摘要 [目的]檢測(cè)人參培養(yǎng)須根及內(nèi)生菌中皂苷的含量。[方法]采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定植物生物反應(yīng)器中人參培養(yǎng)須根及內(nèi)生菌中10種人參皂苷單體的含量。液相體系為：Waters Symmetry C18 Synergi色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱溫30 ℃，以乙腈為流動(dòng)相A，超純水為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)203 nm，進(jìn)樣量10 μl。[結(jié)果]10種皂苷基本分離，線性關(guān)系良好，穩(wěn)定性、精密度和重復(fù)性均較好，平均回收率在95.07%～108.72%。[結(jié)論]該方法快速簡(jiǎn)便，重現(xiàn)性好，可對(duì)人參培養(yǎng)須根及內(nèi)生菌中皂苷含量進(jìn)行多指標(biāo)質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞 人參培養(yǎng)須根；內(nèi)生菌；人參皂苷；皂苷含量測(cè)定；高效液相色譜法

中圖分類號(hào) S567 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2014）17-05418-04

Abstract [Objective] To measure the ginsenosides content in ginseng cultivation fibrous and endophytes. [Method] High Performance Liquid Chromatographic（HPLC）method was used for the simultaneous determination of 10 kinds of ginseng saponin monomer in plant bioreactors of ginseng root and ginseng endophytes. The chromatographic separation was performed on a Water Symmetry C18 Synergi column（250 mm×4.6 mm，5 μm）and the column temperature was set to 30 ℃， then let acetonitrile as the mobile phase A， B ultrapure water as the mobile phase to gradient elution， also we set the detection wavelength to 203 nm and the injection volume 10 μl. [Result]

The results showed that we can basic separation of 10 kinds of saponins， and the linear relationship is good， also we can find that the average recovery range of 95.07% to 108.72%. [Conclusion] The method is simple， reproducible， ginsenosides content in ginseng root and ginseng cultivation endophytes can be controlled with multiindicators.

Key words Ginseng cultivation fibrous； Endophytes； Ginsenosides； Determination of saponin； High Performance Liquid Chromatographic method

人參（Panax ginseng C.A.Mey.）屬五加科人參屬多年生藥用草本植物，是傳統(tǒng)名貴中藥。人參具有很高的藥用價(jià)值，人參皂苷是其主要藥效成分。現(xiàn)代藥理學(xué)研究認(rèn)為，人參不僅對(duì)中樞神經(jīng)、心血管、免疫、內(nèi)分泌系統(tǒng)等方面具有藥理作用，還表現(xiàn)出抗腫瘤、抗應(yīng)激、抗氧化活性和強(qiáng)勁的抗真菌活性[1]。由于人參的主要活性成分是人參皂苷，所以人參皂苷的含量一般被認(rèn)為是評(píng)價(jià)人參內(nèi)在質(zhì)量的主要指標(biāo)。

關(guān)于人參皂苷測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)，2010年版的《中華人民共和國(guó)藥典》[2]中規(guī)定以高效液相色譜法測(cè)定干燥樣品含人參皂苷Rg1和人參皂苷Re的總量不得少于0.30%，人參皂苷Rb1不得少于0.20%作為人參的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。近年來(lái)根據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)，已有不少關(guān)于測(cè)定人參藥材及復(fù)方中人參皂苷的含量研究報(bào)道，如林世和等[3]通過(guò)建立新的HPLC方法來(lái)測(cè)定人參蘆中人參皂苷Rb1、Rg1、Re的含量，許乾麗等[4]利用HPLC方法測(cè)定益心舒膠囊中的人參皂苷Rb1、Rg1、Re的含量，馮中等[5]則對(duì)不同廠家復(fù)方丹參片中三七皂苷R1和人參皂苷Re、Rg1、Rb1含量進(jìn)行HPLC測(cè)定，而chen等[6]利用HPLC-MS對(duì)人參皂苷Rg1、Re進(jìn)行快速分離提取及含量測(cè)定。但根據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)所測(cè)定的人參皂苷成分比較單一，很難反映藥材整體質(zhì)量的優(yōu)劣。也有對(duì)3種以上人參皂苷進(jìn)行同時(shí)測(cè)定，只是分析時(shí)間較長(zhǎng)，條件繁瑣，有些皂苷也沒(méi)有很好的分離出來(lái)[7-8]。人參皂苷Rb1、Rb2、Re、Rd、Rc、Rf、Rg1、F2、Rg3、Rh2為人參中的主要皂苷類成分，具有重要的藥用價(jià)值。如果能夠摸索出一個(gè)同時(shí)測(cè)定這10種人參皂苷單體的HPLC體系，將對(duì)評(píng)價(jià)產(chǎn)物人參皂苷質(zhì)量具有重要促進(jìn)作用。

