胞未分化潛能的作用。它能維持胚胎干細(xì)胞的多潛能性和未分化狀態(tài)。OCT-4還能激活相關(guān)基因來阻止胚胎干細(xì)胞的分化。另外OCT-4還能參加細(xì)胞周期與凋亡的調(diào)控。它通過抑制P21的表達(dá)，以維持干細(xì)胞的增殖，抑制OCT-4能阻斷細(xì)胞周期繼續(xù)發(fā)展到G0/G1期，故能阻止干細(xì)胞的增殖。趙曉蒙等認(rèn)為[1]，OCT-4基因抑制AP-2γ轉(zhuǎn)錄活性和影響其蛋白質(zhì)水平的表達(dá)，這一新發(fā)現(xiàn)，有利于從分子水平上研究睪丸生殖細(xì)胞瘤的發(fā)生機(jī)制。

本研究的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示， OCT-4在正常組織輕度表達(dá)，正常上皮組織表達(dá)為20%，在食管鱗癌組織中OCT-4的異常增高表達(dá)，其陽性表達(dá)率為71.7%，相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義，兩組資料比較具有統(tǒng)計學(xué)意義。表明OCT-4能維持腫瘤細(xì)胞的未分化性和自我更新潛能，參與腫瘤的形成與進(jìn)展。

研究發(fā)現(xiàn)，在肺癌、肝癌、胃癌、膀胱癌及口腔癌等多種腫瘤中，都有OCT-4的表達(dá)增高。梁洪享等研究認(rèn)為，NSCLC組織中OCT-4的表達(dá)明顯高于非癌組織，OCT-4與NSCLC的惡性程度有關(guān)[2]。張璐等發(fā)現(xiàn)[3]，OCT-4和SOX-2在宮頸癌組織中頻數(shù)較高，且隨宮頸癌分化程度降低表達(dá)頻數(shù)升高，提示OCT-4和SOX-2可作為宮頸癌干細(xì)胞的標(biāo)記物。干細(xì)胞相關(guān)基因OCT-4、Nanog在胰腺癌Panc-1腫瘤干細(xì)胞中的表達(dá)高于普通胰腺癌細(xì)胞[4]。

本研究的實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在食管鱗癌組織中，OCT-4的表達(dá)與腫瘤浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，表明OCT-4的表達(dá)可能反映出食管癌部分的的生物學(xué)行為，OCT-4可能與食管癌的發(fā)生、發(fā)展有密切的關(guān)系，可能成為判斷食管鱗癌生物學(xué)行為的重要指標(biāo)。李秀娟等研究發(fā)現(xiàn)[5]，OCT-4在食管鱗癌組織中的表達(dá)水平與組織學(xué)分級及患者生存期相關(guān)，OCT-4是影響食管癌患者預(yù)后的獨(dú)立因素。郭康等研究發(fā)現(xiàn)[6]，OCT-4與β-catenin聯(lián)合檢測對胃癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移具有一定的預(yù)測作用。因此，OCT-4的過表達(dá)可能會促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移。也有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，OCT-4的表達(dá)水平與下咽部鱗狀細(xì)胞癌頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，與腫瘤復(fù)發(fā)有關(guān)，可作為預(yù)后預(yù)測的獨(dú)立因素。由于在食管癌變過程中表達(dá)明顯異常，OCT-4有望成為食管癌抗腫瘤治療的靶目標(biāo)之一。

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[6]郭康，李寧，韓黎麗，等.胃癌OCT-4、β-catenin表達(dá)及其與術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].中華臨床醫(yī)師雜志(電子版)，2013，(16):7397-7400.

編輯/肖慧