摘要：目的研究CD44和喉癌與喉癌侵襲、轉(zhuǎn)移及預(yù)后之間的相關(guān)性。方法選取我院2010年6月~2013年12月收治的喉癌患者50例，采用免疫組織化學(xué)法即ABC法對(duì)所有患者喉癌組織中的CD44進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果高分化CD44的表達(dá)水平比低分子CD44低（P<0.05）；無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CD44顯著也低于伴頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移CD44（P<0.05）；臨床T3、T4喉癌Cd44表達(dá)水平也顯著高于T1、T2（P<0.05）；CD44高表達(dá)喉癌者2年生存率為80%（24/30），CD44低表達(dá)者2年生存率為90%（18/20），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論CD44和喉癌侵襲、轉(zhuǎn)移以及預(yù)后具有較強(qiáng)的相關(guān)性，高表達(dá)的CD44更易侵襲，轉(zhuǎn)移能力也較強(qiáng)。

關(guān)鍵詞：CD44；喉癌；轉(zhuǎn)移；預(yù)后早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷和治療是減輕喉癌危害的重要措施，在提高患者術(shù)后生存率的同時(shí)，也保留喉部的發(fā)音功能，減少并發(fā)癥[1]。近年來，相關(guān)學(xué)者發(fā)現(xiàn)喉癌組織中的CD44與喉癌的侵襲、轉(zhuǎn)移以及預(yù)后有著極為密切的關(guān)系，CD44是一種跨膜受體蛋白，是一項(xiàng)預(yù)測(cè)腫瘤轉(zhuǎn)移的重要指標(biāo)[2]。對(duì)此，本文選取了50例喉癌患者，采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)其CD44，旨在分析CD44與喉癌侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后之間的相關(guān)性，具體如下。

1資料與方法

1.1一般資料 本組50例喉癌患者，均是我院2010年6月~2013年12月接受治療的患者，入院之后我們問詢了所有患者的基本資料和治療史。統(tǒng)計(jì)資料顯示，無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者28例，有頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者22例。其中男45例，女5例，年齡為36~78歲，平均年齡為（64±3.1）歲。

1.2方法 采用免疫組織化學(xué)法對(duì)喉癌患者的CD44進(jìn)行檢測(cè)，ABC試劑盒選擇的是VECTOR公司生產(chǎn)的產(chǎn)品，CD44抗體是標(biāo)準(zhǔn)型CD44分子的單克隆抗體。4 um切片按照常規(guī)操作進(jìn)行脫蠟至水，再采用0.05%胰蛋白酶進(jìn)行為時(shí)30 min的消化。經(jīng)過PBS即磷酸鹽緩沖液洗滌之后，滴加1∶40的CD44單抗，然后將標(biāo)本放置在冰箱中，冰箱溫度控制在4℃左右，放置時(shí)間控制在一夜。第2 d使用PBS將標(biāo)本進(jìn)行第2次洗滌，再滴加1∶200生物素化二抗。靜置40 min之后用PBS洗滌，滴加1∶100ABC試劑，等待1 h，將標(biāo)本放置在0.04% DAB溶液中，這時(shí)可以顏色可以完全呈現(xiàn)。再用蘇木素染色，利用酒精進(jìn)行有效脫水之后，二甲苯透明，最后用中性樹膠進(jìn)行封裝即可[3]。

1.3效果判定 對(duì)于CD44陽(yáng)性的判定依據(jù)是細(xì)胞膜染色之后呈現(xiàn)棕色，低表達(dá)和高表達(dá)則是通過染色的強(qiáng)度來判定。將切片放置在低倍鏡下進(jìn)行觀察，陽(yáng)性細(xì)胞統(tǒng)計(jì)數(shù)目如果在>70%，染色比較強(qiáng)，則判定是CD44高表達(dá)，反之則判定為CD44低表達(dá)，但是我們不會(huì)考慮染色的強(qiáng)度，只要陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目少于70%即可[4]。結(jié)果顯示CD44高表達(dá)30例，低表達(dá)為20例。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 CD44分布情況 喉癌CD44主要是分布于增生特別活躍的腫瘤細(xì)胞中，類似癌組織的浸潤(rùn)周圍。

2.2 CD44和喉癌相關(guān)性 高分化CD44的表達(dá)水平比低分子CD44低（P<0.05）；無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CD44顯著也低于伴頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移CD44（P<0.05）；臨床T3、T4喉癌Cd44表達(dá)水平也顯著高于T1、T2（P<0.05），見表1。

2.3 CD44高表達(dá)喉癌者 2年生存率為80%（24/30），CD44低表達(dá)者2年生存率為90%（18/20），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3討論

影響喉癌預(yù)后情況的因素較多，主要是腫瘤臨床分期和腫瘤生長(zhǎng)位置與形狀，以及治療方法等。本次研究結(jié)果提示，喉癌組織中的CD44和細(xì)胞轉(zhuǎn)移、預(yù)后均有較為密切的關(guān)系，CD44陽(yáng)性細(xì)胞主要聚集在癌細(xì)胞增殖比較活躍的區(qū)域，這一結(jié)果和FOX的結(jié)果基本一致。除外，我們發(fā)現(xiàn)高分化CD44的表達(dá)水平比低分子CD44低，無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CD44顯著也低于伴頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移CD44，臨床T3、T4喉癌Cd44表達(dá)水平也顯著高于T1、T2（P<0.05）。隨訪發(fā)現(xiàn)，CD44表達(dá)水平的高低與生存率有很大的聯(lián)系，該結(jié)果與王敏等的報(bào)道結(jié)果基本一致。

總之，CD44與喉癌的侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后均有很大的相關(guān)性，可以作為提示、檢測(cè)喉癌的觀察指標(biāo)，同時(shí)我們也要將注意力放在高表達(dá)的CD44上。

參考文獻(xiàn)：

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[3]王曉雷，徐震綱，唐平章.T3和T4期梨狀窩癌的綜合治療[J].中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2009，41（2）:123-127.

[4]屠規(guī)益.喉癌下咽癌現(xiàn)代理論與臨床[M].濟(jì)南:山東科學(xué)技術(shù)出版社，2012:12-14.

編輯/肖慧