摘要：大鼠腎移植模型是腎臟相關(guān)疾病研究中常用的動(dòng)物模型，目前已有多種建模方式，但最主要的問題是術(shù)中血管吻合技術(shù)。目的 總結(jié)大鼠腎移植術(shù)后預(yù)防血栓形成的手術(shù)經(jīng)驗(yàn)，減少術(shù)后血管并發(fā)癥的發(fā)生。方法 回顧性分析2010年1月~2013年12月60例大鼠腎移植手術(shù)，術(shù)中通過改進(jìn)血管游離等方面的手術(shù)技巧來預(yù)防移植腎血管并發(fā)癥的發(fā)生。結(jié)果60例大鼠腎移術(shù)后無1例出現(xiàn)吻合口狹窄及腎動(dòng)脈血栓形成或栓塞。結(jié)論 采用適當(dāng)、熟練的手術(shù)技巧可以減少大鼠腎移植術(shù)后血管并發(fā)癥的發(fā)生。

關(guān)鍵詞：大鼠腎移植；血栓形成；血管吻合；血管并發(fā)癥1資料與方法

1.1一般資料實(shí)驗(yàn)手術(shù)過程中對動(dòng)物的處置符合《貴陽醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所倫理審查指南》。供受體均選用成年SD2大鼠各60只，鼠齡2~3個(gè)月，所有大鼠均為成年雄性，體重200~250g，由貴陽醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究所提供。

1.2藥品、器械肝素、生理鹽水（500/mL）、平衡液、自助置腎袋、8-0 無損傷縫線5-0 無損傷縫線、自制腹腔、血管拉鉤。

1.3方法供、受體大鼠均在移植前禁飲食6h，可以飲水，行（經(jīng)腹腔注射Nacroren、肌肉注射Ketanest）麻醉。

1.4供鼠移植行（經(jīng)腹腔注射Nacroren、肌肉注射Ketanest）麻醉。常規(guī)剔除腹部鼠毛并盡量不傷及皮膚，如果皮膚有傷口會(huì)會(huì)引起術(shù)后傷口感染。將大鼠除頭部以外，絡(luò)合碘消毒全身手術(shù)區(qū)域，鋪無菌巾，手術(shù)洞巾。取SD大鼠腹部皮膚正中作為手術(shù)切口。以回形針拉直后自制的腹腔拉鉤，將腹壁垂直傷口拉開，充分顯露腹部內(nèi)臟器官及左腎，避免周圍臟器（肝、脾）損傷，不損傷胸膜腔。以0.9%生理鹽水紗布將腹部腸管包裹推向右側(cè)以傷口減少大鼠體液喪失。供體大鼠在分離左腎及腎靜脈及周圍組織時(shí)要輕柔，避免損傷腎靜脈血管鞘。游離左腎動(dòng)脈時(shí)，臨近腹主動(dòng)脈一定要用5-0帶針縫合線逐一縫在、結(jié)扎各個(gè)分支血管，避免因出血而造成血管痙攣、大出血、血栓形成等不可逆性損傷導(dǎo)致大鼠死亡。游離腎臟時(shí)，應(yīng)緊貼腎臟避免周圍脂肪過度牽拉，操作粗暴會(huì)導(dǎo)致腎血管痙攣、大出血致腎缺血而壞死。處理腎上腺血管時(shí)，盡量帶一點(diǎn)腎上腺組織并作為其腎上的標(biāo)記，避免在受體腎移植時(shí)腎上極顛倒導(dǎo)致手術(shù)失敗。總的來講游離大鼠左側(cè)腎上腺動(dòng)、靜脈、左側(cè)精索動(dòng)、靜脈、應(yīng)逐個(gè)結(jié)扎、切斷。鈍性游離腎臟的背側(cè)、上極、下極； 游離腹主動(dòng)脈，特別要注意其后方存在1-2根椎動(dòng)脈，應(yīng)予以一并結(jié)扎切斷。將此段腹主動(dòng)脈與下腔靜脈及左腎靜脈完全分離；左輸尿管應(yīng)從大鼠腹主動(dòng)脈游離并切斷，以5-0帶針可吸收線結(jié)扎備用。輸尿管周圍的脂肪組織是維持輸尿管血供的主要來源，在游離輸尿管時(shí)這些脂肪組織應(yīng)盡量多保留，以免術(shù)后輸尿管壞死。用文氏鉗在左腎動(dòng)脈上方（離腎動(dòng)脈約0.5cm）阻斷大鼠腹主動(dòng)脈，迅速以0℃~5℃肝素鈉生理鹽水2mL低壓、勻速灌洗大鼠左腎，可見左腎色澤逐漸轉(zhuǎn)為均勻的淺淡黃色時(shí)切斷左腎靜脈，再以0℃~5℃肝素鈉生理鹽水2mL低壓、勻速灌洗腎臟，以去除左腎靜脈內(nèi)殘留血液。于左腎動(dòng)脈上方緊貼腹主動(dòng)脈處5-0帶針可吸收線結(jié)扎、縫扎腎動(dòng)脈，這時(shí)供腎切取完成。切取的腎臟立即放入0℃~5 ℃平衡液中。在取供體大鼠左腎時(shí)，冷缺血時(shí)間、熱缺血時(shí)間應(yīng)縮短。本組60例大鼠腎移植實(shí)驗(yàn)表明，供體腎當(dāng)溫度大于5℃，冷藏時(shí)間在大于12h時(shí)，大鼠腎移植術(shù)后會(huì)產(chǎn)生少尿、腎功能衰竭；大于16 h 移植腎喪失功能，受體死亡。