項(xiàng)目組一直以來(lái)進(jìn)行利用人參培養(yǎng)須根和內(nèi)生菌生產(chǎn)人參皂苷的課題。因此筆者開發(fā)了一組同時(shí)測(cè)定上述10種人參皂苷含量的液相體系，利用該體系對(duì)生物反應(yīng)器培養(yǎng)的人參培養(yǎng)須根及內(nèi)生菌生產(chǎn)人參皂苷[9]進(jìn)行分析，達(dá)到很好的定性定量效果，以期為人參培養(yǎng)須根及內(nèi)生菌中人參皂苷質(zhì)量進(jìn)行多成分指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)提供技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 研究對(duì)象。不同批次的人參初代培養(yǎng)根，為韓國(guó)江原道野生山參（Panax ginseng C.A.May.）的須根（韓國(guó)江原大學(xué)山林科學(xué)學(xué)院崔龍義教授鑒定）誘導(dǎo)而來(lái)，繼代用無(wú)菌培養(yǎng)須根由東北林業(yè)大學(xué)生命學(xué)院由香玲教授提供。

1.1.2 主要儀器。Waters e26952998液相色譜系統(tǒng)，購(gòu)自Waters公司；DHAUS AR2140電子天平和FW135中草藥粉碎機(jī)，購(gòu)自天津市泰斯特儀器有限公司；N-1001旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，購(gòu)自上海愛朗儀器有限公司。

1.1.3 主要試劑。人參皂苷Rb1（41753439，HPLC≥98%）、Rb2（11021139，HPLC≥98%）、Re（51542564，HPLC≥98%）、Rf（52286585，HPLC≥98%）、Rg1（22427390，HPLC≥98%）、F2（62025494，HPLC≥98%），Rh2（111764 200601，HPLC≥98%），Rc（11021140，HPLC≥98%），Rd（52705938，HPLC≥98%），Rg3（110804-200603，HPLC≥98%）對(duì)照品，均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。乙腈為色譜純（DIKMA），水為超純水，甲醇為色譜純（DIKMA），市售。

1.1.4 供試菌種。G22[9]，由實(shí)驗(yàn)室從龍牙楤木提取獲得的內(nèi)生菌。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件。色譜柱為Waters Symmetry C18 Synergi（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱溫為30 ℃；以乙腈為流動(dòng)相A，超純水為流動(dòng)相B，按表1中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為203 nm；進(jìn)樣量為10 μl。

1.2.2 對(duì)照品溶液的制備。精密稱取適量人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd、F2、Rg3、Rh2對(duì)照品，加濃度100%甲醇稀釋制得濃度0.2 mg/ml的人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd、F2、Rg3、Rh2的混合對(duì)照品溶液。

1.2.3 方法學(xué)考察。（1）系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)。取適量對(duì)照品溶液、供試品溶液和G22溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣，測(cè)定系統(tǒng)適用性。（2）線性關(guān)系的考察。精密稱取對(duì)照品適量制成混合對(duì)照品溶液，分別精密吸取對(duì)照品溶液10、20、30、40和50 μl進(jìn)樣測(cè)定，以含量值X為橫坐標(biāo)，峰面積積分值Y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算線性回歸方程。（3）試驗(yàn)精密度。精密吸取上述對(duì)照品溶液10 μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積，根據(jù)所得峰面積考察精密度。（4）試驗(yàn)重復(fù)性。精密稱取6份同一批次人參藥材樣品各1.000 g，制備6份供試品溶液，按上述色譜條件分別進(jìn)行進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算各成分含量和RSD。（5）試驗(yàn)穩(wěn)定性。精密稱取同一供試品溶液，在上述色譜條件下分別于0、2、4、6、8、12和24 h進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd、F2、Rg3、Rh2峰面積的RSD。（6）試驗(yàn)回收率。精密量取已知含量的供試品溶液0.8 ml，精密加入 “1.2.2” 項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液0.8 ml，搖勻。平行制備6份供試品溶液，并按上述色譜條件進(jìn)行進(jìn)樣測(cè)定。計(jì)算人參皂苷的平均回收率和RSD。

