摘要：目的 觀察并研究革蘭陰性菌引起的血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定和藥敏的應(yīng)用方法與結(jié)果。方法 選取我院自2011年9月～2013年9月所收集的血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本共計(jì)100份作為研究對(duì)象，所有標(biāo)本均為該期間內(nèi)分離的非重復(fù)性標(biāo)本?；赩ITEK方法對(duì)血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行直接細(xì)菌鑒定。同時(shí)以API檢出結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)VITEK直接細(xì)菌鑒定于藥敏應(yīng)用結(jié)果的符合率情況進(jìn)行觀察分析。結(jié)果 VITEK直接細(xì)菌鑒定方法下細(xì)菌鑒定總符合率為98.00%（98/100），藥敏鑒定結(jié)果總符合率為98.37%（964/980），與API金標(biāo)準(zhǔn)方法檢出結(jié)果對(duì)比無(wú)明顯差異，P>0.05，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 基于VITEK方法對(duì)血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行直接細(xì)菌鑒定與藥敏分析檢出結(jié)果可靠，操作簡(jiǎn)便，可為臨床及時(shí)修正用藥提供依據(jù)，值得進(jìn)一步推廣。

關(guān)鍵詞：革蘭陰性菌；血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本；直接細(xì)菌鑒定；藥敏

為進(jìn)一步分析革蘭陰性菌引起的血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定和藥敏的應(yīng)用方法與結(jié)果，本文對(duì)我院所收集100份血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本展開(kāi)詳細(xì)分析。

1資料與方法

1.1一般資料 選取我院自2011年9月～2013年9月所收集的血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本共計(jì)100份作為研究對(duì)象，所有標(biāo)本均為該期間內(nèi)分離的非重復(fù)性標(biāo)本。選取大腸埃希菌標(biāo)準(zhǔn)菌株為ATCC 25922菌株，銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)菌株為ATCC 27853菌株（提供方為衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心）。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑 血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本分析過(guò)程中所涉及儀器與試劑包括：①血培養(yǎng)儀；②抗生素中和需氧血培養(yǎng)瓶；③真空血清分離管；④全自動(dòng)微生物分析儀；⑤血平板；⑥藥敏紙片。

1.2.2檢測(cè)方法 基于VITEK方法對(duì)血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行直接細(xì)菌鑒定。具體操作方法為：使用無(wú)菌注射器抽取陽(yáng)性瓶?jī)?nèi)血培養(yǎng)標(biāo)本，抽取劑量為8.0 mL，注入BD（8.0 mL）真空血清分離管。離心條件控制為3000.0 r/min，持續(xù)離心處理10.0 min，剔除上層血清樣本，使用無(wú)菌吸管對(duì)灰白色細(xì)菌層進(jìn)行吸取處理，放置于無(wú)菌容器中，加入適當(dāng)無(wú)菌生理鹽水，充分混合。用于稀釋可溶性血紅蛋白試劑同樣給予離心處理（3000.0 r/min，離心處理持續(xù)10.0 min），剔除上層血清備用。調(diào)制革蘭陰性桿菌1.0 McF，抽取50.0 uL劑量菌液，與濃度為0.45%生理鹽水1.8 mL充分混合，靜置24.0 h后直接鑒定細(xì)菌構(gòu)成，同步獲取藥敏試驗(yàn)結(jié)果。同時(shí)，抽取次代培養(yǎng)純菌落，參照API方法進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)。以API檢出結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)VITEK直接細(xì)菌鑒定于藥敏應(yīng)用結(jié)果的符合率情況進(jìn)行觀察分析。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 本文數(shù)據(jù)使用SPSS 17.0軟件進(jìn)行分析與計(jì)算，計(jì)數(shù)資料以%表示，以χ2檢驗(yàn)，可信區(qū)間95%，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為0.05，當(dāng)P<0.05時(shí)為差異顯著，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1革蘭氏陰性菌引起血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定結(jié)果分析 VITEK直接細(xì)菌鑒定方法下細(xì)菌鑒定總符合率為98.00%（98/100），與API金標(biāo)準(zhǔn)方法檢出結(jié)果對(duì)比無(wú)明顯差異，P>0.05，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1。

2.2革蘭氏陰性菌引起血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本藥敏結(jié)果分析 VITEK直接細(xì)菌鑒定方法下藥敏鑒定結(jié)果總符合率為98.37%（964/980），與API金標(biāo)準(zhǔn)方法檢出結(jié)果對(duì)比無(wú)明顯差異，P>0.05，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3討論

有關(guān)研究數(shù)據(jù)顯示：藥敏試驗(yàn)要取得快速結(jié)果，最主要方法在于：以臨床標(biāo)本自身作為接種物對(duì)象[1-2]，雖其結(jié)果與常規(guī)純菌法檢測(cè)結(jié)果無(wú)法得到100.00%符合，但同樣能夠?qū)?xì)菌藥敏的基本情況加以反應(yīng)。本次研究中，以API檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，分析得知：VITEK直接細(xì)菌鑒定方法下細(xì)菌鑒定、藥敏鑒定結(jié)果與API金標(biāo)準(zhǔn)方法檢出結(jié)果對(duì)比無(wú)明顯差異，P>0.05，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。該數(shù)據(jù)證實(shí)：在臨床各類常見(jiàn)細(xì)菌及藥敏對(duì)象中，VITEK直接鑒定方法都具有極高的可信度。結(jié)合表1中的數(shù)據(jù)可知：在對(duì)木糖氧化產(chǎn)堿桿菌以及睪丸酮叢毛單胞菌進(jìn)行檢驗(yàn)的過(guò)程當(dāng)中，造成細(xì)菌鑒定出現(xiàn)誤差的主要原因?yàn)椋河捎谝陨蟽煞N細(xì)菌自身生長(zhǎng)速度相對(duì)比較緩慢，需要在持續(xù)次代培養(yǎng)2.0d以后，方可形成直觀菌落組織。從這一角度上來(lái)說(shuō)，對(duì)于以上類型生長(zhǎng)緩慢細(xì)菌菌種而言，VITEK直接鑒定方法存在一定誤差，值得重視。同時(shí)，在藥敏分析的過(guò)程當(dāng)中，VITEK直接鑒定符合率較高，其機(jī)制在于：直接鑒定分析儀可支持參照細(xì)菌天然耐藥性表現(xiàn)，檢測(cè)耐藥機(jī)制[3]，從而對(duì)藥敏結(jié)果進(jìn)行修正，原則上可有效避免產(chǎn)生誤差問(wèn)題。

綜上所述：基于VITEK方法對(duì)血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行直接細(xì)菌鑒定與藥敏分析檢出結(jié)果可靠，操作簡(jiǎn)便，可為臨床及時(shí)修正用藥提供依據(jù)，值得進(jìn)一步推廣。

參考文獻(xiàn)：

[1]陳素梅.血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本的病原菌分布及耐藥性分析[J].中國(guó)抗生素雜志，2013，38（8）：8.

[2]林曉暉，梁衛(wèi)芳，嚴(yán)智敏，等.275例血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本的病原菌構(gòu)成及耐藥性分析[J].中國(guó)抗生素雜志，2011，36（12）：943-947.

[3]毛惠娜，陳國(guó)軍，董長(zhǎng)林，等.菌血癥血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本直接藥敏實(shí)驗(yàn)與常規(guī)藥敏法比較[J].武警醫(yī)學(xué)，2011，22（2）：180-181.編輯/張燕