1.5受體移植大鼠麻醉行經(jīng)腹腔注射Nacroren、肌肉注射Ketanest， 常規(guī)剔除腹部鼠毛并盡量不傷及皮膚，如果皮膚有傷口會(huì)會(huì)引起術(shù)后傷口感染。將大鼠除頭部以外，絡(luò)合碘消毒全身手術(shù)區(qū)域，鋪無菌巾，手術(shù)洞巾。取SD大鼠腹部皮膚正中作為手術(shù)切口。以回形針拉直后自制的腹腔拉鉤，將腹壁垂直傷口拉開，充分顯露腹部內(nèi)臟器官及左腎，避免周圍臟器（肝、脾）損傷，不損傷胸膜腔。以0.9%生理鹽水紗布將腹部腸管包裹推向右側(cè)以傷口減少大鼠體液喪失。游離大鼠左腎及腎臟周圍組織，游離左側(cè)輸尿管，游離暴露左腎靜脈下方的腹主動(dòng)脈和下腔靜脈，血管鉗阻斷約1.5cm的該段動(dòng)靜脈取出供腎，置于自制腎袋內(nèi)。以往手術(shù)證明，端側(cè)吻合腎動(dòng)脈時(shí)，手術(shù)時(shí)間會(huì)明顯延長，大鼠腹主動(dòng)脈和下腔靜脈被夾閉，會(huì)導(dǎo)致受體器官缺血再灌注損傷。夾閉時(shí)間越長會(huì)導(dǎo)致供腎缺血再灌注損傷增大。相反，腎動(dòng)脈血管的端端吻合對受體器官的損傷較小，明顯縮短手術(shù)時(shí)間。本人認(rèn)為使用保留盡可能長的供腎動(dòng)脈于腹主動(dòng)脈端端吻合、供腎靜脈與受體大鼠腔靜脈端側(cè)的吻合，術(shù)后效果最好，是一種最穩(wěn)定的腎移植模型。

1.6吻合方法在雙人顯微鏡下，用8-0無損傷縫線縫合供腎動(dòng)脈兩個(gè)點(diǎn)(3，9點(diǎn)），助手牽拉兩條縫合線，前后面8-0無損傷縫線連續(xù)縫合行腎動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈殘端，端端吻合?？p合時(shí)血管夾夾閉腹主動(dòng)脈防止管腔狹窄，漏血形成血栓。 然后用0℃~5℃肝素鈉生理鹽水沖洗供腎腎靜脈，使腎靜脈置入自然位置再行吻合，以免誤縫前后壁。剪開受體大鼠腔靜脈，盡量離供腎腎靜脈位置旁邊，8-0無損傷縫線縫合腎靜脈兩個(gè)點(diǎn)(3，9點(diǎn)）和腔靜脈端側(cè)吻合。吻合靜脈時(shí)助手牽拉兩點(diǎn)鋒線，不要牽拉過猛。牽拉過猛會(huì)導(dǎo)致縫線滑脫造成手術(shù)和腎缺血時(shí)間過長影響腎功能的恢復(fù)。不要反復(fù)牽拉血管以免內(nèi)膜損傷造成術(shù)后血栓形成。牽拉兩點(diǎn)血管后，8-0無損傷縫線連續(xù)縫合牽拉點(diǎn)的前后血管。吻合血管時(shí)不要將血管前后壁夾閉導(dǎo)致手術(shù)失敗。

1.7尿路重建使用5-0 無損傷縫線輸尿管端端吻合，間斷吻合4～6針。

1.8摘除受體原右側(cè)腎臟方法同供體左腎切除術(shù)，游離受者右腎時(shí)5-0 無損傷縫線結(jié)扎腎蒂，不用考慮輸尿管的血供及腎臟周圍血管的分離。較為簡單，切除時(shí)間較短。

2結(jié)果

60例大鼠腎移植術(shù)后均未出現(xiàn)血管吻合口處狹窄及腎動(dòng)脈血栓形成，腎動(dòng)脈栓塞等血管并發(fā)癥。術(shù)后每天監(jiān)測大鼠受體腎功均在正常范圍。受體及供體傷口按時(shí)換藥1次/d，均未出現(xiàn)傷口感染。采用適當(dāng)?shù)氖中g(shù)技巧和熟練的外科手術(shù)技能，可以大大減少大鼠腎移植術(shù)后血管并發(fā)癥的發(fā)生。

參考文獻(xiàn)：

[1]Ding R，Xie YS，Chen XM[J]．Zhonguo Zhongxiyi Jiehe Shenbing Zazhi，2008，9(4):365-367.

[2]Zhang JP， Zhang HJ， Wang X， et al[J]．Fudan Xuebao: Yixue Ban，2007;34(4):595-598.

[3]Wang K， Dai Y， Li DP， et al.Zhonghua Qiguan Yizhi Zazhi，2006，27(1):54-56.

[4]李默生，曹偉，靳風(fēng)爍.臨床腎移植圍手術(shù)期治療學(xué)[M].軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社， 2006: 197-198.

[5]李嫣唐，張玉梅. 新世紀(jì)腎臟移植學(xué)[M]. 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社，2001:288.

[6]李定憲，祝峰，胡有根.大鼠原位腎移植模型血管吻合方法的改進(jìn)[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志， 2012，8:1635-1636.

[7]麥海星．大鼠腎移植模型建立方法的探討[J]．第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，23：2202-2203．

編輯/哈濤