1.2.4 人參培養(yǎng)須根皂苷的提取。（1）干燥。將收獲的人參培養(yǎng)須根放入烘箱中干燥，溫度設(shè)置為50 ℃。（2）粉碎。將干燥后的材料放入中草藥粉碎機(jī)中打成粉末狀，并在電子天平上精確稱取1.000 g。（3）萃取。稱取后的材料置于50 ml離心管中，精密加入25 ml濃度80%的甲醇，蓋嚴(yán)，超聲萃?。?5 ℃，100 HZ）50 min，每10 min晃動(dòng)搖勻一次，取上清液，轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管。向底物中重新加入25 ml甲醇重復(fù)萃取1次，合并上清液。（4）離心。高速離心5 min（3 000 r/min），取上清液進(jìn)行蒸發(fā)。（5）蒸發(fā)。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（80 ℃，80 r/min）旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)提取液提取皂苷。（6）過(guò)濾。得到的干燥物用2 ml濃度20%的乙腈溶解，搖勻，用一次性過(guò)濾器濾過(guò)，取濾液，該濾液即為供試品溶液。

1.2.5 內(nèi)生菌G22皂苷的提取。（1）萃取：將25 ml菌液置于50 ml離心管中，精密加入25 ml濃度100%的乙酸乙酯，蓋嚴(yán)，超聲萃?。?5 ℃，100 hz）50 min，每10 min晃動(dòng)搖勻1次，取上清液，轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管。向底物中重新加入25 ml乙酸乙酯重復(fù)萃取1次，合并上清液。（2）離心。高速離心5 min（3 000 r/min），取上清液進(jìn)行蒸發(fā)。（3）蒸發(fā)。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（80 ℃，80 r/min）旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)提取液提取皂苷。（4）過(guò)濾。得到的干燥物用2 ml濃度20%的乙腈溶解，搖勻，用一次性過(guò)濾器濾過(guò)，取濾液，該濾液即為供試品溶液。

1.2.6 樣品測(cè)定。按上述供試品的制備方法和色譜條件，測(cè)定不同批次人參培養(yǎng)須根樣品和內(nèi)生菌G22中人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd、F2、Rg3、Rh2總量，重復(fù)3次。

1.2.7 數(shù)據(jù)分析。所有生化分析數(shù)據(jù)均用Excel 2007進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和圖表繪制，色譜圖片由液相軟件Empower 3直接截圖而來(lái)。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法學(xué)考察 （1）系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)。圖1～3表明，對(duì)照品溶液和供試品溶液在相同的保留時(shí)間上有對(duì)應(yīng)的吸收峰，且分離度良好，表明系統(tǒng)適應(yīng)性良好。（2）線性關(guān)系的考察。由表2可知，在各自范圍內(nèi)，人參皂苷濃度與峰面積的線性關(guān)系良好。（3）試驗(yàn)精密度。計(jì)算得人參皂苷Rg1峰面積的RSD為2.24%，Re峰面積的RSD為1.32%，Rf峰面積的RSD為1.66%，Rb1峰面積的RSD為1.39%，Rc峰面積的RSD為1.28%，Rb2峰面積的RSD為1.33%，Rd峰面積的RSD為0.71%，F(xiàn)2峰面積的RSD為1.97%，Rg3峰面積的RSD為1.75%，Rh2峰面積的RSD為2.08%，表明儀器精密度良好。（4）試驗(yàn)重復(fù)性。計(jì)算得人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd、F2、Rg3、Rh2總量的含量平均值為7.71 mg/ml，RSD均小于3.0%，說(shuō)明該方法重復(fù)性良好。（5）試驗(yàn)穩(wěn)定性。計(jì)算得人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd、F2、Rg3、Rh2峰面積的RSD在0.71%～2.24%，表明該供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。（6）試驗(yàn)回收率。由表3可知，各人參皂苷平均回收率均在95.07%～108.72%，RSD<3%，說(shuō)明方法回收率良好，可用于人參培養(yǎng)須根及內(nèi)生菌中皂苷含量進(jìn)行多指標(biāo)質(zhì)量控制。

3 討論

3.1 指標(biāo)的選擇 研究表明，人參中有多種成分具有抗氧化、抗應(yīng)激、抗腫瘤等活性，其中主要活性成分是人參皂苷。2008年發(fā)布的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 22996-2008給定了6種人參皂苷單體的測(cè)量方法，這6種皂苷分別為人參皂苷Re、Rg1、Rf、Rb1、Rc、Rb2，而2010年中國(guó)藥典給定了人參皂苷Rg1、Re、Rb1的測(cè)定方法。通常研究者們根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和自己研究的側(cè)重點(diǎn)選取不同人參皂苷單體作為測(cè)量目標(biāo)[8，10]。經(jīng)過(guò)項(xiàng)目組對(duì)人參皂苷成份功能的分析，選取了10種人參皂苷來(lái)進(jìn)行試驗(yàn)測(cè)定，分別是Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd、F2、Rg3、Rh2。人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd等是人參中人參皂苷的主要組成成分，具有不同的藥理活性。其中人參皂苷Rg1和Rd對(duì)中樞神經(jīng)類疾病具有良好的療效[11-12]，人參皂苷Rb1和Rf在抗氧化、清除氧自由基、提高記憶力等方面有較強(qiáng)活性[13-14]，人參皂苷Rb2具有抗感染活性[15]；Re能降血糖、抗氧化等功能[14，16]，Rc能延長(zhǎng)溶血發(fā)生的滯后時(shí)間[17]。稀有人參皂苷F2能夠引起乳腺腫瘤干細(xì)胞凋亡[18]，Rh2、Rg3則具有抗腫瘤等活性[19-21]，在腫瘤治療上表現(xiàn)出很高的應(yīng)用價(jià)值，格外值得關(guān)注。

3.2 液相條件的選擇 試驗(yàn)考察了無(wú)水甲醇-超純水、乙腈-超純水、濃度0.05%磷酸-乙腈等不同的梯度洗脫系統(tǒng)，發(fā)現(xiàn)乙腈-超純水系統(tǒng)和0.05%磷酸-乙腈梯度洗脫效果要明顯一些，而且由于乙腈黏度小，可以有效降低系統(tǒng)壓力，雖然利用0.05%磷酸作為流動(dòng)相B時(shí)能得出很好的峰形，但與以超純水作為流動(dòng)相B所出的峰形相差很小。所以，為了簡(jiǎn)便的測(cè)定，最終選用乙腈-超純水系統(tǒng)梯度洗脫法進(jìn)行分離。根據(jù)人參皂苷類成分最佳紫外吸收波長(zhǎng)，設(shè)定HPLC體系的紫外吸收波長(zhǎng)為203 nm。而在對(duì)柱溫的選擇是通過(guò)考察25、28和30 ℃時(shí)色譜峰的分離度，結(jié)果顯示30 ℃時(shí)色譜峰分離良好，故色譜柱溫選擇30 ℃。

選擇合適的梯度是分離人參單體皂苷的關(guān)鍵，而由于Rg1和Re極性相似，所以Rg1和Re很難分離。有文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)它們進(jìn)行分離試驗(yàn)，但分離時(shí)間長(zhǎng)且條件繁瑣，或是峰形不佳。如2008年版的《中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)匯編》[7]是以高效液相色譜法測(cè)定生曬人參的人參皂苷Re、Rg1、Rf、Rb1、Rc、Rb2含量，且標(biāo)準(zhǔn)含量檢出限除了人參皂苷Rf為25 mg/kg之外，其他人參皂苷Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2均為50 mg/kg。該方法測(cè)定的人參皂苷Rg1和Re保留時(shí)間太接近，相差只有0.239 min，而人參皂苷Rf與Rb1、Rb1與Rc保留時(shí)間分別相差0.296和0.23 min，不能很好的對(duì)這幾種皂苷單體進(jìn)行分離。而且該標(biāo)準(zhǔn)只是測(cè)定了6種人參皂苷，還有其他重要的人參皂苷沒(méi)有進(jìn)行測(cè)定。曹樹萍等[8]利用HPLC法測(cè)定了參麥注射液中9種人參皂苷的含量，但該方法測(cè)定得出的液相圖譜中各皂苷峰形不是很好，且Rg1和Re沒(méi)有完全分離開來(lái)。試驗(yàn)色譜條件是在文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上優(yōu)化而成，在35～45 min，采用19%的乙腈梯度洗脫使人參皂苷Rg1和Re達(dá)到基本分離，所以試驗(yàn)的梯度洗脫條件能達(dá)到對(duì)Rg1和Re的分離目的。

試驗(yàn)對(duì)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室中人參培養(yǎng)須根及內(nèi)生菌G22中10種皂苷成分進(jìn)行了含量測(cè)定，其結(jié)果符合《中華人民共和國(guó)藥典》（2010年版）[2]中對(duì)Rg1、Re、Rb1含量測(cè)定的要求。研究表明人參皂苷試驗(yàn)的精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性、回收率試驗(yàn)的范圍均符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明，在研究介紹的高效液相色譜條件下分離的人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd、F2、Rg3、Rh2峰形良好，分離效果也比較理想。所以試驗(yàn)探索的研究方法快準(zhǔn)確簡(jiǎn)便，穩(wěn)定可靠，可以用來(lái)對(duì)人參藥材及內(nèi)生菌的產(chǎn)物皂苷進(jìn)行質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)

[1] 楊金玲，高麗麗，朱平.人參皂苷生物合成研究進(jìn)展[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，2013，48（2）：170-178.

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

[3] 林世和，余南才，易艷東，等.HPLC法測(cè)定人參蘆中人參皂苷Rb1、Rg1、Re的含量[J].中國(guó)藥師，2010（4）：531-533.

[4] 許乾麗，茅向軍，熊慧林.HPLC測(cè)定益心舒膠囊中人參皂苷Rg1，Re的含量[J].中國(guó)中藥雜志，2005（18）：1462-1463.

[5] 馮中，李曉燕，劉波，等.HPLC測(cè)定不同廠家復(fù)方丹參片中三七皂苷R1和人參皂苷Re、Rg1、Rb1含量[J].中成藥，2009（1）：71-74.

[6] CHEN F，LUO J，KONG L.Fast isolation of ginsenosides Re and Rg1 from the roots of panax ginseng by HSCCCELSD combined with MCI GEL CC guided by HPLCMS[J].Journal of Liquid Chromatography Related Technologies，2012，35（7）：912-923.

[7] 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社.中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)匯編[G].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.

[8] 曹樹萍，聶黎行，王鋼力，等.HPLC 法同時(shí)測(cè)定參麥注射液中9 個(gè)人參皂苷的含量[J].藥物分析雜志，2011，31（3）：476-478.

[9] WU H，YANG H Y X.Isolation and characterization of saponinproducing fungal endophytes from Aralia elata in Northeast China[J].International Journal of Molecular Sciences，2012，13（12）：16255-16266.

[10] 趙亮，呂磊，紀(jì)松崗，等.高效液相色譜法快速測(cè)定人參中8種主要皂苷類成分的含量[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，29（12）：1507-1510.

[11] 張經(jīng)緯，王廣基，孫建國(guó).人參皂苷Rgl的藥效學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2007（6）：283-288.

[12] 張琛，趙鋼.人參皂苷Rd的藥理作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)新藥雜志，2011（11）：953-958.

[13] 石艷清，張靜，朱元貴，等.人參皂苷Rb1 改善快速老化小鼠P8 學(xué)習(xí)記憶功能障礙[EB/OL].http：//www.paper.edu.cn/releasepaper/content/201103-131.

[14] CHOA W C S，CHUNG W S，LEE S K W，et al.Ginsenoside Re of Panax ginseng possesses significant antioxidant and antihyperlipidemic efficacies in streptozotocininduced diabetic rats[J].European Journal of Pharmacology，2006，550（1/3）：173-179.

[15] 李冬梅.人參皂苷Rb2體外抗感染研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011（7）：1284-1286.

[16] 孟凡麗，蘇曉田，鄭毅男.人參皂苷Rb3對(duì)糖尿病模型小鼠的降血糖和抗氧化作用[J].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2013（4）：553-557.

[17] LIU Z Q，LUO X Y，SUN Y X，et al.Can ginsenosides protect human erythrocytes against free- rad icalinduced hemolysis？[J].Biochim Biophys Acta，2002，1572（1）：58-66.

[18] MAI T T，MOON J，SONG Y，et al.Ginsenoside F2 induces apoptosis accompanied by protective autophagy in breast cancer stem cells[J].Cancer Letters，2012，321（2）：144-153.

[19] WU N，WU G C，HU R，et al.Ginsenoside Rh2 inhibits glioma cell proliferation by targeting microRNA128[J].Acta Pharmacologica Sinica，2010，32（3）：345-353.

[20] HE B C，GAO J L，LUO X，et al.Ginsenoside Rg3 inhibits colorectal tumor growth through the downregulation of Wnt/βcatenin signaling[J].International Journal of Oncology，2010，38（2）：437-455.

[21] ZHANG C，LIU L，YU Y，et al.Antitumor effects of ginsenoside Rg3 on human hepatocellular carcinoma cells[J].Molecular Medicine Reports，2012，5（5）：1295-1298.